Preparación de muestras y filtración: garantizar la calidad en la cromatografía

La preparación adecuada de la muestra: recipientes limpios, eliminar las partículas, enriquecer los analitos y, si es necesario, derivatizar) elimina más del 90% de las anomalías de ruido y presión basales, asegurando picos agudos y líneas de base estables. La falla aquí da como resultado una cola máxima, líneas de base a la deriva o bloqueo de columna.

1. Interferencia de contaminación e matriz

Problema

• Drift de línea de base y ruido creciente oscuros picos menores.

• Los picos inesperados aparecen de impurezas lixiviadas.

• Mala reproducibilidad entre inyecciones.
  

  

Causa

• Residuos en cristalería: el ácido incompleto deja silicatos; Plasticware puede lixiviar plastificantes.

• Agentes de limpieza: Trace Organics en solventes de enjuague permanecen adsorbidos.

• Partículas ambientales: el polvo de aire de laboratorio y los VOC se adsorben en muestras abiertas.
  

  

Solución

1. SOP de limpieza estricto: Ácido → enjuague ultrasónico de agua pura → nitrógeno seco para cristalería; Detergente dedicado para plásticos.

2. Prefiltración: Centrifuge a 3000 rpm durante 10 minutos o use un prefiltro de 5 µm antes de la filtración final de 0.22 µm.

3. Entorno controlado: Realice la preparación en una campana de flujo laminar para minimizar la contaminación en el aire.
   
   

2. Cubro de filtro de filtros incompatibles

Problema

• Alarmas de presión de muestreón automático y reemplazos frecuentes de agujas.

• Disminución de la velocidad de flujo, áreas máximas inconsistentes.

• Backresión elevada y bloqueo de entrada de columna.
  

  

Causa

• Deseginimiento de la membrana: el nylon se hincha en solventes orgánicos; PVDF se arrastra a temperatura elevada.

• Tamaño de poro incorrecto: filtros de 0.22 µm atrapan partículas finas pero reducen el flujo; Los filtros de 0.45 µm aún pueden obstruir con microcristales.

Solución

1. Matriz de membrana -solvente: Use PES hidrófilo \ / MCE para PTFE acuoso (PH4–8), PTFE \ / PVDF para fases orgánicas; Evite el acetato de celulosa en ácidos fuertes.

2. Seleccione el tamaño adecuado de los poros: Use 0.45 µm para HPLC de rutina, 0.22 µm para UHPLC o trabajo de rastreo; Prefilter Muestras de alta viscosidad a través de 5 µm.

3. Monitorear ΔP: Lave de presión de seguimiento; Reemplace el filtro cuando aumente la contrapresión> 15%.
   
   

   

3. Incompatibilidad química solvente -membrana

Problema

• La muestra filtrada parece turbia o transporta partículas.

• Nuevo ruido de línea de base o picos de fantasma después de la filtración.

• Reducción de la recuperación del analito.
  

  

Causa

• Hinchazón con solvente: THF Supls PTFE, alterando el tamaño y el flujo de poros.

• Licencias de membrana: el nylon en ácido fórmico libera oligómeros que absorben a 214 nm.

Solución

1. Prueba de compatibilidad: Sume filtro en solvente previsto para 24 h a 25 ° C; Inspeccionar por hinchazón o cambio de peso.

2. Prueba piloto de LC -MS: Compare los cromatogramas iónicos totales de la muestra filtrada frente a la muestra sin filtro.

3. Utilice filtros de baja leído: PTFE o PES con llave ultrasónica sin adhesivos.
   
   

Sistema de calidad: defensa -monitoreo - corrección

Defensa

Estandarizar los SOP para la limpieza, la filtración y la selección de la membrana para evitar errores.

Escucha

Registre la velocidad de flujo, la contrapresión y las líneas de base en blanco para detectar la deriva.

Corrección

Mantenga un análisis de árbol de fallas para la identificación rápida de la causa de la raíz y la acción correctiva.

"La precisión analítica comienza a interceptar la partícula más pequeña".