Kas teate paberkromatograafiast?

Paberkromatograafia on laialdaselt kasutatav analüütiline tehnika, mis eraldab ja tuvastab ainete segud nende erineva afiinsuse alusel statsionaarse faasi (paber) ja liikuva faasi (lahusti) suhtes. See on eriti kasulik keemia ja biokeemia osas väikeste ainete nagu pigmentide, aminohapete ja muude orgaaniliste ühendite analüüsimisel.

Mis on paberkromatograafia?

Paberkromatograafia on teatud tüüpi vedelikkromatograafia, milles statsionaarne faas on filterpaberi leht ja liikuv faas on lahusti, mis voolab läbi filterpaberi. See tehnika tugineb ühendite diferentsiaalsele jaotamisele statsionaarse faasi (filterpaber) ja liikuva faasi (lahusti) vahel. Kui lahusti liigub filterpaberi kapillaaride abil, kannab see segu komponente erineva kiirusega, lähtudes nende afiinsusest kahe faasi suhtes.

Paberkromatograafia põhiprintsiipe saab mõista kahe peamise mõiste kaudu: partitsioonikromatograafia ja adsorptsioonikromatograafia.

Partitsioonikromatograafia: seda tüüpi jagunevad ained kahe vedela faasi vahel. Statsionaarne faas koosneb veest filterpaberi poorides, liikuv faas on aga nende pooride kaudu liikuv lahusti. Eraldus toimub seetõttu, et erinevatel ühenditel on statsionaarsete ja liikuvate faaside jaoks erinev afiinsus.

Adsorptsioonikromatograafia: siin toimib paberi tahke pind statsionaarse faasina ja vedela lahusti toimib liikuva faasina. Segu komponendid eraldatakse vastavalt nende adsorptsioonile tahke pinnale ja lahustuvusele vedelas faasis.

Komponendid

Statsionaarne faas: kromatograafiline paber, tavaliselt valmistatud tselluloosist. See tagab komponentide pinna, millest kinni jääda.

Mobiilne etapp: lahusti või segu lahustite, mis liigub paberil kapillaaride abil. Lahusti valik võib eraldusprotsessi märkimisväärselt mõjutada.

Proov: analüüsitav segu, tavaliselt paberil määratud lähtepunktis.

Kas soovite rohkem teada saada HPLC näidise ettevalmistamise kohta, palun kontrollige seda artiklit: HPLC proovide ettevalmistamise lahendused parimate tulemuste saamiseks

Paberikromatograafia protsess

Ettevalmistus: tõhusa eraldamise tagamiseks valige kvaliteetne filterpaber, millel on teatud poorsus. Kandke kromatograafiapaberi algtasemele väike osa proovisegust.

Proovi ettevalmistamine: lahustage proovisegu sobivas lahustis liikuva faasi osana.

Kohapeal: kasutage kapillaari või mikropipeti, et vähendada filterpaberile väikese koguse proovilahust.

Arendus: kastke katsepaberi alumine serv arenevasse lahusti (liikuv faas). Kapillaaride toimimise ajal tõuseb lahusti läbi katsepaberi, kandes proovikomponente endaga.

Eraldamine: Lahusti liikudes liiguvad proovi erinevad komponendid erineva kiirusega, kuna nende interaktsioon statsionaarse faasiga ja erineva lahustuvusega liikuvas faasis.

Visualiseerimine: Pärast lahusti rinde on piisavalt kauguse liikunud, paber eemaldatakse lahustist ja jäetakse kuivama. Komponente saab visualiseerida UV -valguse, keemiliste reagentide või värvimuutuste jälgimise abil.

Analüüs: iga komponendi poolt lahusti rinde suhtes läbitud vahemaa mõõdetakse RF väärtuse (retentsiooniteguri) tuvastamiseks.

Paberkromatograafia rakendused

Paberkromatograafial on lai valik rakendusi erinevates valdkondades:

Biokeemia: aminohapete, suhkrute ja muude biomolekulide analüüs.

Farmaatsiatooted: toimeainete ja lisandite tuvastamine ravimite preparaatides. Kasutatakse aktiivsete ühendite ja lisandite tuvastamiseks ravimite koostistes arengu ja kvaliteedikontrolli ajal.

Keskkonnateadus: paberkromatograafiat kasutatakse veeproovides saasteainete tuvastamiseks ja mullaekstraktide saasteainete analüüsimiseks.

Toiduainetööstus: tehnika aitab analüüsida toiduainete lisaaineid, saasteaineid ja värvaineid, et tagada ohutuseeskirjade järgimine.

Paberkromatograafia eelised

Kulutasuvus: see nõuab minimaalset varustust ja materjale võrreldes teiste kromatograafiliste tehnikatega, näiteks HPLC (kõrgjõudlusega vedelikkromatograafia). Lihtsus: protsess on väga lihtne ja seda saab läbi viia põhiliste laboratoorsete tööriistadega, nii et seda saab kasutada hariduslikel eesmärkidel.

Madala proovimahu nõue: analüüsimiseks on vaja ainult väikest kogust proovi, muutes selle ideaalseks väärtuslike või piiratud proovide jaoks.

Mitmekülgsus: see võib eraldada mitmesuguseid aineid, mis põhinevad keemilistel omadustel, sealhulgas polaar- ja mittepolaarsed ühendid

Paberkromatograafia piirangud

Vaatamata oma eelistele on paberkromatograafial mõned piirangud:

Piiratud maht: sobib tavaliselt väikeste proovimahtude jaoks.

Resolutsioon: eraldusvõime ei pruugi olla nii kõrge kui arenenumate tehnikate, näiteks HPLC või gaasikromatograafia (GC) saavutamisel.

Aegnõudev: aeglasema rändekiiruse tõttu võib protsess teiste kromatograafiliste meetoditega võrreldes kauem aega võtta.

Piiratud kvantitatiivne analüüs: kuigi kvalitatiivseid tulemusi saab hõlpsasti saada, võib kontsentratsioonide kvantifitseerimiseks vaja olla täiendavaid kalibreerimismeetodeid.

Paberkromatograafia on väärtuslik tehnika segude eraldamiseks ja analüüsimiseks erinevates teadusvaldkondades. Selle lihtsus, kulutõhusus ja võime pakkuda intuitiivseid tulemusi muudavad selle keemikute ja teadlaste jaoks oluliseks vahendiks. Hoolimata selle piirangutest võrreldes arenenud kromatograafiliste tehnikatega, kasutatakse seda endiselt laialdaselt hariduslikel eesmärkidel ja esialgsel analüüsil laborites.

Kas soovite teada 50 vastust HPLC viaalide kohta, palun kontrollige seda artiklit: 50 kõige sagedamini esitatavat küsimust HPLC viaalide kohta