Segondè pèfòmans likid kromatografi (HPLC) se yon teknik analyse kle yo itilize nan laboratwa nan jaden tankou divès kòm edikaman, syans anviwònman, ak sekirite manje. Nan mond lan HPLC, gen de kategori prensipal: analyse HPLC ak preparasyon HPLC. Pandan ke tou de teknik itilize prensip ki sanble separe konpoze yo, yo yo te itilize pou rezon diferan epi yo gen diferan paramèt opere. Blog sa a pral eksplore diferans ki genyen ant HPLC analyse ak preparasyon, ki gen ladan objektif yo, echèl nan operasyon, ekipman, ak aplikasyon pou.
Vle konnen tout enfòmasyon sou flak HPLC, tanpri tcheke atik sa a: Ansiklopedi nan flak HPLC
Konprann analyse HPLC
Definisyon ak objektif
Analyse HPLC konsantre sitou sou separe ak idantifye konpoze nan yon echantiyon. Objektif prensipal la se jwenn enfòmasyon kalitatif ak quantitative sou eleman yo prezan nan yon melanj. Analyse HPLC souvan itilize pou:
Analiz kalitatif: Idantifye eleman yo nan yon echantiyon.
Analiz Quantitative: Detèmine konsantrasyon an nan yon konpoze espesifik nan yon echantiyon.
Echèl nan operasyon
Analyse HPLC opere sou yon echèl ki pi piti, tipikman ki enplike piki echantiyon mikrolit. Volim yo itilize yo jeneralman nan seri a 1 a 100 µL, sa ki pèmèt pou echantiyon miltip yo dwe analize nan yon sèl kouri. Sa a ti echèl se ideyal pou tès woutin ak kontwòl kalite.
Gwosè kolòn ak gwosè patikil
Kolòn yo itilize nan analyse HPLC yo anjeneral ti an dyamèt, tipikman alantou 4.6 mm, epi yo chaje ak ti patikil faz estasyonè (3-5 μm). Sa a konfigirasyon pèmèt pou rezolisyon segondè, epi efikas separasyon konpoze, apwopriye pou analiz detaye.
Metòd deteksyon
Analyse HPLC anplwaye yon varyete de metòd deteksyon, ki gen ladan UV-vizib, fluoresans, ak spectrometry mas. Chwa a nan detektè depann sou nati a nan analyte a ak kondisyon yo espesifik nan analiz la. Detektè ki pa destriktif yo souvan itilize pou asire ke echantiyon an ka analize san pèt enpòtan.
Vle konnen 50 repons sou flak HPLC, tanpri tcheke atik sa a: 50 kesyon ki pi souvan poze sou flak HPLC
Konprann preparasyon HPLC
Definisyon ak objektif
Preparatif HPLC, sou lòt men an, gen pou objaktif pou separe ak pirifye konpoze espesifik ki sòti nan yon melanj. Objektif prensipal la se izole kantite ase nan konpoze an sib pou analiz pi lwen oswa itilize. Preparasyon
HPLC se souvan itilize pou aplikasyon sa yo:
Izolasyon konpoze: Ekstraksyon ak pirifye nan konpoze espesifik pou rechèch oswa aplikasyon pou endistriyèl.
Preparasyon echantiyon: Preparasyon nan echantiyon pou analiz ki vin apre oswa fòmilasyon.
Echèl nan operasyon yo
Preparatif HPLC fèt sou yon pi gwo echèl pase analyse HPLC. Volim echantiyon yo ka varye soti nan yon mililit kèk nan plizyè lit, tou depann de sede a te espere nan konpoze an sib. Sa a pi gwo echèl pèmèt kantite ase nan pirifye materyèl yo dwe kolekte pou plis itilize.
Gwosè kolòn ak gwosè patikil
Kolòn yo itilize pou preparasyon HPLC yo siyifikativman pi gwo, tipikman sòti nan 20 mm a 100 mm oswa pi gwo an dyamèt. Kolòn yo chaje ak pi gwo patikil faz estasyonè (tipikman 10-20 µm) ogmante pousantaj koule ak akomode pi gwo komèsan echantiyon. Konsepsyon sa a ede diminye presyon tounen ak reyalize separasyon efikas nan konpoze.
