Preparazione e filtrazione del campione: garantire la qualità in cromatografia

Preparazione del campione adeguata: contenitori puliti, rimuovere i particolati, arricchire analiti e, se necessario, derivatizzare - elimina oltre il 90% delle anomalie del rumore e della pressione basale, garantendo picchi acuti e baseline stabili. Il fallimento qui si traduce in una coda di picco, baseline alla deriva o blocco della colonna.

1. Contamination & Matrix Interference

Problema

• Baseline drift and rising noise obscure minor peaks.

• Unexpected peaks appear from leached impurities.

• Poor reproducibility between injections.
  

  

Causa

• Residui in vetro: silicati incompleti di lavaggio acido; La plastica può lisciviazione.

• Agenti di pulizia: la traccia di organici nei solventi risciacquo rimangono adsorbiti.

• Particulati ambientali: polvere d'aria di laboratorio e COV adsorbiti su campioni aperti.
  

  

Soluzione

1. Strict cleaning SOP: Acido Immersione → risciacquo in acque puro ad ultrasuoni → azoto secco per vetreria; Detersivo dedicato per la plastica.

2. Prefiltrazione: Centrifuga a 3000 giri / min per 10 minuti o utilizzare un prefiltro da 5 µm prima della filtrazione finale di 0,22 µm.

3. Controlled environment: Esegui prep in un cappuccio di flusso laminar per ridurre al minimo la contaminazione aerea.
   
   

2. Filter Clogging from Incompatible Filters

Problema

• Allarmi di pressione automatica e frequenti sostituti dell'ago.

• Decreased flow rate, inconsistent peak areas.

• Elevated backpressure and column inlet blockage.
  

  

Causa

• Mismatch a membrana: il nylon si gonfia in solventi organici; PVDF si insinua a temperatura elevata.

• Dimensione dei pori errati: i filtri da 0,22 µm intrappolano i particelle fine ma riducono il flusso; I filtri da 0,45 µm possono ancora intasare i microcristalli.

Soluzione

1. Membrane–solvent matrix: Utilizzare PES idrofili \ / MCE per acquoso (ph4–8), ptfe idrofobico \ / PVDF per fasi organiche; Evita l'acetato di cellulosa in acidi forti.

2. Select proper pore size: Utilizzare 0,45 µm per HPLC di routine, 0,22 µm per UHPLC o tracce; Prefilter campioni ad alta viscosità attraverso 5 µm.

3. Monitorare ΔP: Aumento della pressione della traccia; Sostituire il filtro quando la contropressione aumenta> 15%.
   
   

   

3. Solvent–Membrane Chemical Incompatibility

Problema

• Filtered sample appears cloudy or carries particles.

• New baseline noise or ghost peaks post‑filtration.

• Reduced analyte recovery.
  

  

Causa

• Gonfiore del solvente: THF si gonfia PTFE, alterando le dimensioni e il flusso dei pori.

• Membrana LeaChables: il nylon in acido formico rilascia oligomeri che assorbono a 214 nm.

Soluzione

1. Compatibility test: Filtro di ammollo nel solvente previsto per 24 ore a 25 ° C; Ispezionare per gonfiore o cambiamento di peso.

2. Pilot LC‑MS test: Confronta i cromatogrammi ionici totali di campione filtrato rispetto a non filtrati.

3. Use low‑leach filters: Ultrasonic‑welded PTFE or PES without adhesives.
   
   

Sistema di qualità: difesa -monitoraggio -correzione

Difesa

Standardizzare le SOP per la pulizia, la filtrazione e la selezione della membrana per prevenire errori.

Monitoraggio

Registrare la portata, la contropressione e le baseline del campione in bianco per rilevare la deriva.

Correzione

Mantenere un'analisi dell'albero di guasto per una rapida radice -causa di identificazione e azione correttiva.

"La precisione analitica inizia con l'intercettazione della particella più piccola."