高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）は、医薬品、環境科学、食品安全などの多様な分野の研究所で使用される重要な分析手法です。 HPLCの世界内には、分析HPLCと検定HPLCの2つの主要なカテゴリがあります。どちらの手法も同様の原則を使用して化合物を分離しますが、それらは異なる目的に使用され、異なる動作パラメーターを持っています。このブログでは、目的、操作の規模、機器、アプリケーションなど、分析と準備HPLCの違いを調査します。
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分析HPLCの理解
定義と目的
分析HPLCは、主にサンプル内の化合物の分離と識別に焦点を当てています。主な目標は、混合物に存在するコンポーネントに関する定性的および定量的情報を取得することです。分析HPLCは、よく使用されます。
定性分析：サンプルのコンポーネントを識別します。
定量分析：サンプル内の特定の化合物の濃度を決定します。
動作の規模
分析HPLCは、通常、マイクロリットルのサンプル注入を含む小規模で動作します。使用されるボリュームは一般に1〜100 µLの範囲で、1回の実行で複数のサンプルを分析できます。この小規模は、日常的なテストと品質管理に最適です。
カラムサイズと粒子サイズ
分析HPLCで使用されるカラムは通常、直径が小さく、通常は4.6 mm前後で、小さな固定相粒子（3〜5μm）が詰められています。この構成により、詳細な分析に適した高解像度で効率的な複合分離が可能になります。
検出方法
分析HPLCは、紫外線、蛍光、質量分析など、さまざまな検出方法を採用しています。検出器の選択は、分析物の性質と分析の特定の要件に依存します。非破壊検出器は、多くの場合、サンプルを大幅な損失なしに分析できるようにするために使用されます。
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準備HPLCの理解
定義と目的
一方、分準備HPLCは、特定の化合物を混合物から分離して精製することを目指しています。主な目標は、さらなる分析または使用のために、ターゲット化合物の十分な量を分離することです。準備
HPLCは、一般的に次のアプリケーションに使用されます。
化合物の分離：研究または産業用途向けの特定の化合物の抽出と精製。
サンプルの準備：後続の分析または製剤のためのサンプルの準備。
運用規模
分析HPLCは、分析HPLCよりも大規模に実行されます。サンプル量は、ターゲット化合物の予想収量に応じて、数ミリリットルから数リットルまでの範囲です。この大規模により、十分な量の精製材料をさらに使用するために収集することができます。
カラムサイズと粒子サイズ
対象HPLCに使用されるカラムは、通常20 mmから100 mm以上の範囲の直径の範囲で大幅に大きくなります。カラムには、より大きな固定相粒子（通常は10〜20 µm）が詰め込まれており、流量を増加させ、より大きなサンプル量に対応しています。この設計は、背圧を低減し、化合物の効率的な分離を達成するのに役立ちます。
検出方法
検定HPLCでは、検出方法は分析HPLCで使用されている方法とは異なる場合があります。非破壊検出器は依然として一般的ですが、準備システムはしばしば溶出プロファイルに基づいて分数を収集できる検出器を使用します。これにより、特定の化合物をカラムから溶出するため、分離できます。
クロマトグラフィーバイアルの適用についてもっと知りたいので、この記事を確認してください。HPLCバイアルの5つのクリーニング方法
分析HPLCと分析HPLCの主な違い
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特徴 |
分析HPLC |
準備HPLC |
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目的 |
定性的および定量分析 |
化合物の分離と精製 |
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動作の規模 |
小規模（µLボリューム） |
大規模（MLからLボリューム） |
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列の寸法 |
直径が小さい（4.6 mm） |
より大きな直径（20〜100 mm） |
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粒子サイズ |
より小さな粒子（3〜5 µm） |
より大きな粒子（10-20 µm） |
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流量 |
低流量（0.1-5 ml \ / min） |
より高い流量（10-200 ml \ / min） |
|
検出方法 |
非破壊検出器（UV、MS） |
溶出プロファイルに基づく分数収集 |
分析HPLCと準備HPLCを選択するときは、次の要因を検討してください。
分析の目的：主な目標が化合物を定性的かつ定量的に分析するか、さらに使用するために特定の化合物を分離することであるかどうかを判断します。
サンプルの量：利用可能なサンプルの量を評価します。少量のサンプルが利用可能な場合、分析HPLCがより適切になる場合があります。逆に、大量のサンプルが必要な場合、準備HPLCがより良い選択です。
必要な純度と収量：ターゲット化合物の必要な純度と収量を考慮してください。分析HPLCは、特定の化合物の回復を最大化することを目的としていますが、分析HPLCはサンプルの組成に関する詳細情報の提供に焦点を当てています。
リソースと機器：機器や予算を含む利用可能なリソースを評価します。対象のHPLCシステムはより高価になる傾向があり、機器と運用コストへのより多くの投資が必要です。
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結論
分析的HPLCと準備HPLCはどちらもクロマトグラフィーの分野で貴重な手法であり、それぞれが研究者と業界のニーズに応じて異なる用途を持っています。分析HPLCは化合物の詳細な分析と定量化に理想的ですが、調製HPLCは、さらなる用途のために特定の化合物を分離および精製するために不可欠です。これら2つの手法の違いを理解することは、研究者が情報に基づいた意思決定を行い、ワークフローを最適化し、分析で正確で信頼できる結果を得るのに役立ちます。 HPLCテクノロジーが進歩し続けるにつれて、分析方法と準備方法の両方が、あらゆる種類の科学的研究の成功の不可欠な部分であり続けます。
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