最良の結果を得るためのHPLCサンプル準備ソリューション
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最良の結果を得るためのHPLCサンプル準備ソリューション

2022年7月26日
HPLCは、最も一般的な高精度分析方法の1つです。その主な目的:再現性と具体的な結果を提供します。サンプルは、HPLCカラムに直接注入するために最適に準備する必要があります。
これを達成するには、サンプルを適切な溶媒に溶解するだけではありません。さらに重要なことは、検出中に可能な限り最善の方法で干渉を除外し、柱の詰まりを防ぐために、粒子がないことです。この労働集約的なサンプル準備は、多くの場合、時間がかかる退屈な雑用です。

HPLCサンプル前分解ソリューション

サンプルの調製は、クロマトグラフィーおよび分光分析の重要な部分です。このプロセスは、クロマトグラフィー分析のためのカラムへの注入に適した、ICP-MS \ /への原子吸着源、またはさらなる特性評価のためのキュベットまたはNMRチューブへの代表的、再現性、および均質な溶液を提供することを目的としています。サンプルの準備の目的は、(a)干渉が比較的自由ではなく、(b)列または機器に損傷を与えないサンプルアリコートを提供することです。

最適化されたサンプル準備および非最適化と比較

最適化されていないサンプル準備

顕著なバックグラウンドノイズとピークテールを備えたクロマトグラム
HPLCサンプル前分解ソリューション

HPLC分析では、サンプル調製に起因する問題が発生する可能性があります。
1。HPLC列の詰まりの可能性
2。HPLCカラムの感度が低い
3。ピークテール
4.より多くの偽陽性のピーク
5。背景ノイズが高い
6。浸出可能

最適化されたサンプル準備

安定したベースラインと対称ピークを備えたクロマトグラム

HPLCサンプル前分解ソリューション

Sartorius製品を使用してHPLCのためにサンプルを準備すると、通常の問題が発生するのを防ぎ、より高い分析精度を可能にします。
1. HPLC列の詰まりはありません
2。HPLCカラムのより高い感度
3。より高い精度
4.偽陽性のピークが少ない
5.背景ノイズが少ない
6.浸出できない

HPLCサンプル準備のための4つのステップ

私たちのソリューションで時間を節約し、同時に結果の再現性を高める方法を納得させましょう。

ステップ1。水溶液の分析

水質の低下は、HPLCの実行中の問題の最大の要因の1つです。移動相の水不純物は、カラムと相互作用し、クロマトグラムの解像度と感度が不十分であるか、予期しないピークをもたらす可能性があり、一般にゴーストピークと呼ばれます。超純水を使用すると、有機炭素、微生物、エンドトキシン、RNASE、およびDNASEによる汚染のリスクが大幅に減少します。ウルトラピア水は購入できますが、実験室で浄水システムを使用することは、高品質のウルトラピア水を確保するための最も簡単な方法です。 ASTM、NCCLS、ISO、およびUSP標準を満たすタイプ1試薬グレードの水は、HPLCアプリケーションに最適です。

ステップ2。標準の準備

化合物の識別と定量化のための基準を準備することは、退屈で時間のかかるプロセスになる可能性があります。定義済みの溶媒を使用できるように固体を正確に測定することは困難であり、特に医薬品を使用する場合、エラーによる廃棄物はコストがかかる可能性があります。温度などの他の要因は、標準的な準備をさらに複雑にします。温度の変動により、溶媒密度が変化し、濃度の劇的な違いに寄与します。

HPLCサンプル前分解ソリューション

バランスをいくつかの小数点までの計量精度を可能にするバランスを使用して、バランスを溶媒ディスペンサーにリンクすることによりプロセスを自動化することで、最高の精度が保証されます。 YAPP16の投与量Q-APPなどのソフトウェアを使用すると、自動計算と測定値の重量監視が可能になります。溶媒の温度と密度を文書化することで、特にその後の日に基準を準備する場合、非常に正確な濃度も保証されます。 YAPP16からの直接的なデータ転送、Thermo Scientific™Chromeleon™7.2 Chromatography Data System(CDS)ソフトウェアへの適用アプリケーションは、完全なデータの整合性を備えたペーパーレスデータ処理のオプションです。

ステップ3。優れたピペッティングで基本に戻ります

正確で正確なピペッティングの重要性は、見過ごされ、当然のことと考えられています。ユーザーのスキルレベルとエクスペリエンスは、HPLCなどのデリケートな分析に大きな意味を持つ可能性があります。適切なピペットを選択すると、ヒューマンエラーと無駄な溶媒の関連コストを削減できます。

HPLCサンプル前分解ソリューション

ボリュームロックを備えた機械ピペットは、偶発的なボリュームの変化を防ぐための簡単なソリューションを提供しますが、より洗練された電子ピペットはユーザーのばらつきをなくして、一貫して正確なボリュームを提供します。ピペットのヒントは、HPLC分析に考慮すべき重要な詳細でもあります。サンプル回復を最大化するため、異なる粘度の溶媒を使用する場合、低い保持のヒントが最適です。サンプルの汚染は、ピペットチップから浸出した結果としても発生する可能性があります。そのため、高耐薬品性を備えたヒントは、サンプルの完全性を維持します。

