Näidise ettevalmistamine ja filtreerimine: kvaliteedi tagamine kromatograafias

Nõuetekohane proovi ettevalmistamine - koletid, eemaldage tahked osakesed, rikastavad analüüdid ja vajadusel derivatiseerida - eraldab üle 90% lähtemürast ja rõhu anomaaliatest, tagades teravad piikud ja stabiilsed lähtejooned. Rike siin põhjustab tipu saba, triivimise alused või kolonni ummistused.

1. saastumine ja maatriksi häired

Probleem

• Algtaseme triiv ja kasvav müra varjatud väiksemad tipud.

• Ootamatuid piike ilmneb leostatud lisanditega.

• Halb reprodutseeritavus süstide vahel.
  

  

Põhjus

• Klaasnõude jäägid: mittetäielik happevesi jätab silikadid; Plastistvara võib plastijaid leostuda.

• Puhastusvahendid: Lonse lahustites olevad orgaanilised ained jäävad adsorbeeritud.

• Keskkonnaosakesed: labori õhutolm ja lenduvad ühendid adsorbid avatud proovidele.
  

  

Lahendus

1. Range puhastus SOP: Happeline leotamine → ultrahelipunase vee loputus → lämmastik kuiv klaasnõud; Plastide spetsiaalne pesuvahend.

2. Filtreerimine: Tsentrifuug temperatuuril 3000 p / min 10 minutit või kasutage enne lõplikku 0,22 um filtreerimist 5 um.

3. Kontrollitud keskkond: Tehke õhus leviva saastumise minimeerimiseks laminaarse kapoti ettevalmistamine.
   
   

2. Filtri ummistumine kokkusobimatutest filtritest

Probleem

• Autosamplemeri rõhuhäired ja sagedased nõela asendajad.

• Vähenenud voolukiirus, ebajärjekindlad tipppinnad.

• Kõrgendatud taustrõhk ja kolonni sisselaske ummistus.
  

  

Põhjus

• Membraani ebakõla: nailon paisub orgaanilistes lahustites; PVDF hiilib kõrgendatud temperatuuril.

• Vale pooride suurus: 0,22 um filtrid lõksu peenosakesed, kuid vähendage voolu; 0,45 um filtrid võivad endiselt mikrokristallidega ummistada.

Lahendus

1. Membraan -lahusti maatriks: Kasutage vesilahuse (ph4–8) jaoks hüdrofiilseid PE -sid \ / Vältige tugevate hapete tselluloosatsetaati.

2. Valige korralik pooride suurus: Kasutage rutiinse HPLC, UHPLC või jäljetöö jaoks 0,45 um, 0,22 um; Eelfiltri kõrge viskoossusega proovid läbi 5 uM.

3. Monitori Δp: Rööbaste rõhk tõuseb; Asendage filter, kui selgroog suureneb> 15%.
   
   

   

3. lahusti ja membraanne keemiline kokkusobimatus

Probleem

• Filtreeritud proov on pilves või kannab osakesi.

• Uus algtaseme müra või kummitus tipptasemel pärast filtreerimist.

• Vähendatud analüüdi taastumine.
  

  

Põhjus

• Lahusti turse: THF paisub PTFE, muutes pooride suurust ja voolu.

• Membraani leotajad: sipelghappe nailon vabastab oligomeerid, mis imavad 214nm juures.

Lahendus

1. Ühilduvuse test: Leota filter kavandatud lahustis 24 tunni jooksul temperatuuril 25 ° C; Kontrollige turset või kaaluvahetust.

2. Piloot LC -MS test: Võrrelge filtreeritud ja filtreerimata proovi koguioonkromatogramme.

3. Kasutage madala Leachi filtreid: Ultraheliga pandud PTFE või PES ilma liimideta.
   
   

Kvaliteedisüsteem: kaitse -koristamine - korrigeerimine

Kaitse

Standardiseerige SOP -id puhastamiseks, filtreerimiseks ja membraani valimiseks, et vältida vigu.

Seire

Salvestage triivi tuvastamiseks voolukiirus, tagasirõhk ja tühja valimi lähtejooned.

Parandus

Kiire juurte ja parandusmeetme kiireks tõrkepuu analüüs.

"Analüütiline täpsus algab väikseima osakese pealtkuulamisega."