Բարձրորակ հեղուկ քրոմատոգրաֆիա (HPLC) եւ հեղուկ քրոմատոգրաֆիա-զանգվածային սպեկտրոմետրիան (LCMS) երկու հզոր վերլուծական տեխնիկա են, որոնք օգտագործվում են տարբեր ոլորտներում, ներառյալ դեղագործական, բնապահպանական գիտություններ եւ կյանքի գիտություններ: Մինչ երկու մեթոդները ներառում են միացությունների տարանջատում եւ վերլուծություն, դրանց սկզբունքները, գործառույթները եւ դիմումները շատ տարբեր են: Այս բլոգի գրառումը համեմատելու է HPLC- ն եւ LCMS- ը, կենտրոնանալով դրանց հիմնական տարբերությունների եւ յուրաքանչյուր տեխնիկայի առավելությունների վրա:

Գործողության սկզբունքը

Հափշտակիչ

HPLC- ը քրոմատոգրաֆիական տեխնիկա է, որը բաժանում է միացությունները `հիմնվելով ստացիոնար եւ շարժական փուլերի հետ շփումների վրա: HPLC- ում հեղուկ բջջային փուլը մղվում է ստացիոնար փուլով լցված սյունակի միջոցով, որը սովորաբար բաղկացած է սիլիցի կամ պոլիմերների փոքր մասնիկներից: Երբ համակարգում ներմուծվում է նմուշի խառնուրդ, բաղադրիչները բաժանվում են ստացիոնար փուլի իրենց հարազատության հիման վրա: Միացություններ, որոնք ավելի կտրուկ փոխազդում են ստացիոնար փուլով, ավելի դանդաղ, իսկ միացություններ, որոնք ավելի քիչ ուժեղորեն ավելի հեշտ են շփվում: Առանձնացված միացությունները այնուհետեւ հայտնաբերվում են, օգտագործելով մի շարք դետեկտորներ, ինչպիսիք են ուլտրամանուշակագույն տեսակը, լյումինեսցենտը կամ ռեֆրակցիոն ինդեքսի դետեկտորները:

Want անկանում եք ավելին իմանալ քրոմատոգրաֆիայի սրվակների դիմումների մասին, ստուգեք այս հոդվածը.Տարբեր ոլորտներում քրոմատոգրաֆիայի սրվակների 15 դիմում

Lcms

LCMS- ը համատեղում է HPLC- ի տարանջատման հնարավորությունները զանգվածային սպեկտրոմետրի զանգվածային վերլուծության հնարավորություններով: LCMS- ում նմուշներն առաջին հերթին առանձնացված են HPLC- ի միջոցով, ինչպես սովորական HPLC- ում: Այնուամենայնիվ, սովորական դետեկտորի կողմից հայտնաբերվելու փոխարեն, շրջապատված միացությունները ներմուծվում են զանգվածային սպեկտրոմետր: Զանգվածային սպեկտրոմետրը իոնացվում է միացությունները եւ չափում է նրանց զանգվածային հարաբերակցությունը, մանրամասն տեղեկություններ տրամադրելով վերլուծության մոլեկուլային քաշի եւ կառուցվածքի մասին: Առանձնացման եւ զանգվածային սպեկտրոմետրիայի այս համադրությունը ապահովում է ավելի մեծ զգայունություն եւ առանձնահատկություն, քան միայն HPLC:

Առանձնացման մեխանիզմ

HPLC:HPLC- ն օգտագործում է բարձր ճնշում `հեղուկ բջջային փուլը մղելու համար փաթեթավորված սյունակի միջոցով, որը պարունակում է ստացիոնար փուլ: Միացությունները բաժանվում են իրենց դիֆերենցիալ փոխազդեցության հիման վրա ստացիոնար փուլով, ինչը հանգեցնում է ճշգրիտ եւ արդյունավետ տարանջատումների:

LCMS:LCMS- ը համատեղում է HPLC- ի ֆիզիկական տարանջատման հնարավորությունները զանգվածային սպեկտրոմետրիայի զանգվածային սպեկտրոմետրիային հնարավորություններով (MS): Հեղուկ քրոմատոգրաֆիայի բաղադրիչը բաժանում է միացությունները, մինչդեռ զանգվածային սպեկտրաչափը չափում է իոնացված տեսակների զանգվածային հարաբերակցությունը:

Զգայունություն եւ ընտրողականություն

HPLC:HPLC- ն ունի լավ զգայունություն եւ ընտրականություն, մանավանդ, երբ համակցված են առաջադեմ դետեկտորների հետ, ինչպիսիք են ուլտրամանուշակագույն տեսակը, լյումինեսցենտը կամ դիոդի զանգվածի դետեկտորները: Այնուամենայնիվ, HPLC- ն միայնակ կարող է չհամապատասխանել համապատասխան առանձնահատկություն բարդ նմուշների համար:

