Preparación e filtración da mostra: garantir a calidade na cromatografía

A preparación de mostra adecuada: recipientes de limpeza, elimina partículas, enriquecen os analitos e, se é necesario, derivatiza, elimina máis do 90% do ruído de base e das anomalías de presión, asegurando picos afiados e bases estables. O fracaso dá como resultado o colo de pico, as liñas de base ou o bloqueo de columnas.

1. Interferencia de contaminación e matriz

Problema

• Deriva de base e ruído en aumento escuro picos menores.

• Os picos inesperados aparecen de impurezas lixiviadas.

• Mala reproducibilidade entre inxeccións.
  

  

Causa

• Residuos en vidro: o lavado de ácido incompleto de follas de follas de silicato; Plastware pode lixiviarse.

• Axentes de limpeza: os orgánicos de rastrexo en disolventes de aclarado permanecen adsorbidos.

• Partículas ambientais: po de aire e COV de laboratorio adsorben sobre mostras abertas.
  

  

Solución

1. SOP de limpeza estrita: ACAMO → Enxágüe de auga pura ultrasónica → Nitróxeno seco para cristalería; deterxente dedicado aos plásticos.

2. Pre -filtración: Centrífuga a 3000rpm durante 10 minutos ou use un prefiltro de 5 µm antes da filtración final de 0,22 µm.

3. Ambiente controlado: Realice a preparación nun capó de fluxo laminar para minimizar a contaminación no aire.
   
   

2. Filtro obstruíndo de filtros incompatibles

Problema

• Alarmas de presión do autosamplador e substitucións frecuentes de agulla.

• Diminución do caudal, áreas de pico inconsistentes.

• Bloqueo elevado de contrapresión e entrada de columna.
  

  

Causa

• Desaxuste da membrana: Nylon incha en disolventes orgánicos; O PVDF racha a temperatura elevada.

• Tamaño incorrecto dos poros: os filtros de 0,22 micras atrapan partículas finas pero reducen o fluxo; Os filtros de 0,45 µm aínda poden obstruír con microcristalos.

Solución

1. Matriz de membrana -solvente: Use Pes hidrofílicas \ / MCE para acuoso (PH4–8), hidrofóbico PTFE \ / PVDF para fases orgánicas; Evite o acetato de celulosa en ácidos fortes.

2. Seleccione o tamaño adecuado dos poros: Use 0,45 micras para HPLC rutineiro, 0,22 µm para UHPLC ou traballo de rastro; Prefilter mostras de alta viscosidade a través de 5 µm.

3. Monitor Δp: Rastrexar o aumento da presión; Substitúe o filtro cando aumenta a retroceso> 15%.
   
   

   

3. Incompatibilidade química de disolvente -membrana

Problema

• A mostra filtrada aparece nublada ou leva partículas.

• Novo ruído de base ou picos de pantasmas post -filtración.

• RECUPERACIÓN DE ANIALITOS REDUCIÓN.
  

  

Causa

• Hinchazón de disolventes: thf incha ptfe, alterando o tamaño e o fluxo dos poros.

• Leachables de membrana: o nylon en ácido fórmico libera oligómeros que absorben a 214 nm.

Solución

1. Proba de compatibilidade: Filtro de empapado no disolvente previsto durante 24 horas a 25 ° C; Inspeccione o inchazo ou o cambio de peso.

2. Proba piloto LC -MS: Compara os cromatogramas de ións totais da mostra filtrada vs. non filtrada.

3. Use filtros de baixo nivel: PTFE ou PES de alta ultrasóns sen adhesivos.
   
   

Sistema de calidade: defensa -monitorización -corrección

Defensa

Estandarizar os SOP para a limpeza, filtración e selección de membranas para evitar erros.

Monitorización

Rexistra o caudal, a retroceso e as liñas de base en branco para detectar a deriva.

Corrección

Manter unha análise de árbores de fallos para a identificación rápida e a acción correctiva da raíz.

"A precisión analítica comeza coa interceptación da partícula máis pequena."