A nagyteljesítményű folyadékkromatográfia (HPLC) és a folyadékkromatográfiás-tömegspektrometria (LCMS) két hatékony analitikai technika, amelyeket különféle területeken használnak, ideértve a gyógyszereket, a környezettudományokat és az élettudományokat. Míg mindkét módszer magában foglalja a vegyületek elválasztását és elemzését, alapelveik, funkciói és alkalmazásai nagyon különböznek. Ez a blogbejegyzés összehasonlítja a HPLC -t és az LCM -eket, és a legfontosabb különbségekre és az egyes technikák előnyeire összpontosítva.

Működési alapelv

HPLC

A HPLC egy kromatográfiás technika, amely elválasztja a vegyületeket a helyhez kötött és mobil fázisokkal való kölcsönhatásuk alapján. A HPLC -ben egy folyékony mozgó fázist szivattyúzzunk egy helyhez kötött fázissal töltött oszlopon, amely általában a szilícium -dioxid vagy polimerek kis részecskéiből áll. Ha egy minta keveréket vezetnek be a rendszerbe, az alkatrészeket az álló fázishoz való affinitásuk alapján választják el. Olyan vegyületek, amelyek erősebben kölcsönhatásba lépnek a helyhez kötött fázissal lassabban, míg olyan vegyületek, amelyek kevésbé erősen kölcsönhatásba lépnek. Az elválasztott vegyületeket ezután különféle detektorok, például UV-VIS, fluoreszcencia vagy törés indexdetektorok felhasználásával detektálják.

Szeretne többet megtudni a kromatográfiás üvegek alkalmazásáról, kérjük, ellenőrizze ezt a cikket:15 A kromatográfiás üvegek alkalmazása különböző területeken

LCMS

Az LCMS ötvözi a HPLC elválasztási képességeit a tömegspektrometriás tömegelemzési képességeivel. Az LCMS -ben a mintákat először HPLC -vel választják el, csakúgy, mint a hagyományos HPLC -ben. Ahelyett, hogy egy hagyományos detektorral detektálnák, az eluált vegyületeket egy tömegspektrométerbe vezetik be. A tömegspektrométer ionizálja a vegyületeket, és méri azok tömeg-töltési arányát, részletes információkat szolgáltatva az analit molekulatömegéről és szerkezetéről. Az elválasztás és a tömegspektrometria e kombinációja nagyobb érzékenységet és specifitást biztosít, mint önmagában a HPLC.

Elválasztási mechanizmus

HPLC:A HPLC nagy nyomást gyakorol a folyékony mozgófázisra egy helyhez kötött fázist tartalmazó csomagolt oszlopon keresztül. A vegyületeket elválasztják a helyhez kötött fázissal való differenciális kölcsönhatások alapján, pontos és hatékony elválasztást eredményezve.

LCMS:Az LCMS ötvözi a HPLC fizikai elválasztási képességeit a tömegspektrometria (MS) tömegspektrometriás képességeivel. A folyadékkromatográfiás komponens elválasztja a vegyületeket, míg a tömegspektrométer méri az ionizált fajok tömeg / töltési arányát.

Érzékenység és szelektivitás

HPLC:A HPLC jó érzékenységgel és szelektivitással rendelkezik, különösen akkor, ha fejlett detektorokkal, például UV-VIS-vel, fluoreszcenciával vagy diódarákkal detektorokkal kombinálják. A HPLC önmagában azonban nem biztosítja a megfelelő specifitást a komplex mintákhoz.

LCMS:Az LCMS kiváló érzékenységgel és szelektivitással rendelkezik a HPLC -hez képest. A tömegspektrométerek pontosan azonosíthatják és számszerűsíthetik a vegyületeket egyedi tömeg-töltési arányuk alapján, még komplex mátrixokban is. Ez az LCM -eket különösen hasznossá teszi a nyomkövények elemzéséhez és az ismeretlen anyagok azonosságának megerősítéséhez.

Minta előkészítés

HPLC:A HPLC mintájának előkészítése általában hígítást, szűrést vagy egyszerű extrakciós technikákat foglal magában. A mintákat nem kell elpárologtatni, tehát a HPLC különféle vegyületek számára alkalmas, beleértve a poláris és nem illékony anyagokat is.

LCMS:A minta előkészítése az LCMS -hez hasonló a HPLC -hez, de további lépésekre lehet szükség a tömegspektrométerrel való kompatibilitás biztosítása érdekében. Például illékony pufferekre vagy adalékanyagokra lehet szükség az ionizáció fokozására és az ionszuppresszió megelőzésére.

Alkalmazások

HPLC:A HPLC -t széles körben használják a gyógyszerek, élelmiszerek és környezeti minták elemzésére. Különösen hatékony a vegyületek elválasztására és számszerűsítésére komplex keverékekben, például gyógyszer szennyeződések, élelmiszer -adalékanyagok és peszticid -maradékokban.

LCMS:Az LCMS széles körű alkalmazásokkal rendelkezik, beleértve:

Gyógyszerészeti elemzés: A gyógyszerek felfedezéséhez, fejlesztéséhez és minőség -ellenőrzéséhez használják.

Proteomika és metabolomika: A fehérjék és metabolitok azonosítására és számszerűsítésére használják a biológiai mintákban.

Környezeti elemzés: A víz, a talaj és a levegőminták nyomszennyező anyagának kimutatására szolgál.

Kíváncsi a hitelesített HPLC -fiolák szerepére a pontos mintaelemzés biztosításában? Olvassa el ezt a cikket: A hitelesített HPLC fiolák fontosságának a pontos minta elemzéséhez

Következtetés

A HPLC és az LCMS egyaránt hatékony analitikai technikák, saját erősségeikkel és korlátozásaikkal. A kettő közötti választás az elemzés konkrét követelményeitől függ, mint például az érzékenység, a szelektivitás, a minta bonyolultsága és a rendelkezésre álló erőforrások.

A HPLC jó választás az ismert vegyületek rutin elemzéséhez viszonylag egyszerű mátrixokban, ahol a költségek és a könnyű használat fontos tényezők. Az LCMS viszont az előnyben részesített módszer a komplex minták elemzésére, az ismeretlen vegyületek azonosítására és az ultra-nyomkövetési szint kimutatására.

Ahogy a technológia tovább halad, a HPLC és az LCMS integrációja egyre fontosabb szerepet játszik az analitikai kémia változó igényeinek kielégítésében, és biztosítja a magas színvonalú eredményeket a különféle alkalmazásokban.

Előző:

A végső útmutató a 0,45 mikron fecskendőszűrőkhöz az Ön számára

Következő:

Minden, amit tudnod kell a Headspace GC minta előkészítéséről