LCMS:LCMS- ն ունի բարձրակարգ զգայունություն եւ ընտրողականություն, համեմատած HPLC- ի հետ: Զանգվածային սպեկտրաչափերը կարող են ճշգրիտ ճանաչել եւ քանակականացնել միացությունները `հիմնվելով իրենց յուրահատուկ զանգվածային գործակիցների վրա, նույնիսկ բարդ մատրիցներում: Սա LCMS- ն առանձնապես օգտակար է դարձնում հետքի միացությունները վերլուծելու եւ անհայտ նյութերի ինքնությունը հաստատելու համար:

Նմուշի պատրաստում

HPLC:HPLC- ի ընտրանքային նախապատրաստումը սովորաբար ներառում է նոսրացում, ֆիլտրում կամ պարզ արդյունահանման տեխնիկա: Նմուշները պետք չէ գոլորշիանալ, այնպես որ HPLC- ը հարմար է միացությունների լայն տեսականի, ներառյալ բեւեռային եւ ոչ օբյեկտիվ նյութեր:

LCMS:LCMS- ի ընտրանքային նախապատրաստումը նման է HPLC- ի համար, բայց զանգվածային սպեկտրոմետրերի հետ համատեղելիությունը ապահովելու համար կարող են պահանջվել լրացուցիչ քայլեր: Օրինակ, անկայուն բուֆերները կամ հավելումները կարող են պահանջվել `իոնացումը բարելավելու եւ իոնի ճնշումը կանխելու համար:

Ծրագրեր

HPLC:HPLC- ն լայնորեն օգտագործվում է դեղագործության, սննդի եւ բնապահպանական նմուշների վերլուծության համար: Հատկապես արդյունավետ է բարդ խառնուրդներում միացությունները տարանջատելու եւ քանակականացնելու համար, ինչպիսիք են թմրանյութերի կեղեւները, սննդային հավելումները եւ թունաքիմիկատների մնացորդները:

LCMS:LCMS- ն ունի ծրագրերի լայն տեսականի, ներառյալ.

Դեղագործական վերլուծություն. Օգտագործվում է թմրամիջոցների հայտնաբերման, զարգացման եւ որակի վերահսկման մեջ:

Սպիտակուցներ եւ մետաբոլոմիկա. Օգտագործվում է կենսաբանական նմուշներում սպիտակուցներն ու նյութափոխանակիչները հայտնաբերելու եւ չափելու համար:

Բնապահպանական վերլուծություն. Օգտագործվում է ջրի, հողի եւ օդի նմուշների հետքի աղտոտիչներին հայտնաբերելու համար:

Հետաքրքիր է սերտիֆիկացված HPLC սրվակների դերը ճշգրիտ նմուշի վերլուծության ապահովման գործում: Կարդացեք այս հոդվածը. Սերտիֆիկացված HPLC սրվակների կարեւորությունը `ճշգրիտ նմուշների վերլուծության համար

Եզրափակում

HPLC- ն եւ LCMS- ը եւ հզոր վերլուծական տեխնիկան են իրենց իսկ ուժեղ եւ սահմանափակումներով: Երկուսի միջեւ ընտրությունը կախված է վերլուծության հատուկ պահանջներից, ինչպիսիք են զգայունությունը, ընտրողությունը, նմուշային բարդությունը եւ մատչելի ռեսուրսները:

HPLC- ը լավ ընտրություն է համեմատաբար պարզ մատրիցներում հայտնի միացությունների սովորական վերլուծության համար, որտեղ արժեքը եւ օգտագործման հեշտությունը կարեւոր գործոններ են: LCMS- ը, մյուս կողմից, նախընտրելի տեխնիկան է բարդ նմուշներ վերլուծելու, անհայտ միացությունների հայտնաբերման եւ ուլտրա-հետքի մակարդակի հայտնաբերման հասնելու համար:

Քանի որ տեխնոլոգիան շարունակվում է առաջխաղացում, HPLC- ի եւ LCMS- ի ինտեգրումը ավելի ու ավելի կարեւոր դեր կխաղա վերլուծական քիմիայի զարգացող կարիքների բավարարման եւ տարբեր ծրագրերի բարձրորակ արդյունքի ապահովման գործում:

Նախորդը:

Վերջնական ուղեցույցը `0.45 միկրոն ներարկիչ ֆիլտրերի համար

Հաջորդը.

Այն ամենը, ինչ դուք պետք է իմանաք HeadSpace GC նմուշի պատրաստման մասին