Errendimendu handiko kromatografia likidoa (HPLC) eta likido kromatografia-masa-espektrometria (LCMS) bi arlo desberdinetan erabiltzen diren hainbat teknika analisi dira, farmaziak, ingurumen zientziak eta bizi zientziak barne. Bi metodoek konposatuak, horien printzipioak, funtzioak eta aplikazioak bereiztea eta analisia dakartzan bitartean oso desberdinak dira. Blog mezu honek HPLC eta LCMS konparatuko ditu, beren desberdintasun funtsezkoak eta teknika bakoitzaren abantailak bideratuko dira.

Eragiketa printzipioa

HPlc

HPLC teknika kromatografikoa da, konposatuak bere interakzioetan oinarritutako fase geldo eta mugikorrekin oinarrituta. HPLC-n, fase mugikor likidoa fase geldi batekin betetako zutabe baten bidez ponpatzen da, normalean silizea edo polimeroen partikula txikiz osatuta dagoena. Lagin nahasketa sisteman sartzen denean, osagaiak bereizten dira fase geldoarentzat. Fase geldoarekin modu biziagoan elkarreragiten duten konposatuak poliki-poliki elaupresexuagoak dira, eta gutxiagotan orekatzen dituzten konposatuak azkarrago elikatu dira. Bereiztutako konposatuak detektagailu ugari hautematen dira, hala nola UV-Vis, fluoreszentzia edo errefrakzio indize detektagailuak.

Kromatografia ontzien aplikazioei buruz gehiago jakin nahi baduzu, egiaztatu artikulu hau:Kromatografia-15 aplikazio alor desberdinetan

Lcms

LCMS-k HPLCren bereizketa gaitasunak uztartzen ditu masa espektrometriaren analisi masiboen gaitasunekin. LCMS-en, laginak lehenik bereizten dira HPLC erabiliz, HPLC konbentzionalean bezala. Hala ere, ohiko detektagailu batek detektatu beharrean, elurtutako konposatuak masa espektrometro batean sartzen dira. Masa-espektrometroak konposatuak ionizatzen ditu eta bere karga-proportzioa neurtzen du, analitiko pisu eta egitura molekularrari buruzko informazio zehatza eskainiz. Bereizketa eta masa-espektrometriaren konbinazio honek HPLCk bakarrik baino sentikortasun eta berezitasun handiagoa eskaintzen du.

Bereizketa mekanismoa

HPLC:HPLC-k presio handia erabiltzen du fase mugikor bat paketatutako fasea duen zutabe baten bidez bultzatzeko. Konposatuak bereizten dira fase geldiarekin dituzten elkarrekintza diferentzialen arabera, bereizketa zehatzak eta eraginkorrak eraginez.

LCMS:LCMS-k HPLC-ren bereizketa fisiko gaitasunak uztartzen ditu masa espektrometriaren masa-espektrometria (ms) gaitasunarekin. Kromatografia likidoaren osagaiak konposatuak bereizten ditu, masa-espektrometroak espezie ionizatuen masa-karga-erlazioa neurtzen duen bitartean.

Sentsibilitatea eta selektibitatea

HPLC:HPLC-k sentsibilitate ona eta selektibitatea du, batez ere UV-Vis, fluoreszentzia edo diodoen detektagailuek detektagailu aurreratuekin konbinatzen direnean. Hala ere, HPLCk bakarrik ez du lagin konplexuentzako berezitasun egokia eman.

LCMS:LCMS-k sentsibilitate eta selektibitate handiagoa du HPLCrekin alderatuta. Masa-espektrometroek konposatuak zehaztasunez identifikatu eta kuantifikatu ditzakete beren karga-arrazoien arabera, matrize konplexuetan ere. Horrek bereziki erabilgarria da trazatutako konposatuak aztertzeko eta substantzia ezezagunen identitatea berresteko.

Laginak prestatzea

HPLC:HPLC-rako laginak normalean diluzioa, filtrazioa edo erauzketa teknika sinpleak dakartza. Laginak ez dira lurrundu behar, beraz, HPLC konposatu sorta zabal baterako egokia da, substantzia polarrak eta ez-barraztatuak barne.

LCMS:Lagina prestatzea LCMS-ren antzekoa da HPLCrentzat, baina urrats osagarriak behar dira masa espektrometroarekin bateragarritasuna ziurtatzeko. Adibidez, buffer lurrunkorrak edo gehigarriak behar dira ionizazioa hobetzeko eta ioiaren ezabatzea saihesteko.

Eska

HPLC:HPLC oso erabilia da farmaziak, elikagaiak eta ingurumen laginak aztertzeko. Bereziki eraginkorra da konposatuak nahasketa konplexuetan bereiztea eta kuantifikatzea, hala nola, droga-ezpurutasunak, elikagaien gehigarriak eta pestizida hondakinak.

LCMS:LCMS-k aplikazio ugari ditu, besteak beste:

Analisi farmazeutikoa: drogen aurkikuntza, garapen eta kalitate kontrolean erabilia.

Proteomika eta metabolomika: proteinak eta metabolitoak lagin biologikoetan identifikatzeko eta kuantifikatzeko erabiltzen da.

Ingurumenaren analisia: uretan, lurzoruan eta aireko laginetan dauden kutsatzaileen arrastoak hautemateko erabiltzen da.

Bitxia da HPLC ziurtagirien eginkizunaren inguruan laginaren azterketa zehatza ziurtatzeko? Irakurri artikulu hau: Laginaren azterketa zehatza lortzeko Ziurtagiriaren HPLC Vials-en garrantzia

Bukaera

HPLC eta LCMS teknika analitiko indartsuak dira beren indarguneak eta mugak dituztenak. Bien arteko aukera analisiaren eskakizun zehatzen araberakoa da, hala nola sentikortasuna, selektibitatea, lagin konplexutasuna eta erabilgarri dauden baliabideak.

HPLC aukera ona da matrize nahiko sinpleetan konposatu ezagunen azterketa errutina egiteko, non balio kostua eta erabilerarako faktore garrantzitsuak dira. LCMS, bestalde, lagin konplexuak aztertzeko teknika hobetsia da, konposatu ezezagunak identifikatzea eta maila ultra-maila hautematea lortzea.

Teknologiak aurrera egiten jarraitzen duen heinean, HPLC eta LCMS-k gero eta garrantzi handiagoa du kimika analitikoaren beharrak bilatzean eta kalitate handiko emaitzak hainbat aplikaziotan bermatuz.

Aurrekoa:

Zuretzat 0,45 mikro xiringaren azken gida

Hurrengoa:

Headspace GC lagin prestaketari buruz jakin behar duzun guztia