Chwazi tanpon an dwa pou faz mobil HPLC ou a se kritik nan akonplisman separasyon optimal ak analiz de ou echantiyon. Buffers ede kenbe yon pH ki estab, ki se esansyèl pou kontwole eta a ionization nan analytes ou, konsa ki afekte tan retansyon yo ak fòm pik. Anba la a se yon BECA detaye sou ki jan yo chwazi pi bon zòn de defans la pou aplikasyon HPLC ou.

Ou konnen sou preparasyon echantiyon HPLC? Klike sou atik sa a pou aprann plis: "Tout sa ou bezwen konnen sou preparasyon echantiyon HPLC"

Enpòtans nan seleksyon tanpon

Yon zòn de defans se yon solisyon ki gen pH pa chanje apre ajoute yon ti kantite asid oswa baz. Baze sou konpozisyon yo, tanpon yo ka klase kòm swa asid oswa debaz. Se efikasite nan yon zòn de defans detèmine pa PKA li yo, ki depreferans yo ta dwe nan ± 1 inite pH nan pH la faz mobil vle pou optimal kapasite tampon.

Faktè kle yo konsidere

1.PH ranje: pH la nan faz mobil lan ta dwe omwen 2 inite pH lwen PKA a nan analyte la. Sa a ede siprime yonizasyon nan analites asid oswa debaz yo, maksimize retansyon yo sou kolòn nan. Pou egzanp, si analyte a se yon asid fèb ak yon PKa nan 4.5, lè l sèvi avèk yon faz mobil ak yon pH alantou 2.0 ta kenbe l 'nan yon eta ki pa ionized, amelyore retansyon.

2. Buffer Kalite: tanpon komen yo itilize nan HPLC gen ladan yo:

Buffers fosfat: efikas nan seri a pH nan 2.0 a 8.0, tanpon fosfat yo lajman itilize akòz estabilite yo ak konpatibilite ak analytes anpil. Yo patikilyèman apwopriye pou aplikasyon pou LC-UV.

ACETATE tanpon: Sa yo se tou popilè pou LC-UV assay epi yo ka itilize nan chenn pH menm jan ak tanpon fosfat.

Buffers temèt: Pou aplikasyon pou LC-MS, tanpon temèt tankou fòmate, acetate, ak bikabonat amonyòm yo pi pito paske yo ka fasilman retire pandan pwosesis la spectrometry mas.

3. konsantrasyon BUFFER: Yon konsantrasyon tipik kòmanse pou tanpon nan HPLC se ant 25-50 mM. Pi wo konsantrasyon ka amelyore fòm pik ak efikasite men li ka tou mennen nan presipitasyon lè melanje ak Solvang òganik. Se yon bon lide kenbe konsantrasyon nan zòn de defans ki anba a 25 mM pou fè pou evite konplikasyon.

4. Chimik pite: Toujou itilize wo-pite kwomatografik-klas tanpon yo anpeche kontaminasyon ak asire rezilta serye. Enpurte ka mennen nan entèraksyon inatandi ak variation nan tan retansyon.

Efè Tanperati: Tanperati a ka enfliyanse pH la nan solisyon tanpon. Li enpòtan pou prepare ak magazen tanpon nan yon tanperati ki konsistan pou kenbe efikasite yo.

Vle konnen 50 repons sou flak HPLC, tanpri tcheke atik sa a: 50 kesyon ki pi souvan poze sou flak HPLC

Konsèy pratik pou preparasyon tanpon

Metòd Preparasyon: tanpon yo ka prepare pa melanje kantite lajan equimolar nan konpozan asid ak debaz yo oswa pa titre yon solisyon debaz ak asid. Evite ajiste pH la apre yo fin ajoute Solvang òganik, tankou sa a ka mennen nan rezilta konsistan.

Solisyon fre: Prepare solisyon fre tanpon regilyèman pou misyon pou minimize kwasans microbes ak degradasyon nan konpozan, ki ka afekte pèfòmans kwomatografik.

Evite korozyon: sèten tanpon, tankou Sitrat, ka rouye konpozan asye pur nan sistèm HPLC. Asire bon jan flòch nan sistèm lan apre ou fin itilize tanpon sa yo pou anpeche domaj.

Konklizyon

Chwazi tanpon an dwa pou HPLC faz mobil ou a se kritik nan akonplisman rezilta serye ak repwodwi. Konsidere pH, kalite tanpon, konsantrasyon, ak pite lè chwazi. Pa swiv direktiv sa yo, ou ka optimize metòd HPLC ou a efektivman separe ak analize echantiyon ou yo.

Vle konnen pri a nan flak HPLC, tanpri tcheke atik sa a: HPLC flakon pri: 50 kesyon ki pi souvan

Ki jan yo itilize kòrèkteman tib tès COD pou tès bon jan kalite dlo?

Ki jan pou fè pou evite zouti filtre nan filtè sereng