Жоғары сапалы сұйық хроматография (HPLC) және сұйық хроматографиялық-масс-спектрометрия (LCMS) - әртүрлі салаларда, соның ішінде фармацевтика, қоршаған ортаны қорғау және өмір туралы ғылымдарда қолданылатын қуатты аналитикалық әдістер. Екі әдіс екі әдіспен қосылыстарды бөлу және талдау, олардың қағидаттары, функциялары және қосымшалары әр түрлі. Бұл блог посты HPLC және LCMS салыстайды, олардың негізгі айырмашылықтарына және әр техниканың артықшылықтарына назар аударады.

Жұмыс принципі

HPLC

HPLC дегеніміз - қосылыстарды стационарлық және мобильді фазалармен өзара әрекеттесу негізінде бөлетін хроматографиялық әдіс. HPLC-де сұйық мобильді фаза стационарлық кезеңмен толтырылған баған арқылы сорылады, ол әдетте кремний немесе полимерлердің кішкентай бөлшектерінен тұрады. Жүктің қоспасы жүйеге енгізілген кезде, компоненттер олардың стационарлық фаза үшін жақындығына байланысты бөлінеді. Стационарлық фазалық өтемдермен баяу әсер ететін қосылыстар баяу, ал қосылыстар тез арада өзара әрекеттеседі. Бөлінген қосылыстар UV-VOS, флуоресценция немесе сыну индексінің детекторлары сияқты түрлі детекторларды қолдана отырып анықталады.

Хроматография шишаларының қосымшалары туралы көбірек білгіңіз келсе, осы мақаланы қараңыз:Әр түрлі салалардағы хроматография шишаларын қолдану

Лкмалар

LCMS HPLC бөлу мүмкіндіктерін масс-спектрометрияның жаппай талдау мүмкіндіктерімен біріктіреді. LCMS-да үлгілер алдымен HPLC көмегімен, әдеттегі HPLC көмегімен бөлінеді. Алайда, кәдімгі детектор анықталудың орнына, қосылыстар бұқаралық спектрометрге енгізілген. Масс-спектрометр қосылыстарды иондайды және олардың массалық арақатынасымен, анализдің молекулалық салмағы мен құрылымы туралы толық ақпарат бере отырып, олардың массалық қатынасын өлшейді. Бөлу және масс-спектрометрияның бұл комбинациясы HPLC-ден гөрі сезімталдықты және ерекшелікті қамтамасыз етеді.

Бөлу механизмі

HPLC:HPLC сұйық мобильді фазаны стационарлық фаза бар бағанмен итеру үшін жоғары қысымды қолданады. Қосылыстар олардың стационарлық кезеңдерімен дифференциалды өзара әрекеттесуі негізінде бөлінеді, нәтижесінде нақты және тиімді бөліну пайда болады.

LCMS:LCMS HPLC-нің физикалық бөлу мүмкіндіктерін масс-спектрометрияның (MS) масс-спектрометрия мүмкіндіктерімен біріктіреді. Сұйық хроматографиялық компонент қосылыстарды бөледі, ал масс-спектрометр иондалған түрлердің үлес салмағын өлшейді.

Сезімтал және селективтілік

HPLC:HPLC жақсы сезімталдық пен селективтілікке ие, әсіресе UV-VOS, FLOURESTECE немесе диод сияқты кеңейтілген детекторлармен біріктірілген кезде. Алайда, HPLC тек күрделі үлгілер үшін жеткілікті ерекшелік бермеуі мүмкін.

LCMS:LCMS HPLC-мен салыстырғанда жоғары сезімталдық және селективтілікке ие. Масс-спектрометрлер кешенді матрицаларда да, олардың ерекше массалық коэффициенттеріне сүйене отырып, қосылыстарды дәл анықтауға және мөлшерлеуге болады. Бұл LCMS, әсіресе, іздік қосылыстарды талдау және белгісіз заттардың жеке басын растау үшін пайдалы.

Үлгіні дайындау

HPLC:HPLC-ге үлгі дайындау әдетте сұйылту, сүзу немесе қарапайым экстракция әдістерін қамтиды. Үлгілердің булануы қажет емес, сондықтан HPLC көптеген қосылыстарға, соның ішінде полярлы және бекер емес заттарға жарамды.

LCMS:LCMS үлгісін дайындау HPLC үшін ұқсас, бірақ масс-спектрометрмен үйлесімділікті қамтамасыз ету үшін қосымша қадамдар қажет болуы мүмкін. Мысалы, ионизацияны жақсарту және ионның жолын кесу үшін құбылмалы буферлер немесе қоспалар қажет болуы мүмкін.

Қолданбалар

HPLC:HPLC фармацевтикалық препараттарды, тамақ өнімдерін және қоршаған ортаға үлгілерді талдау үшін кеңінен қолданылады. Бұл жексұрын қоспалар, мысалы, есірткі қоспалары, тамақ қоспалары және пестицидтер сияқты күрделі қоспалардағы қосылыстарды бөлу және мөлшерлеу тиімді.

LCMS:LCMS-тің көптеген қосымшалары бар, соның ішінде:

Фармацевтикалық талдау: есірткіні ашу, дамыту және сапаны бақылау кезінде қолданылады.

Протеомика және метаболомдар: биологиялық үлгілерде ақуыздар мен метаболиттерді анықтау және мөлшерлеу үшін қолданылады.

Экологиялық талдау: су, топырақта және ауа сынамаларында микро ластаушы заттарды анықтау үшін қолданылады.

Сертификатталған HPLC шишаларының нақты үлгіні нақты талдау жасаудағы рөлі туралы білгіңіз келе ме? Осы мақаланы оқып шығыңыз: Дәл үлгіні талдау үшін сертификатталған HPLC шишаларының маңыздылығы

Қорытынды

HPLC және LCMS - бұл өз күштері мен шектеулері бар қуатты аналитикалық әдістер. Екеуінің арасындағы таңдау талдаудың нақты талаптарына, мысалы, сезімталдық, селективтілік, іріктеу және қол жетімді ресурстарға байланысты.

HPLC - бұл белгілі бір матрицалардағы белгілі қарапайым матрицалардағы күнделікті талдау үшін жақсы таңдау, онда шығындар мен пайдаланудың жеңілдігі маңызды факторлар болып табылады. LCMS, екінші жағынан, кешенді үлгілерді талдауға, белгісіз қосылыстарды анықтауға және ультра микроэлементтерді анықтауға қол жеткізудің таңдаулы әдісі болып табылады.

Технология алға жылжуда болғандықтан, HPLC және LCMS интеграциясы аналитикалық химияның дамып келе жатқан қажеттіліктерін қанағаттандыруда және әртүрлі қосымшалар бойынша жоғары сапалы нәтижелермен кездесуде маңызды рөл атқарады.

Алдыңғы:

Сіз үшін 0,45 микрон шприц сүзгілеріне арналған соңғы нұсқаулық

Келесі:

Geadspace GC үлгісінің дайындығы туралы білуіңіз керек