Ձեր HPLC բջջային փուլի համար ճիշտ բուֆեր ընտրելը շատ կարեւոր է ձեր օպտիմալ տարանջատման եւ վերլուծության հասնելու համար նմուշներՄի շարք Բուֆերները օգնում են պահպանել կայուն pH, որն անհրաժեշտ է ձեր վերլուծությունների իոնացման վիճակը վերահսկելու համար, դրանով իսկ ազդելով դրանց պահպանման ժամանակի եւ գագաթնակետի վրա: Ստորեւ ներկայացված է մանրամասն ակնարկ, թե ինչպես ընտրել լավագույն բուֆերը ձեր HPLC ծրագրի համար:

Գիտեք HPLC նմուշի պատրաստման մասին: Կտտացրեք այս հոդվածը `ավելին իմանալու համար. «Այն ամենը, ինչ դուք պետք է իմանաք HPLC նմուշի պատրաստման մասին»

Բուֆերի ընտրության կարեւորությունը

Բուֆերը լուծում է, որի PH- ն չի փոխվում փոքր թթու կամ բազա ավելացնելուց հետո: Նրանց կազմի հիման վրա բուֆերները կարող են դասակարգվել կամ թթվային կամ հիմնական: Բուֆերի արդյունավետությունը որոշվում է իր pka- ով, որն իդեալականորեն պետք է լինի ցանկալի բջջային փուլային pH- ի 1-ի 1-ին կետում `օպտիմալ բուֆերային հզորության համար:

Քննարկելու հիմնական գործոնները

1.PH միջակայք. Բջջային փուլի pH- ը պետք է լինի առնվազն 2 pH միավոր, վերլուծության PKA- ից հեռու: Սա օգնում է ճնշել թթվային կամ հիմնական վերլուծությունների իոնացումը, առավելագույնի հասցնելով դրանց պահպանումը սյունակում: Օրինակ, եթե վերլուծությունը թույլ թթու է `4,5-ով PCA- ով, օգտագործելով շարժական փուլ, շուրջ 2.0-ը, այն պահելու է ոչ իոնացված վիճակում:

2.Buffer- ի տեսակը. HPLC- ում օգտագործված ընդհանուր բուֆերները ներառում են.

Ֆոսֆատի բուֆերներ. Արդյունավետ 2.0-ից 8.0-ի PH- ի շրջանակներում ֆոսֆատ բուֆերները լայնորեն օգտագործվում են դրանց կայունության եւ շատ վերլուծությունների հետ համատեղելիության պատճառով: Դրանք հատկապես հարմար են LC-UV դիմումների համար:

Acetate Buffers. Դրանք նույնպես հանրաճանաչ են LC-UV փորձարարների համար եւ կարող են օգտագործվել նմանատիպ pH տատանվում, որպես ֆոսֆատ բուֆերներ:

Անկայուն բուֆերներ. LC-MS դիմումների համար գերադասելի է, ինչպիսիք են ձեւավորումը, ացետատը եւ ամոնիումի բիկարբոնատը, քանի որ դրանք հեշտությամբ կարող են հանվել զանգվածային սպեկտրոմետրիայի ընթացքում:

3.Buffer Concentration. HPLC- ում բուֆերների համար բնորոշ մեկնարկային կենտրոնացումը 25-50 մմ-ի սահմաններում է: Բարձրագույն կոնցենտրացիաները կարող են բարելավել գագաթնակետի ձեւը եւ արդյունավետությունը, բայց կարող են հանգեցնել նաեւ տեղումների քանակի, երբ խառնվում են օրգանական լուծիչների հետ: Ձեռնարկություններից խուսափելու համար խորհուրդ է տրվում պահպանել բուֆերային կոնցենտրացիան 25 մմ-ից ցածր:

4.Chemical մաքրությունը. Միշտ օգտագործեք բարձր մաքրության քրոմատոգրաֆիական կարգի բուֆերներ `աղտոտումը կանխելու եւ հուսալի արդյունքներ ապահովելու համար: Չյուրապատերը կարող են հանգեցնել անսպասելի փոխազդեցությունների եւ փոփոխության ժամանակների փոփոխության:

Temperature երմաստիճանի էֆեկտներ. Temperature երմաստիճանը կարող է ազդել բուֆերային լուծումների pH- ի վրա: Կարեւոր է պատրաստել եւ պահել բուֆերները հետեւողական ջերմաստիճանում `դրանց արդյունավետությունը պահպանելու համար:

Want անկանում եք իմանալ 50 պատասխան HPLC սրվակների մասին, խնդրում ենք ստուգել այս հոդվածը. HPLC սրվակների ամենատարածված հարցերը

Բուֆերային պատրաստման գործնական խորհուրդներ

Պատրաստման եղանակ. Բուֆերները կարող են պատրաստվել իրենց թթվային եւ հիմնական բաղադրիչների հավասարաչափ քանակությամբ կամ թթվով հիմնական լուծում չկատարելով: Խուսափեք pH- ի կողմից օրգանական լուծիչներ ավելացնելուց հետո, քանի որ դա կարող է հանգեցնել անհամապատասխան արդյունքների:

Թարմ լուծումներ. Պարբերաբար պատրաստեք թարմ բուֆերային լուծումներ `մանրէազերծելու մանրէաբանական աճը եւ բաղադրիչների դեգրադացումը, որոնք կարող են ազդել քրոմատոգրաֆիական գործունեության վրա:

Խուսափելով կոռոզիայից. Որոշ բուֆերներ, ինչպիսիք են ցիտրատը, կարող են կոռեկտ, HPLC համակարգերի չժանգոտվող պողպատից պատրաստված բաղադրիչները: Ապահովել համակարգի մանրակրկիտ լվացումը նման բուֆերներն օգտագործելուց հետո վնասը կանխելու համար:

Եզրափակում

Ձեր HPLC բջջային փուլի համար ճիշտ բուֆեր ընտրելը շատ կարեւոր է հուսալի եւ վերարտադրելի արդյունքների հասնելու համար: Ընտրելիս հաշվի առեք pH, բուֆերային տեսակը, համակենտրոնացումը եւ մաքրությունը: Հետեւելով այս ուղեցույցներին, կարող եք օպտիմիզացնել ձեր HPLC մեթոդը `ձեր նմուշները արդյունավետորեն առանձնացնելու եւ վերլուծելու համար:

Want անկանում եք իմանալ HPLC սրվակների գինը, խնդրում ենք ստուգել այս հոդվածը. HPLC սրվակների գինը. 50 ամենատարածված հարցեր

Նախորդը:

Ինչպես պատշաճ կերպով օգտագործել COD TEST Tubes ջրի որակի փորձարկման համար:

Հաջորդը.

Ինչպես խուսափել ֆիլտրի առաջխաղացում ներարկիչ ֆիլտրերում