Flash -kromatograafia vs HPLC: üksikasjalik võrdlus

Kromatograafia on analüütilise keemia põhitehnika, mida kasutatakse ühendite eraldamiseks ja puhastamiseks segust. Erinevate olemasolevate meetodite hulgas on Flash -kromatograafia ja suure jõudlusega vedelikkromatograafia (HPLC) kaks silmapaistvat tehnikat, millest igaühel on ainulaadsed eelised ja rakendused. See artikkel sukeldub sügavalt Flash -kromatograafia vs HPLC põhimõtete, eeliste, puuduste, rakenduste ja üldise tõhususe poole.

Kas soovite rohkem teada saada HPLC näidise ettevalmistamise kohta, palun kontrollige seda artiklit:HPLC proovide ettevalmistamise lahendused parimate tulemuste saamiseks

1. operatsiooni põhimõte

Flash -kromatograafia on ettevalmistav tehnika, mis kasutab survestatud lahustit proovi edastamiseks statsionaarse faasiga, tavaliselt ränidioksiidi geeliga täidetud kolonni kaudu. Proov laaditakse kolonni ja kui lahusti läbi voolab, eraldatakse segu erinevad komponendid vastavalt nende interaktsioonile statsionaarse faasiga. Protsess on suhteliselt kiire, ühendid puhastatakse vaid mõne minutiga.

HPLC seevastu on keerukam tehnika, mis hõlmab ka vedela proovi läbiviimist läbi statsionaarse faasi materjaliga täidetud kolonni. Kuid HPLC töötab kõrgema rõhu korral (kuni 4000 psi või rohkem) ja kasutab tavaliselt väiksemaid statsionaarse faasiosakeste suurusi (3-5 um). See võimaldab suuremat eraldamise efektiivsust ja eraldusvõimet kui välgukromatograafia. Kuna HPLC suudab täpselt kontrollida temperatuuri, rõhu ja voolukiirust, võib see saavutada väga täpse eraldumise.

2. seadmed ja seadistamine

Kahe tehnika seadmed erinevad suuresti:

Flash -kromatograafia nõuab mobiilse etapi tagamiseks lihtsamat seadistust, mis koosneb välklambi veerust ja pumbast. Üldiselt on see kulutõhusam ja hõlpsamini töötav kui HPLC-süsteem.

HPLC süsteemid on keerukamad, sisaldavad keerukaid pumbasid, detektoreid (näiteks UV-VIS) ja andmete hankimissüsteeme. Kuna HPLC seadmed on tehnoloogiliselt arenenud, on selle algsed investeeringud üldiselt kõrgemad.

3. Kiirus ja tõhusus

Üks olulisemaid erinevusi välklambi kromatograafia ja HPLC vahel on nende kiirus:

Flash -kromatograafia võib ühendeid kiiresti puhastada, lõpetades eraldused sageli 30 minuti jooksul. See kiirus on eriti kasulik orgaaniliste keemikute jaoks, kes peavad reaktsioonitooteid kiiresti eraldama.

Kuigi HPLC on eraldamise kvaliteedi osas väga tõhus, kulub sarnaste ülesannete täitmiseks oma hoolika olemuse ja suurema eraldusjõu tõttu tavaliselt kauem - iga proovi jooks võtab sageli rohkem kui tund.

4. puhtus ja eraldusvõime

Flash -kromatograafia on ühendi vahepealseks puhastamiseks väga efektiivne, kuid see ei pruugi pakkuda lõpptoote analüüsimiseks vajalikku kõrget puhtuse taset. Üldiselt võib see saavutada hea puhtuse taseme, kuid ei pruugi olla sobiv väga keerukate segude jaoks, kus kõrge eraldusvõime on kriitiline.

HPLC paistab silma kõrge puhtusega ühendite pakkumisega, kuna see on võimeline eraldamistingimusi peenemaks häälestama. Sageli on vaja keerukate segudega tegelemisel või kõrge eraldusvõimega eraldamise korral.

