1. אין חסימה של עמודת HPLC שלך
2. הרגישות הגבוהה יותר של עמוד ה- HPLC שלך
3. דיוק גבוה יותר
4. פחות פסגות חיוביות שווא
5. פחות רעשי רקע
6. לא ניתן לשחץ
ארבעה שלבים להכנת מדגם HPLC
הבה לשכנע אותך כיצד תוכל לחסוך זמן עם הפתרונות שלנו ובו בזמן להגביר את ההתרבות של התוצאות שלך:
שלב 1. ניתוח פתרונות מימיים
איכות מים ירודה היא אחד הגורמים הגדולים התורמים לבעיות במהלך ריצות HPLC. זיהומי מים בשלב הנייד יכולים לקיים אינטראקציה עם העמודה ולהביא לפתרון ורגישות לקויים או לפסגות בלתי צפויות בכרומטוגרמה, המכונה בדרך כלל פסגות רפאים. השימוש במים אולטרה -אפוריים מצמצם באופן משמעותי את הסיכון לזיהום עם פחמימות אורגניות, מיקרואורגניזמים, אנדוטוקסינים, RNASE ו- DNASE. מים Ultrapure זמינים לרכישה, עם זאת, שימוש במערכת טיהור מים במעבדה שלך הוא הדרך הקלה ביותר להבטיח מים אולטרה-אולטרה-איכותיים. מים מסוג 1 מסוג מגיב העונים על תקני ASTM, NCCLS, ISO ו- USP הם הבחירה הטובה ביותר עבור יישומי HPLC.
שלב 2. הכנת סטנדרטים
הכנת סטנדרטים לזיהוי וכימות מורכבים יכולה להיות תהליך מייגע וגוזל זמן. שקילה במדויק של מוצק כך שניתן להשתמש בנפח מוגדר מראש של ממס קשה, ופסולת כתוצאה משגיאה יכולה להיות יקרה - במיוחד בעבודה עם תרופות. גורמים אחרים כמו טמפרטורה מסבכים עוד יותר את ההכנה הסטנדרטית. תנודות טמפרטורה משנות את צפיפות הממס ותורמות להבדלים דרמטיים בריכוז.
שימוש במאזן המאפשר דיוק שקילה עד מספר מקומות עשרוניים ואוטומציה של התהליך על ידי קישור האיזון למתקן ממס מבטיח את הדיוק הגבוה ביותר. שימוש בתוכנות כמו APP של מינון YAPP16 מאפשר חישובים אוטומטיים וניטור גרבימטרי של ערכים מדודים. תיעוד הטמפרטורה והצפיפות של הממס מבטיח גם ריכוזים מדויקים ביותר, במיוחד בעת הכנת סטנדרטים בימים שלאחר מכן. העברת נתונים ישירה מיישום השקילה של YAPP16 לתוכנת Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Chromatography System (CDS) היא אפשרות לטיפול בנתונים ללא נייר עם שלמות נתונים מלאה.
שלב 3. חזור ליסודות עם פיפטה טובה
לעתים קרובות מדי מתעלמים מהחשיבות של פיפט מדויק ומדויק ומובנים מאליהם. לרמת מיומנות המשתמש ולניסיון יכולים להיות השלכות משמעותיות על ניתוחים רגישים כמו HPLC. בחירת הפיפטה הנכונה יכולה להפחית את הטעות האנושית ואת העלויות הנלוות לממסים מבוזבזים.
פיפטות מכניות עם מנעול נפח מציעות פיתרון פשוט למניעת שינויים בנפח מקרי, ואילו פיפטות אלקטרוניות מתוחכמות יותר מבטלות את שונות המשתמשים בכדי לספק בעקביות נפחים מדויקים. קצה הפיפטה הוא גם פרט חשוב שיש לקחת בחשבון עבור ניתוחי HPLC. טיפים לשמירה נמוכה הם הטובים ביותר כאשר עובדים עם ממיסים בעלי צמיגות שונות, מכיוון שהם ממקסמים את התאוששות הדגימה. זיהום מדגמים יכול להתרחש גם כתוצאה מהדברת קצה הפיפטה. ככאלה, טיפים עם עמידות כימית גבוהה משמרות את שלמות המדגם.
שלב 4. פילטר לדיוק ואריכות ימים
הקפדה נוספת על סינון דגימות לפני הניתוח משפרת את האמינות ויכולה להאריך את חיי העמודה HPLC על ידי מניעת השפעות סתימות. מסנני מזרק הם פיתרון פשוט ומהיר לסינון דגימות לפני כרומטוגרפיה של העמודות. בדומה לטיפים לפיפטה, המיסים המשמשים ב- HPLC מחייבים פילטרים ספציפיים למניעת שטיפה וזיהום מדגם.
ממברנות תאיות עמידות בפני דימתיל סולפוקסיד (DMSO), אמיד, קטונים, אסטר ותרכובות אתר. עבור ממיסים קשים במיוחד, ממברנות פוליאתרסולפון (PTFO) לא מצופות (PTFO) מונעות שטיפה וזיהום מדגם. סינון לדוגמא הופך להיות זמן רב כאשר מספר הדגימה גדל. יחידות סינון מרובות-מדגמיות, כמו מערכת סינון Claristep®, יכולות לעבד דגימות ללא מזרקים והכנת מדגם מהיר מבלי להקריב איכות.
