Segondè pèfòmans likid kromatografi (HPLC) se yon teknik analyse lajman itilize ki jwe yon wòl enpòtan nan plizyè jaden ki gen ladan edikaman, syans anviwònman, ak sekirite manje. Sepandan, siksè nan analiz HPLC depann lajman sou bon jan kalite a nan preparasyon echantiyon. Preparasyon apwopriye echantiyon asire egzat quantification nan analytes sib ak minimize perturbation. Gid sa a konplè kouvri tout bagay ou bezwen konnen sou preparasyon echantiyon HPLC, ki gen ladan enpòtans li yo, teknik, pi bon pratik, ak konsèy depanaj.
Vle konnen plis bagay sou aplikasyon pou flak kromatografi, tanpri tcheke atik sa a: 15 Aplikasyon nan flak kromatografi nan jaden diferan
Enpòtans nan preparasyon echantiyon nan HPLC
Preparasyon echantiyon se yon etap kritik nan analiz HPLC pou yon kantite rezon.
Minimize entèferans:Echantiyon yo souvan gen enpurte ak konpozan matris ki ka entèfere ak deteksyon an nan analytes sib. Teknik preparasyon echantiyon efikas ka ede retire sibstans sa yo vle ak amelyore presizyon analyse.
Amelyore rekiperasyon analyte:Preparasyon apwopriye amelyore rekiperasyon analyte ak asire ke rezilta reflete konsantrasyon aktyèl la nan echantiyon orijinal la. Sa enpòtan sitou pou analiz tras kote analit yo prezan nan konsantrasyon ki ba.
Enhanced fòm pik:Echantiyon byen prepare ede fòme simetrik ak byen defini tèt nan kromatogram la. Sa a se esansyèl pou quantification egzat. Preparasyon echantiyon move ka rezilta nan pikeur pik ak elaji, ki konplitché done entèpretasyon.
Pwoteje sistèm HPLC ou:Kontaminan nan echantiyon ou ka domaje kolòn ak lòt konpozan nan sistèm HPLC ou, ki mennen ale nan ogmante depans antretyen ak D '. Preparasyon apwopriye echantiyon diminye risk pou yo obstrue sistèm ak mete.
Etap enpòtan nan preparasyon echantiyon HPLC
1. Koleksyon Egzanp
Premye etap la nan preparasyon echantiyon se kolekte echantiyon ou kòrèkteman. Sa gen ladan:
Sèvi ak resipyan pwòp:Toujou itilize pwòp, resipyan inaktif pou evite kontaminasyon. Yo rekòmande vè oswa bon jan kalite resipyan plastik yo.
Evite kontaminasyon:Sèvi ak gan ak zouti pwòp pou anpeche kontaminasyon nan sebase ak lòt sous.
Bon etikèt:Klèman mete etikèt sou echantiyon pou fè pou evite melanje-ups ak asire trasabilite.
2. Egzanp omojènizasyon
Egzanp omojènizasyon asire omojèn, ki enpòtan pou rezilta repwodwi. Teknik omojènizasyon yo enkli:
Omojènizasyon mekanik: Melanje echantiyon solid oswa semi-solid lè l sèvi avèk yon ajitasyon oswa omojèn.
Homogenization ultrasons:Aplikasyon nan ultrason dispèse patikil nan yon echantiyon likid.
3. dilution oswa konsantrasyon
Tou depan de konsantrasyon an espere nan analytes, echantiyon yo ka bezwen dilye oswa konsantre. Sa a ka reyalize pa:
Dilution:Dilye echantiyon an nan konsantrasyon an vle lè l sèvi avèk sòlvan an menm jan ak faz mobil lan.
Konsantrasyon:Analytes ka konsantre lè l sèvi avèk teknik tankou evaporasyon oswa fè ekstraksyon faz solid (SPE).
4. Filtraj
Filtrasyon se esansyèl yo retire patikil ki ka bouche kolòn HPLC. Metòd filtraj komen yo enkli:
Filtrasyon manbràn:Isaj0.2µm oswa 0.45µm filtèPou retire patikil yo. Tipikman poliethersulfone (PES) oswa filtè nilon yo te itilize.
Prefiltrasyon:Pou echantiyon ki gen kontni patikil segondè, prefiltrasyon nan yon pi gwo filtre gwosè pò ka anpeche obstrue.
50 Kesyon yo poze souvan sou filtè sereng, asire w ke ou tcheke deyò atik sa a enfòmatif: Sijè a nan "sereng filtre" 50 kesyon yo poze souvan
5. Egzanp estabilite
Konsidere estabilize echantiyon ou a anpeche degradasyon nan analyte la.
Ajisteman pH:Ajiste pH la ka ede estabilize sèten analytes. Pou egzanp, konpoze asid ka mande pou asidifikasyon yo anpeche degradasyon.
Aditif:Ajoute estabilize oswa préservatifs ka ede kenbe entegrite echantiyon pandan depo ak analiz.
6. Seleksyon sòlvan
Li enpòtan pou chwazi sòlvan ki kòrèk la pou fonn echantiyon ou epi asire konpatibilite ak sistèm HPLC ou. Konsidere sa ki annapre yo:
Sòlvan polarite:Pou reyalize yap divòse konplè, sòlvan an dwe matche ak polarite analyte a.