5. Proovimaht

Flash -kromatograafia võimaldab üldiselt suuremat proovi koormust kui HPLC. See võime muudab selle sobivaks suure hulga ühendite puhastamiseks, mis on algse sünteesi etappides kasulik.

Ehkki HPLC, ehkki suudab käsitseda laia valiku suurusega, on selle väiksema kolonni osakeste suuruse ja kõrgema rõhuvajaduse tõttu üldiselt madalama koormuse mahutavused.

6. Maksumus kaalutlused

Maksumus on Flash -kromatograafia ja HPLC vahel valimisel oluline tegur:

Flash -kromatograafia on odavam, nii seadmete kui ka tegevuskulude osas. Lihtsam on seadistada ja nõuab vähem hooldust, muutes selle piiratud eelarvega laboritele atraktiivseks.

Kuigi HPLC -l on suurepärane eraldusvõime ja puhtus, on sellel süsteemi keerukuse ja kallite tarbekaupade, näiteks veergude ja lahustite vajaduse tõttu kõrged tegevuskulud.

7. Rakendused

Mõlemal tehnikal on erinevates valdkondades erinev kasutamine:

Flash -kromatograafiat kasutatakse laialdaselt orgaanilises sünteesis reaktsioonitoodete kiireks puhastamiseks. See on eriti populaarne akadeemilises keskkonnas, kus uurimisprojektides on vaja ühendite kiiret eraldamist.

HPLC -d kasutatakse laialdaselt farmatseutilises valdkonnas ravimite koostiste analüüsimiseks, saasteainete tuvastamiseks keskkonnakatsetes, saasteaineid toiduohutuse testimisel ja biokeemilistes uuringutes, kus on vaja analüütide täpset kvantifitseerimist.

Eelised ja puudused

Välklambi kromatograafia

Eelised: kiire puhastusaeg. Madalamad seadmed ja töökulud. Vajalik on lihtsam seadistus ja vähem tehnilisi teadmisi. Kõrgem proovi kandevõime.

Puudused: madalam eraldusvõime võrreldes HPLC -ga. Ei pruugi saavutada lõpptoote analüüsimiseks vajalikku kõrget puhtusastet. Vähem efektiivne keerukate segude jaoks, mis nõuavad peene eraldamist.

Suure jõudlusega vedelikkromatograafia

Eelised: kõrge eraldusvõime ja puhtuse tase. Võimalus keerukate segude tõhusalt analüüsida. Töötingimuste täpne kontroll parandab reprodutseeritavust.

Puudused: aeglasem töötlemisaeg. Suuremad algsed investeeringud ja tegevuskulud. Keerukamad seadmed nõuavad spetsiaalset koolitust.

Kokkuvõtlikult on Flash -kromatograafial ja HPLC -l kõigil eeliseid ja puudusi ning need sobivad analüütilise keemia erinevateks rakendusteks. Flash-kromatograafia on kiire ja odav, muutes selle ideaalseks kiireks puhastusülesanneteks orgaanilise sünteesi korral. Seevastu HPLC -l on suurepärane eraldusvõime ja puhtus, mis on vajalik üksikasjalikuks analüütiliseks tööks farmaatsia, keskkonnateaduste ja toiduohutuse testimiseks.

Kas soovite teada 50 vastust HPLC viaalide kohta, palun kontrollige seda artiklit:50 kõige sagedamini esitatavat küsimust HPLC viaalide kohta

Lõppkokkuvõttes sõltub välklambi kromatograafia ja HPLC vaheline valik konkreetsetest laboratoorsetest vajadustest, sealhulgas soovitud puhtuse tase, valimi maht, eelarvepiirangud ja aja kaalutlused. Nende erinevuste mõistmine võimaldab teadlastel valida oma individuaalsete vajaduste jaoks kõige sobivama tehnoloogia, tagades nende kromatograafilise analüüsi parimad tulemused.