חמש בעיות שאתה צריך לשים לב ל！
1. מהן בעיות ההכנה הגדולות ביותר לדוגמה העומדות בפני מעבדות?
מעבדות נמצאות תחת לחץ הולך וגובר מבחינת זמן ועלות, ולעתים קרובות מתמודדות לא רק עם מספר גבוה של דגימות אלא גם דגימות של טבע משתנה. הכנת הדגימה היא תחום בו הבדלים עדינים בין סוגי הדגימה או שיטות הכנת הדגימה והחומרים המשמשים יכולים להשפיע על התוצאות שהתקבלו. הבטחת תאימות בין החומרים במכשיר הסינון והממס יכולה למזער בעיות; לדוגמה, רמות התרכובות הניתנות לחלל שעלולות להפריע לגילוי אנליטים.
2. מה קורה כאשר הכנה לדוגמא משתבשת?
לפני יישומי כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC), דגימות מוכנות על ידי מגוון שיטות, לכולן יש פוטנציאל להשפיע על תוצאות אנליטיות על ידי השפעה על המדגם המוזרק למערכת. הכנת מדגם לא יעילה יכולה להוביל להפחתה בחיי העמוד, דרישות השירות להגדיל לרכיבים, השבתה פוטנציאלית של מכשור, ירידה ביעילות ההפרדה הכרומטוגרפית והעתקות ובעיות רבות אחרות.
3. במבט ראשון, סינון נראה כמו תהליך פשוט ...
למרות שהסינון הוא חלק קטן לכאורה מזרימת עבודה גדולה, ההשפעה של בחירת המסנן הנכון ליישום נתון יכולה להיות משמעותית. לדוגמה, שיטות שאינן מסירות חומר חלקיקי מספיק יכולות לגרום לחסימת עמודות. בחירה בלתי הולמת של מכשירי הכנת הדגימה עלולה, בנסיבות מסוימות, לשחרר תרכובות הניתנות לחלץ למדגם, לקשור אנליטים של עניין או להכניס שגיאות באמצעות אובדן מדגם - הכל משפיע על איכות ושחזור התוצאות שנצפו. אם אתה בטוח כי מתכלי הסינון שלך אינם תורמים לטעויות הדורשות עיבוד חוזר או חקירות בעלות שורש, תחסוך כסף ותעניק לעצמך שקט נפשי.
4. מהם הכנת הדגימה הנפוצה ביותר 'נכשלת'?
בחירת קרום מסנן שגויה היא בעיה אחת שאנו רואים הרבה. סוגיות יכולות להופיע כפסגות זרות ממצב חילוץ, שיכולות להפריע לאיתור אנליטי העניין. חוסר ההתאמה של מדיה פילטר עם מדגם או ממס מבחינת התנגדות כימית אינו מוגבל אך ורק להשפעות פירוק על מדיה המסנן. ממיסים יכולים לגרום לנפיחות קלה של חומרי קרום פולימריים כאשר הם אינם תואמים לחלוטין, מה שבתורו יכול להשפיע על ביצועי הסינון, מה שמוביל לניקוי לא יעיל של דגימות. אחת הדרכים לטפל בבעיה זו היא על ידי בחירת קרום התואם באופן נרחב לממסים מימיים ואורגניים כאחד. להכנת דגימות HPLC טיפוסיות, מזרק ומסננים ללא מזרן המכילים ממברנות תאית מחודשות הם אפשרות טובה בגלל תאימות הממס הרחבה שלהם.
השימוש במכשיר פילטר גדול מהנדרש לנפח המוכנים הוא מפלגה נפוצה נוספת. השימוש במכשירי פילטר גדולים מדי פירושו שכמויות קטנות של המדגם יישארו במסנן, גם לאחר ננקטים אמצעי זהירות לגרש ככל האפשר.
5. מהם היתרונות של לקחת את שלב הסינון ברצינות?
מטרה מהותית של מרבית המעבדות העוסקות בבדיקה אנליטית היא פיתוח תהליכים עקביים העומדים בבסיס תוצאות עקביות - ודורשות סינון עקבי. בחירת מכשיר סינון עם גודל הנקבוביות הנכון ומאפייני השמירה מסייעת להבטיח הסרה יעילה של חלקיקים, בעוד שבחירה בגודל ועיצוב מתאימים של יחידת המסנן יכולה לסייע במזעור אובדן המדגם. סינון טוב מסייע גם בהגנה על העמודה ועלולה להרחיב את חייו של המזרק וגם על העמודה.
מַסְקָנָה
HPLC היא טכניקה חשובה למדעי החיים ומחקר ביו -תרופות מכיוון שהיא מספקת תוצאות מדויקות ושחזור. דיוק זה תלוי בשלמות מדגם ה- HPLC, והדרך הטובה ביותר להבטיח דגימות באיכות גבוהה היא להתחיל עם הכלים הטובים ביותר. עם פתרונות למים אולטרה -אפור, הכנה סטנדרטית, פיפטות, טיפים ומסננים, קו ההכנה לדגימה של HPLC מהווה כל פרט ופרט. פתרונות ותוכנה אוטומטיים עוזרים גם לייעל את הכנת הדגימה להעברת דגימות נקייה לתוצאות נקיות.
דיונים נוספים על פתרונות הכנת מדגם HPLC מתקבלים בברכה!
אַנגְלִית
סִינִית