Konpatibilite faz mobil: Sèvi ak yon sòlvan ki se konpatib ak faz mobil lan pou misyon pou minimize entèferans potansyèl yo.
7. Preparasyon estanda
Preparasyon nan estanda kalibrasyon se esansyèl nan quantification yon analyte nan yon echantiyon. Sa gen ladan:
Preparasyon nan koub kalibrasyon:Prepare yon seri de konsantrasyon li te ye nan analyte a etabli yon koub kalibrasyon pou quantification.
Sèvi ak sòlvan an menm:Pou kenbe konsistans, toujou prepare estanda ou lè l sèvi avèk sòlvan an menm ak kondisyon kòm echantiyon ou yo.
Pi bon pratik pou preparasyon echantiyon HPLC
Swiv pwosedi operasyon estanda (SOPs):Etabli ak konfòme yo ak SOPs pou preparasyon echantiyon asire konsistans ak repwodiksyon.
Sèvi ak bon jan kalite reyaktif ak Solvang:Toujou itilize HPLC-klas Solvang ak gwo-pite reyaktif pou misyon pou minimize kontaminasyon.
Kenbe espas travay ou pwòp:Kenbe zòn preparasyon echantiyon ou pwòp epi òganize pou redwi risk kontaminasyon an.
Dokimante tout bagay:Kenbe dosye detaye sou pwosedi preparasyon echantiyon ou, ki gen ladan nenpòt devyasyon soti nan pwotokòl estanda.
Valide metòd:Valide metòd preparasyon echantiyon regilyèman asire yo bay rezilta serye ak repwodwi.
Depanaj Pwoblèm Preparasyon Egzanp Komen
Pòv fòm pik:Si tèt yo se laj oswa tailing, sa a ka endike enkonplè yap divòse oswa prezans nan patikil. Asire ke se echantiyon ou byen melanje ak filtre.
Pik fantom:Pik Sentespri ka ki te koze pa enpurte nan sòlvan an oswa echantiyon, sèvi ak wo-pite Solvang ak asire ke tout vè ak ekipman yo pwòp.
Ba sansiblite:Si sansiblite a ba, konsidere optimize metòd ekstraksyon ou oswa ogmante konsantrasyon an nan analyte ou.
Kolòn obstrue:Souvan obstrue ka endike ke echantiyon ou a gen twòp patikil oswa pa ke yo te filtre byen. Re-evalye pwosesis filtraj ou epi konsidere pre-filtrasyon.
Rezilta enkonsistan:Varyasyon nan rezilta yo ka sòti nan preparasyon echantiyon konsistan. Estandadize tout pwosedi yo epi asire ke pèsonèl ki enplike nan preparasyon echantiyon yo byen antrene.
Teknik preparasyon avanse echantiyon
Kòm demand analyse ogmante, laboratwa yo ap adopte plis avanse teknik preparasyon echantiyon amelyore efikasite ak presizyon:
1. Ekstraksyon faz solid (SPE)
SPE se yon teknik lajman itilize ki pèmèt pou fè ekstraksyon selektif nan analytes soti nan matris konplèks. Li enplike pase yon echantiyon likid nan yon materyèl adsorbant solid ki konsève analyte nan sib pandan y ap pèmèt enpurte pase nan.
2. Ekstraksyon likid-likid (LLE)
LLE se yon teknik ki separe analytes ki baze sou solubility yo nan de likid immiscible. Metòd sa a se efikas nan separe konpoze ak polarite diferan ak se souvan yo itilize nan anviwònman an ak analiz pharmaceutique yo.
3. Quechers (rapid, senp, bon mache, efikas, rezistan ak an sekirite)
Quechers se yon metòd popilè pou prepare echantiyon manje ak anviwònman ki konbine etap yo fè ekstraksyon ak netwayaj nan yon sèl pwosesis, fè li efikas ak pri-efikas.
4. automatisation
Ka debi ak repwodibilite dwe siyifikativman amelyore pa sistèm preparasyon echantiyon otomatik, ki ka fè travay tankou dilution, filtraj, ak SPE ak entèvansyon minim moun, kidonk diminye risk pou yo erè.
Vle konnen plis bagay sou preparasyon echantiyon HPLC, tanpri tcheke atik sa a: Solisyon preparasyon echantiyon HPLC pou pi bon rezilta
Konklizyon
Preparasyon echantiyon HPLC se yon etap kritik ki ka siyifikativman enpak presizyon ak disponiblite nan rezilta analyse. Pa swiv pi bon pratik, lè l sèvi avèk teknik ki apwopriye yo, ak adrese pwoblèm komen, laboratwa ka optimize pwosesis la preparasyon echantiyon pa adopte teknik avanse ak teknoloji kòm bezwen analyse evolye. Otomatik pral pli lwen amelyore efikasite a ak efikasite nan analyses HPLC. Preparasyon apwopriye echantiyon pa sèlman amelyore bon jan kalite a nan rezilta yo, men tou pwoteje sistèm nan HPLC, asire alontèm fyab ak pèfòmans.
Angle
Chinwa
