Жоғары сапалы сұйық хроматография (HPLC) - бұл фармацевтика, қоршаған ортаны қорғау және азық-түлік қауіпсіздігі бойынша салалардағы зертханаларда қолданылатын негізгі аналитикалық әдіс. HPLC әлемінде екі негізгі категория бар: аналитикалық HPLC және дайындық HPLC. Екі техника екі техникада қосылыстарды бөлу үшін ұқсас қағидаларды қолданады, олар әр түрлі мақсаттарда қолданылады және әртүрлі пайдалану параметрлері болуы керек. Бұл блог аналитикалық және дайындық HPLC арасындағы айырмашылықтарды, оның ішінде олардың мақсаты, жұмыс шкаласы, жабдықтар мен қосымшалармен танысады.
HPLC шишалары туралы толық ақпарат алғыңыз келсе, осы мақаланы тексеріңіз: HPLC шишаларының энциклопедиясы
Аналитикалық HPLC түсіну
Анықтама және мақсат
Аналитикалық HPLC ең алдымен үлгіні бөлу және сәйкестендіруге бағытталған. Бастапқы мақсат - қоспада бар компоненттер туралы сапалы және сандық ақпарат алу. Аналитикалық HPLC жиі қолданылады:
Сапалық талдау: үлгінің құрамдас бөліктерін анықтау.
Сандық талдау: үлгінің нақты қосылыстың концентрациясын анықтау.
Жұмыс ауқымы
Аналитикалық HPLC кішірек масштабта жұмыс істейді, әдетте, микрокредиттер үлгілерін қосады. Пайдаланылған көлемдер, әдетте, 1-ден 100 мкл диапазонда, бірнеше үлгілерді бір жүгірісте талдануға мүмкіндік береді. Бұл шағын масштабта күнделікті сынау және сапаны бақылау үшін өте ыңғайлы.
Баған мөлшері және бөлшектердің мөлшері
Аналитикалық HPLC-де қолданылатын бағандар әдетте диаметрі әдетте аз, әдетте шамамен 4,6 мм құрайды және кішкентай стационарлық фазалық бөлшектермен (3-5 мкм) жиналады. Бұл конфигурация егжей-тегжейлі талдау үшін қолайлы және тиімді қосылыстарды тиімді бөлуге мүмкіндік береді.
Анықтау әдістері
Аналитикалық HPLC әр түрлі анықтау әдістері, соның ішінде ультракүлгін, флуоресценция және масс-спектрометрия қолданылады. Детекторды таңдау аналиторлық сипатқа және талдаудың нақты талаптарына байланысты. Бұзбайтын детекторлар көбінесе үлгіні елеусіз жоғалтуға болатындығын қамтамасыз ету үшін қолданылады.
HPLC шишалары туралы 50 жауап білгіңіз келеді, осы мақаланы қараңыз: HPLC шишаларында 50 жиі қойылатын сұрақтар
HPLC дайындық
Анықтама және мақсат
Дайын HPLC, екінші жағынан, белгілі бір қосылыстарды қоспадан бөліп, тазартуға бағытталған. Негізгі мақсат - қосымша талдау немесе пайдалану үшін мақсатты қосылыстың жеткілікті мөлшерін оқшаулау. Дәрі бере
HPLC әдетте келесі қосымшалар үшін қолданылады:
Күрделі оқшаулау: зерттеу немесе өнеркәсіптік қосымшалар үшін нақты қосылыстарды алу және тазарту.
Үлгіні дайындау: Үлгілерді кейінгі талдау немесе тұжырымдау үшін дайындау.
Операциялардың ауқымы
Дайын HPLC аналитикалық HPLC-ге қарағанда үлкен масштабта жүзеге асырылады. Үлгілер көлемі бірнеше миллилитрден бірнеше литрден бірнеше литрге дейін, бұл мақсатты қосылыстың күтілетін өніміне байланысты болуы мүмкін. Бұл үлкен масштаб, одан әрі пайдалану үшін жеткілікті мөлшерде тазартылған материалдарды жинауға мүмкіндік береді.
Баған мөлшері және бөлшектердің мөлшері
Дайындық HPLC үшін пайдаланылатын бағандар едәуір үлкен, әдетте 20 мм-ден 100 мм-ге дейін немесе диаметрі үлкен. Бағандар ағын ставкаларын ұлғайту және үлкен үлгілер көлемін ұсынатын үлкен стационарлық фазалық бөлшектермен (әдетте 10-20 мкм) жиналады (әдетте 10-20 мкм). Бұл дизайн кері қысымды азайтуға және қосылыстардың тиімді бөлінуіне қол жеткізуге көмектеседі.
