דגימות מסוימות עדיין לא ניתנות להזרקה ישירות לאחר טיפול מקדים. דריווטיזציה נדרשת כדי להפוך תרכובות ללא ספיגת UV או הקרינה הניתנות לזיהוי על ידי גלאי UV או פלואורסצנטי.

משפר את הרגישות
משפר את ההפרדה (שינוי איכות)

בעיות אפשריות כוללות אובדן דגימות, זיהום, תגובות לא שלמות או תוצרי לוואי מרובים, שעלולים להשפיע על הדיוק או להכניס שגיאות.

סינון לדוגמא

דגימות LC חייבות להיות אחידות וללא חלקיקים; חלקיקים עלולים לגרום נזק למזרק או לחסום את העמוד. השלבים כוללים:

נער את המדגם לפני ההזרקה ובדוק אם יש חלקיקים, עכירות או תחליבים
אם נצפים חלקיקים, סנן את הדגימה באמצעות ממברנה שיכולה לשמור על חלקיקים ≥0.15μm

בעיות פוטנציאליות: זיהום דגימה, ספיחה הפחתת ריכוז הרכיבים, ואידוי ממס הגורם לשגיאות.

שיטות מיצוי

מיצוי מפריד בין אנליטים לממסים משותפים או מסיר חומרים מפריעים (למשל חלבונים). ממיסים אורגניים צריכים להיות בעלי רעילות נמוכה, נדיפים, דלי זיהומים, ולהמיס את הדגימה היטב.

ממיסים נפוצים: דיאתיל אתר, אתיל אצטט, דיכלורומתאן, כלורופורם, בנזן או תערובות.

לאחר מיצוי, ניתן להזריק דגימות ישירות או מרוכזות כדי להגביר את הריכוז והרגישות של האנליטים.

מיצוי דגימה מסיס במים

רכיבים חומציים ומלחים: לחלץ זיהומים עם ממס אורגני, להתאים לחומציות, ואז לחלץ או להזריק; או לייבש תחת N₂ ולהמיס בממס מתאים לפני ההזרקה.
רכיבים בסיסיים ומלחים: לחלץ זיהומים עם ממס אורגני, להתאים לבסיס, ואז לחלץ או להזריק; או לייבש תחת N₂ ולהמיס בממס מתאים לפני ההזרקה.
רכיבים ניטרליים: מיצוי זיהומים בעזרת ממס אורגני, ולאחר מכן ניתוח ישירות באמצעות כרומטוגרפיה הפוכה.

מיצוי דגימה מסיס שומן

לחלץ עם ממס אורגני או להזריק ישירות; או לייבש תחת N₂ ולהמיס בממס מתאים לפני ההזרקה.

מקורות זיהום

מקורות זיהום פוטנציאליים בניתוח:

סוג זיהום	מקור	אמצעי מניעה
איכות הסביבה	גזים מזיקים, אבק, אירוסולים	שמור על חדר מכשירים מבודד, נקי; להתקין AC; לשלוט על לחות <70%; למנוע לחות, קורוזיה, רטט
מיכלים	זכוכית, קרמיקה, קוורץ, כלי מעבדה מפלסטיק	בחר מיכלים מתאימים לכל סוג מדגם; לנקות ביסודיות
ריאגנטים	ריאגנטים שאינם בדרגת כרומטוגרפיה	השתמש בריאגנטים בדרגת כרומטוגרפיה, בטוהר גבוה או בדרגה אנליטית

הכנת פתרון סטנדרטי

הכן תחילה פתרון סטנדרטי פנימי; השתמש באותה אצווה בתקנים ובדוגמאות כדי להפחית שגיאות
החומרים חייבים להיות בדרגת כרומטוגרפיה ויציבים
אחסן תמיסות סטנדרטיות בבקבוקים חומים בטמפרטורה נמוכה
עבור ויטמינים, השתמש בצלוחיות נפח חומות או הגן מפני אור

בעיות נפוצות בטיפול מקדים ופתרונות לדוגמא

בעיה	סיבה	פתרון
פסגות לא קשורות בכרומטוגרמה	זיהום מסנן	השרו את המסנן בממס לדוגמא והזרקת בדיקה שנה סוג מסנן השתמש בטכניקות ניקוי חלופיות
תגובת שיא נמוכה (במיוחד דגימות בריכוז נמוך)	ספיחה על משטח המסנן	שנה סוג מסנן עבד את כל הדגימות באותם תנאים השתמש בטכניקות ניקוי חלופיות
התאוששות נמוכה	חילוץ לא שלם	הגדל את זמן המיצוי, השתמש בממס חם התאם את שיטת הניקוי
פסגות מורחבות, קיצור חיי העמודה	הפרעות וזיהום לדוגמא	שיפור שיטת הניקוי
דיוק גרוע	התאוששות לא מלאה	בצע אופטימיזציה או החלפה של גזרה, הפרדה, מיצוי או תנאים אחרים השתמש בטיפול אוטומטי כדי לשפר את הדיוק

השפעות גבוהות במיוחד\/טמפרטורה נמוכה וחשיפה לאור על יציבות המדגם: תיאוריה ומתודולוגיה

חזרה לרשימה