ステップ4。精度と寿命についてフィルター

分析の前にサンプルをフィルタリングするために追加の注意を払うと、信頼性が向上し、詰まりの影響を防ぐことでHPLCカラムの寿命を延ばすことができます。シリンジフィルターは、カラムクロマトグラフィーの前にサンプルをフィルタリングするためのシンプルで迅速なソリューションです。ピペットのヒントと同様に、HPLCで使用される溶媒は、浸出とサンプル汚染を防ぐために特定のフィルターを必要とします。

HPLCサンプル前分解ソリューション

セルロース膜は、ジメチルスルホキシド(DMSO)、アミド、ケトン、エステル、およびエーテル化合物に耐性があります。特に厳しい溶媒のために、コーティングされていないポリエーテルスルホン(PTFO)膜は、浸出とサンプル汚染を防ぎます。サンプル数が増加すると、サンプルろ過は非常に時間がかかります。 Claristep®ろ過システムなどのマルチサンプルのろ過ユニットは、注射器なしでサンプルを処理し、品質を犠牲にすることなく、サンプルを急速に駆けつけることができます。

あなたが注意を払う必要がある5つの問題

1.ラボが直面している最大のサンプル準備の問題は何ですか?

研究所は、時間とコストの点で圧力が増加しており、多くの場合、多数のサンプルだけでなく、さまざまな性質のサンプルも扱っています。サンプルの調製は、サンプルタイプまたは使用されるサンプルの調製方法と材料の微妙な違いが得られた結果に影響を与える可能性がある領域です。ろ過装置と溶媒内の材料間の互換性を確保すると、問題を最小限に抑えることができます。たとえば、分析物検出を妨げる可能性のある抽出可能な化合物のレベル。

HPLCサンプル前分解ソリューション

2。サンプルの準備がうまくいかないとどうなりますか?

分析的な高性能液体クロマトグラフィー(HPLC)アプリケーションの前に、サンプルはさまざまな方法で調製されます。これらはすべて、システムに注入されたサンプルに影響を与えることにより、分析結果に影響を与える可能性があります。効果のないサンプル調製は、カラムの寿命の減少、コンポーネントのサービス要件の増加、計装の潜在的なダウンタイム、クロマトグラフィー分離効率と再現性の減少、およびその他の多くの問題につながる可能性があります。

3。一見すると、ろ過は単純なプロセスのように思えます...

ろ過は大規模なワークフローの一見小さな部分ですが、特定のアプリケーションに適したフィルターを選択することの影響はかなりのものです。たとえば、十分な粒子状物質を除去しない方法は、列のブロックにつながる可能性があります。サンプル準備デバイスの不適切な選択は、特定の状況では、抽出可能な化合物をサンプルに放出し、目的の分析物を結合したり、サンプル損失を介してエラーを導入したりする可能性があります。ろ過消耗品が再加工や根の原因調査を必要とするエラーに貢献していないと確信している場合、お金を節約して安心します。

HPLCサンプル前分解ソリューション

4.最も一般的なサンプル準備「失敗」は何ですか?

誤ったフィルター膜の選択は、私たちがよく見られる問題の1つです。問題は、関心のある分析物の検出を妨げる可能性のある抽出物からの外部のピークとして表示される可能性があります。耐薬品性の観点からサンプルまたは溶媒によるフィルターメディアの非互換性は、フィルター媒体への溶解効果だけに限定されません。溶媒は、完全に互換性がない場合、ポリマー膜材料のわずかな腫れを引き起こす可能性があり、それがろ過性能に影響を与え、サンプルの効果的なクリーンアップにつながる可能性があります。この問題に対処する1つの方法は、水性溶媒と有機溶媒の両方と広く互換性のある膜を選択することです。典型的なHPLCサンプルの調製の場合、再生セルロース膜を含む注射器と注射なしのフィルターは、溶媒の幅広い互換性のために良い選択肢です。

準備されているボリュームに必要以上のフィルターデバイスの使用は、もう1つの一般的な落とし穴です。あまりにも大きなフィルターデバイスを使用すると、予防措置が可能な限り追放されるために取られた後でも、少量のサンプルがフィルターに残ることを意味します。

HPLCサンプル前分解ソリューション

5.ろ過ステップを真剣に受け止めることの利点は何ですか?

分析テストに従事するほとんどの研究所の基本的な目標は、一貫した結果を支える一貫したプロセスを開発することであり、一貫したフィルタリングが必要です。適切な細孔サイズと保持特性を備えたろ過装置の選択は、効果的な粒子状除去を確実にするのに役立ちますが、フィルターユニットの適切なサイズと設計の選択はサンプルの損失を最小限に抑えるのに役立ちます。また、良好なろ過は、カラムを保護するのにも役立ち、インジェクターとカラムの両方の寿命を延長する可能性があります。

結論

HPLCは、正確で再現可能な結果を​​もたらすため、ライフサイエンスとバイオ医薬品研究のための貴重なテクニックです。この精度は、HPLCサンプルの整合性に依存し、高品質のサンプルを確保するための最良の方法は、最良のツールから始めることです。超純水、標準的な準備、ピペット、ヒント、フィルターのソリューションを使用して、すべての詳細についてHPLCサンプル準備ラインアカウントを使用します。自動化されたソリューションとソフトウェアは、サンプル準備を合理化して、クリーンなサンプルを提供するためにクリーンなサンプルを提供するのにも役立ちます。

HPLCサンプル準備ソリューションに関する詳細な議論を歓迎します!


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