Բարձր արդյունավետությամբ հեղուկ քրոմատոգրաֆիա (HPLC) հիմնական վերլուծական տեխնիկան է, որն օգտագործվում է լաբորատորիաներում դաշտերում, որպես դեղագործություն, բնապահպանական գիտություններ եւ սննդի անվտանգություն: HPLC World- ի շրջանակներում կա երկու հիմնական կատեգորիա, վերլուծական HPLC եւ նախապատրաստական HPLC: Մինչ երկու տեխնիկան նման սկզբունքներ են օգտագործում առանձին միացություններ, դրանք օգտագործվում են տարբեր նպատակներով եւ ունեն տարբեր գործող պարամետրեր: Այս բլոգը կքննարկի վերլուծական եւ նախապատրաստական HPLC- ի միջեւ եղած տարբերությունները, ներառյալ դրանց նպատակը, շահագործման մասշտաբը, սարքավորումները եւ դիմումները:
Want անկանում եք իմանալ լիարժեք ներդրումը HPLC սրվակների մասին, խնդրում ենք ստուգել այս հոդվածը. HPLC սրվակների հանրագիտարան
Հասկանալով վերլուծական HPLC- ը
Սահմանում եւ նպատակ
Վերլուծական HPLC- ն հիմնականում կենտրոնանում է միացությունների մեջ միացությունների առանձնացման եւ նույնականացման վրա: Առաջնային նպատակը խառնուրդում առկա բաղադրիչների վերաբերյալ որակական եւ քանակական տեղեկատվություն ստանալն է: Վերլուծական HPLC- ն հաճախ օգտագործվում է.
Որակական վերլուծություն. Նմուշի բաղադրիչների նույնականացում:
Քանակական վերլուծություն. Հատուկ միացության կոնցենտրացիայի որոշումը նմուշում:
Գործողության մասշտաբը
Վերլուծական HPLC- ն գործում է ավելի փոքր մասշտաբով, սովորաբար ներգրավելով միկրոլիտերի նմուշների ներարկումներ: Օգտագործված հատորները հիմնականում 1-ից 100 մկլ միջակայքում են, ինչը թույլ է տալիս բազմակի նմուշներ վերլուծել մեկ գործով: Այս փոքր սանդղակը իդեալական է սովորական փորձարկման եւ որակի վերահսկման համար:
Սյունակի չափը եւ մասնիկների չափը
Վերլուծական HPLC- ում օգտագործվող սյուները սովորաբար տրամագծով փոքր են, սովորաբար մոտ 4.6 մմ եւ փաթեթավորված են փոքր ստացիոնար փուլային մասնիկներով (3-5 մկմ): Այս կազմաձեւը թույլ է տալիս բարձր լուծաչափով եւ արդյունավետ բաղադրատոմսով տարանջատել, հարմար է մանրամասն վերլուծության համար:
Հայտնաբերման մեթոդներ
Վերլուծական HPLC- ն օգտագործում է հայտնաբերման մի շարք մեթոդներ, ներառյալ ուլտրամանուշակագույն տեսանելի, լյումինեսցենտ եւ զանգվածային սպեկտրաչափություն: Դետեկտորի ընտրությունը կախված է վերլուծության բնույթից եւ վերլուծության հատուկ պահանջներից: Ոչ կործանարար դետեկտորները հաճախ օգտագործվում են, որպեսզի նմուշը վերլուծվի առանց զգալի կորստի:
Want անկանում եք իմանալ 50 պատասխան HPLC սրվակների մասին, խնդրում ենք ստուգել այս հոդվածը. HPLC սրվակների ամենատարածված հարցերը
Հասկանալով նախապատրաստական HPLC
Սահմանում եւ նպատակ
Պատրաստական HPLC- ը, մյուս կողմից, նպատակ ունի խառնուրդից առանձնացնել եւ մաքրել հատուկ միացությունները: Հիմնական նպատակը թիրախային միացության բավարար քանակի քանակը մեկուսացնելն է `հետագա վերլուծության կամ օգտագործման համար: Նախապատրաստական
HPLC- ն սովորաբար օգտագործվում է հետեւյալ ծրագրերի համար.