Анықтау әдістері
Дайындық HPLC-де, анықтау әдістері аналитикалық HPLC-де қолданылатындардан өзгеше болуы мүмкін. Дүңгіргіш емес детекторлар әлі де кең таралған кезде, дайындық жүйелері әр түрлі, олар көбінесе эфирге негізделген фракцияларды жинай алатын детекторларды пайдаланады. Бұл белгілі бір қосылыстарды бағаннан күте тұруға мүмкіндік береді.
Хроматография шишаларын қолдану туралы көбірек білгіңіз келсе, осы мақаланы тексеріңіз:HPLC шишаларын тазартудың бес әдісі
Аналитикалық және дайындық және дайындық глоны арасындағы негізгі айырмашылықтар
|
Белгі
|
Аналитикалық HPLC
|
Дайындық HPLC
|
|
Мақсат
|
Сапалы және сандық талдау
|
Қосылыстарды оқшаулау және тазарту
|
|
Жұмыс ауқымы
|
Шағын масштабталған (мкл көлемі)
|
Ірі масштабты (мл-ден l көлеміне дейін)
|
|
Бағанның өлшемдері
|
Кіші диаметрі (4,6 мм)
|
Үлкен диаметрі (20-100 мм)
|
|
Бөлшектердің мөлшері
|
Кішігірім бөлшектер (3-5 мкм)
|
Үлкенірек бөлшектер (10-20 мкм)
|
|
Ағын ставкалары
|
Төмен шығындар жылдамдығы (0,1-5 мл \/ мин)
|
Жоғары ағын ставкалары (10-200 мл \ / мин)
|
|
Анықтау әдістері
|
Бұзбайтын детекторлар (ультракүлгін, мс)
|
Сертификация профиліне негізделген фракция жинау
|
Аналитикалық және дайындық HPLC арасындағы таңдау
Аналитикалық және дайындық HPLC арасында таңдаған кезде келесі факторларды қарастырыңыз:
Талдау мақсаты: негізгі мақсатқа сапалы және сандық түрде қосылыстардың бар-жоғын және қосымша қосылыстарды сандық түрде талдау немесе одан әрі пайдалану үшін оқшаулау керектігін анықтаңыз.
Үлгі мөлшері: Қол жетімді үлгінің мөлшерін бағалаңыз. Егер аз мөлшерде үлгі болса, аналитикалық HPLC неғұрлым орынды болуы мүмкін. Керісінше, егер үлкен көлемде үлгі қажет болса, дайындық HPLC - бұл жақсы таңдау.
Қажетті тазалық пен кірістілік: қажетті тазалық пен мақсатты қосылыстың пайда болуын қарастырыңыз. Дайын HPLC нақты қосылыстың қалпына келуін барынша арттыруға бағытталған, ал аналитикалық HPLC үлгі құрамы туралы егжей-тегжейлі ақпарат беруге бағытталған.
Ресурстар мен жабдықтар: қолда бар ресурстарды, соның ішінде жабдықтар мен бюджетті бағалау. Жазықпалық HPLC жүйелері қымбатырақ және жабдықтар мен операциялық шығындарға көбірек инвестиция салуды талап етеді.
HPLC үлгісін дайындауға қызығушылық танытады ма? Осы мақаланы қараңыз:Жақсы нәтижеге қол жеткізу үшін HPLC үлгісін дайындау шешімдері.
Қорытынды
Аналитикалық және дайындық HPLC хроматография саласындағы құнды әдістер болып табылады, олардың әрқайсысы зерттеушілер мен өнеркәсіптің қажеттіліктеріне байланысты әр түрлі қолданады. Аналитикалық HPLC қосылыстарды егжей-тегжейлі талдау және сандық талдау үшін өте ыңғайлы, өйткені HPLC алдын-ала қолданбалы қосылыстарды оқшаулау және тазарту үшін қажет. Осы екі техниканың арасындағы айырмашылықтарды түсіну зерттеушілерге ақпараттандырылған шешімдер қабылдауға, жұмыс ағындарын оңтайландыруға, олардың талдауларына дәл және сенімді нәтижелерге көмектеседі. HPLC технологиясы алға жылжуда болғандықтан, аналитикалық және дайындық әдістері барлық түрдегі сәтті ғылыми зерттеулердің ажырамас бөлігі болып қала береді.
Ағылшынша
Қытай