Metòd deteksyon
Nan preparasyon HPLC, metòd deteksyon yo ka diferan de sa yo itilize nan analyse HPLC. Pandan ke detektè ki pa destriktif yo toujou komen, sistèm preparasyon souvan itilize detektè ki kapab kolekte fraksyon ki baze sou yon pwofil elution. Sa a pèmèt konpoze espesifik yo dwe izole jan yo elute soti nan kolòn nan.
Vle konnen plis bagay sou aplikasyon an nan flak kromatografi, tanpri tcheke atik sa a:Senk metòd netwayaj pou flak HPLC
Diferans kle ant analyse ak preparasyon HPLC
|
Patikilarite
|
Analyse HPLC
|
Preparatif HPLC
|
|
Entansyon
|
Analiz kalitatif ak quantitative
|
Izolasyon ak pirifye nan konpoze
|
|
Echèl nan operasyon
|
Ti-echèl (µl komèsan)
|
Gwo-echèl (ML pou L Volim)
|
|
Dimansyon kolòn
|
Pi piti dyamèt (4.6 mm)
|
Pi gwo dyamèt (20-100 mm)
|
|
Gwosè patikil
|
Pi piti patikil (3-5 µm)
|
Pi gwo patikil (10-20 µm)
|
|
Pousantaj koule
|
Pi ba pousantaj koule (0.1-5 ml / min)
|
Pi wo pousantaj koule (10-200 ml / min)
|
|
Metòd deteksyon
|
Detektè ki pa destriktif (UV, MS)
|
Koleksyon fraksyon ki baze sou pwofil elution
|
Chwazi ant analyse ak preparasyon HPLC
Lè w ap chwazi ant HPLC analyse ak preparasyon, konsidere faktè sa yo:
Objektif analiz: Detèmine si wi ou non objektif prensipal la se kalitatif ak kantitativman analize konpoze oswa izole konpoze espesifik pou plis itilize.
Kantite lajan pou echantiyon: Evalye kantite lajan an nan echantiyon ki disponib. Si yon ti kantite echantiyon ki disponib, analyse HPLC ka pi apwopriye. Kontrèman, si se yon gwo kantite echantiyon yo mande yo, preparasyon HPLC se yon pi bon chwa.
Pite obligatwa ak sede: Konsidere pite ki nesesè yo ak sede nan konpoze an sib. Preparatif HPLC gen pou objaktif pou maksimize rekiperasyon an nan yon konpoze espesifik, pandan y ap analyse HPLC konsantre sou bay enfòmasyon detaye sou konpozisyon an nan echantiyon an.
Resous ak ekipman: Evalye resous ki disponib, ki gen ladan ekipman ak bidjè. Sistèm preparasyon HPLC yo gen tandans pou yo pi chè epi mande plis envestisman nan ekipman ak depans fonksyònman.
Enterese nan metrize preparasyon echantiyon HPLC? Tcheke atik sa a:Solisyon preparasyon echantiyon HPLC pou pi bon rezilta.
Konklizyon
Tou de HPLC analyse ak preparasyon yo se teknik ki gen anpil valè nan jaden an nan kwomatografi, epi chak gen itilizasyon diferan depann sou bezwen yo nan chèchè ak endistri. Pandan ke HPLC analyse se ideyal pou analiz detaye ak quantification nan konpoze, preparasyon HPLC se esansyèl pou izole ak pirifye konpoze espesifik pou aplikasyon pou plis. Konprann diferans ki genyen ant de teknik sa yo pral ede chèchè yo pran desizyon enfòme, optimize workflows yo, epi jwenn rezilta egzat ak serye nan analyses yo. Kòm teknoloji HPLC kontinye avanse, tou de metòd analyse ak preparasyon yo ap rete yon pati entegral nan rechèch syantifik siksè nan tout kalite.
Angle
Chinwa