Բարդի մեկուսացում. Հատուկ միացությունների արդյունահանում եւ մաքրում հետազոտական կամ արդյունաբերական ծրագրերի համար:
Նմուշի պատրաստում. Նմուշների պատրաստում `հետագա վերլուծության կամ ձեւակերպման համար:
Գործառնությունների մասշտաբը
Պատրաստական HPLC- ն իրականացվում է ավելի մեծ մասշտաբով, քան վերլուծական HPLC- ն: Նմուշի ծավալները կարող են տատանվել մի քանի միլիլիտրից մինչեւ մի քանի լիտր, կախված թիրախային համալիրի սպասվող եկամտից: Այս ավելի մեծածախը թույլ է տալիս բավարար քանակությամբ մաքրված նյութեր հավաքել հետագա օգտագործման համար:
Սյունակի չափը եւ մասնիկների չափը
Պատրաստական HPLC- ի համար օգտագործվող սյուները զգալիորեն ավելի մեծ են, սովորաբար տատանվում են 20 մմ-ից մինչեւ 100 մմ կամ ավելի մեծ տրամագծով: Սյունակները փաթեթավորված են ավելի մեծ ստացիոնար փուլային մասնիկներով (սովորաբար 10-20 մկմ) `հոսքի գները բարձրացնելու եւ ավելի մեծ նմուշների ծավալների տեղավորում: Այս դիզայնը օգնում է նվազեցնել հետեւի ճնշումը եւ հասնել բարդությունների արդյունավետ տարանջատում:
Հայտնաբերման մեթոդներ
Նախապատրաստական HPL- ում հայտնաբերման մեթոդները կարող են տարբերվել վերլուծական HPLC- ում օգտագործվածներից: Թեեւ ոչ կործանարար դետեկտորները դեռ տարածված են, նախապատրաստական համակարգերը հաճախ օգտագործում են դետեկտորներ, որոնք ունակ են խմբակցություններ հավաքել, հիմնվելով ուրվագծային պրոֆիլի վրա: Սա թույլ է տալիս հատուկ միացություններ մեկուսացնել, քանի որ նրանք էլ դուրս են գալիս սյունակից:
Want անկանում եք ավելին իմանալ քրոմատոգրաֆիայի սրվակների կիրառման մասին, խնդրում ենք ստուգել այս հոդվածը.ՀԼԿ սրվակների մաքրման հինգ մեթոդ
Հիմնական տարբերություններ վերլուծական եւ նախապատրաստական HPLC- ի միջեւ
|
Հատկորոշում
|
Վերլուծական HPLC
|
Պատրաստական HPLC
|
|
Տեղավորել
|
Որակական եւ քանակական վերլուծություն
|
Միացությունների մեկուսացում եւ մաքրում
|
|
Գործողության մասշտաբը
|
Փոքր մասշտաբ (մկլ ծավալներ)
|
Լայնածավալ (ML to l ծավալներ)
|
|
Սյունակի չափսեր
|
Փոքր տրամագիծ (4.6 մմ)
|
Ավելի մեծ տրամագիծ (20-100 մմ)
|
|
Մասնիկների չափը
|
Փոքր մասնիկներ (3-5 մկմ)
|
Ավելի մեծ մասնիկներ (10-20 մկմ)
|
|
Հոսքի գներ
|
Հոսքի ցածր գներ (0,1-5 մլ \ / րոպե)
|
Ավելի բարձր հոսքի գներ (10-200 մլ \ / րոպե)
|
|
Հայտնաբերման մեթոդներ
|
Ոչ կործանարար դետեկտորներ (ուլտրամանուշակագույն, MS)
|
Տկչության հավաքածու `ելնելով Elatis- ի պրոֆիլից
|
Ընտրելով վերլուծական եւ նախապատրաստական HPLC- ի միջեւ
Վերլուծական եւ նախապատրաստական HPLC- ի միջեւ ընտրելիս հաշվի առեք հետեւյալ գործոնները.
Վերլուծության նպատակը. Որոշեք `առաջնային նպատակը որակական եւ քանակական վերլուծություն է միացություններ կամ մեկուսացնել հատուկ միացություններ, հետագա օգտագործման համար:
Նմուշի քանակը. Գնահատեք մատչելի նմուշի քանակը: Եթե փոքր քանակությամբ նմուշ կա, վերլուծական HPLC- ն կարող է ավելի տեղին լինել: Ընդհակառակը, եթե պահանջվում է մեծ քանակությամբ նմուշ, նախապատրաստական HPLC- ը ավելի լավ ընտրություն է:
Պահանջվում է մաքրություն եւ բերքատվություն. Դիտարկենք նպատակային բաղադրիչի պահանջվող մաքրությունն ու բերքատվությունը: Պատրաստում HPLC- ն նպատակ ունի առավելագույնի հասցնել որոշակի միացության վերականգնումը, մինչդեռ վերլուծական HPLC- ն կենտրոնանում է նմուշի կազմի վերաբերյալ մանրամասն տեղեկություններ տրամադրելու վրա:
Ռեսուրսներ եւ սարքավորումներ. Գնահատեք մատչելի ռեսուրսները, ներառյալ սարքավորումները եւ բյուջեն: HPLC- ի նախապատրաստական համակարգերը հակված են ավելի թանկ եւ ավելի շատ ներդրումներ են պահանջում սարքավորումների եւ գործառնական ծախսերի մեջ:
Հետաքրքրում եք HPLC նմուշի պատրաստումը յուրացնելու համար: Ստուգեք այս հոդվածը.Լավագույն արդյունքների համար HPLC նմուշի պատրաստման լուծումներ:
Եզրափակում
Թե վերլուծական, թե նախապատրաստական HPLC- ը քրոմատոգրաֆիայի ոլորտում արժեքավոր տեխնիկա է, եւ յուրաքանչյուրը ունի տարբեր օգտագործումներ, կախված հետազոտողների եւ արդյունաբերության կարիքներից: Չնայած վերլուծական HPLC- ն իդեալական է միացությունների մանրամասն վերլուծության եւ քանակի համար, նախապատրաստական HPLC- ն անհրաժեշտ է հետագա ծրագրերի համար հատուկ միացություններ մեկուսացնելու եւ մաքրելու համար: Այս երկու տեխնիկայի միջեւ տարբերությունները հասկանալը կօգնի հետազոտողներին տեղեկացված որոշումներ կայացնել, օպտիմալացնել իրենց աշխատանքային հոսքերը եւ ստանալ ճշգրիտ եւ հուսալի արդյունքներ իրենց վերլուծություններում: Քանի որ HPLC տեխնոլոգիան շարունակում է առաջ անցնել, ինչպես վերլուծական, այնպես էլ նախապատրաստական մեթոդները կմնան բոլոր տեսակի հաջող գիտական հետազոտությունների անբաժանելի մասը:
Անգլերեն
Չինարեն
