HPLC vs. LCMS: Kiun vi devas elekti? 5 poentoj

Principo de operacio

HPLC

HPLC estas kromatografia tekniko, kiu disigas komponaĵojn bazitajn sur iliaj interagoj kun la senmovaj kaj moveblaj fazoj. En HPLC, likva movebla fazo estas pumpita tra kolumno plenigita kun senmova fazo, kiu kutime estas kunmetita de malgrandaj eroj de siliko aŭ polimeroj. Kiam ekzempla miksaĵo estas enkondukita en la sistemo, la komponentoj estas apartigitaj surbaze de sia afineco por la stacia fazo. Komponaĵoj, kiuj interagas pli forte kun la senmova fazo eluzita pli malrapide, dum komponaĵoj, kiuj interagas malpli forte, eluzas pli rapide. La apartaj komponaĵoj tiam estas detektitaj uzante diversajn detektilojn, kiel UV-vis, fluoreskeco, aŭ refraktaj indeksaj detektiloj.

Volas scii pli pri la aplikoj de kromatografiaj flapoj, bonvolu kontroli ĉi tiun artikolon:15 Aplikoj de kromatografiaj flapoj en malsamaj kampoj

LCMS

LCMS kombinas la apartajn kapablojn de HPLC kun la masaj analizaj kapabloj de masa spektrometrio. En LCMS, specimenoj unue estas apartigitaj per HPLC, same kiel en konvencia HPLC. Tamen, anstataŭ esti detektita de konvencia detektilo, la eluitaj komponaĵoj estas enkondukitaj en masa spektrometro. La masa spektrometro ionizas la komponaĵojn kaj mezuras sian mason-al-ŝarĝan rilatumon, provizante detalajn informojn pri la molekula pezo kaj strukturo de la analito. Ĉi tiu kombinaĵo de apartigo kaj masa spektrometrio provizas pli grandan sentivecon kaj specifecon ol HPLC sole.

Apartiga mekanismo

HPLC:HPLC uzas altan premon por puŝi likvan moveblan fazon tra plenplena kolumno enhavanta senmovan fazon. Komponaĵoj estas apartigitaj surbaze de iliaj diferencaj interagoj kun la senmova fazo, rezultigante precizajn kaj efikajn apartigojn.

LCMS:LCMS kombinas la fizikajn apartigajn kapablojn de HPLC kun la masaj spektrometriaj kapabloj de masa spektrometrio (MS). La likva kromatografia komponento disigas la komponaĵojn, dum la masa spektrometro mezuras la mason-al-ŝarĝan rilatumon de la jonigita specio.

Sentiveco kaj selektiveco

HPLC:HPLC havas bonan sentivecon kaj selektivecon, precipe kiam kombinitaj kun progresintaj detektiloj kiel UV-vis, fluoreskeco, aŭ diodaj tabelaj detektiloj. Tamen, HPLC sole eble ne provizas adekvatan specifecon por kompleksaj specimenoj.

LCMS:LCMS havas superan sentivecon kaj selektivecon kompare al HPLC. Masaj spektrometroj povas precize identigi kaj kvantigi komponaĵojn bazitajn sur siaj unikaj mas-al-ŝarĝaj kialoj, eĉ en kompleksaj matricoj. Ĉi tio faras LCM -ojn precipe utilajn por analizi spurajn komponaĵojn kaj konfirmi la identecon de nekonataj substancoj.

HPLC:Specimenpreparo por HPLC tipe implikas diluvon, filtradon aŭ simplajn eltirajn teknikojn. Specimenoj ne bezonas forvaporiĝi, do HPLC taŭgas por vasta gamo de komponaĵoj, inkluzive de polusaj kaj nevolaj substancoj.

LCMS:Specimenpreparo por LCMS estas simila al tiu por HPLC, sed aldonaj paŝoj povas esti bezonataj por certigi kongruon kun la masa spektrometro. Ekzemple, volatilaj bufroj aŭ aldonaĵoj povas esti bezonataj por plibonigi jonigon kaj malhelpi jonan forigon.

Aplikoj

HPLC:HPLC estas vaste uzata por la analizo de farmaciaĵoj, manĝaĵoj kaj mediaj specimenoj. Ĝi estas aparte efika por disigi kaj kvantigi komponaĵojn en kompleksaj miksaĵoj, kiel drogaj malpuraĵoj, manĝaĵaj aldonaĵoj kaj pesticidaj restaĵoj.

LCMS:LCMS havas ampleksan gamon de aplikoj, inkluzive:

Farmacia Analizo: Uzita en Drog -Malkovro, Disvolviĝo kaj Kvalito -Kontrolo.

Proteomiko kaj metabolomiko: uzataj por identigi kaj kvantigi proteinojn kaj metabolitojn en biologiaj specimenoj.

Media analizo: Uzita por detekti spurojn en akvo, grundo kaj aeraj specimenoj.

Scivola pri la rolo de atestitaj HPLC -flapoj en certigado de preciza ekzempla analizo? Legu ĉi tiun artikolon: La graveco de atestitaj HPLC -flapoj por preciza specimena analizo

Konkludo

HPLC kaj LCMS estas ambaŭ potencaj analizaj teknikoj kun siaj propraj fortoj kaj limigoj. La elekto inter ambaŭ dependas de la specifaj postuloj de la analizo, kiel sentiveco, selektiveco, ekzempla komplekseco kaj disponeblaj rimedoj.

HPLC estas bona elekto por rutina analizo de konataj komponaĵoj en relative simplaj matricoj, kie kosto kaj facileco de uzo estas gravaj faktoroj. LCMS, aliflanke, estas la preferata tekniko por analizado de kompleksaj specimenoj, identigado de nekonataj komponaĵoj kaj atingado de ultra-trafa nivelo detekto.

Ĉar teknologio daŭre antaŭas, la integriĝo de HPLC kaj LCMS ludos ĉiam pli gravan rolon por plenumi la evoluajn bezonojn de analiza kemio kaj certigi altkvalitajn rezultojn tra diversaj aplikoj.