គ្រប់គ្រងលំហូរ៖ មគ្គុទ្ទេសក៍អតីតយុទ្ធជនមន្ទីរពិសោធន៍ចំពោះដំណាក់កាល HPLC ទូរស័ព្ទ

សេចក្តីផ្តើម

ខ្ញុំបានទៅកន្លែងដែលអ្នកនៅ — សម្លឹងមើលម៉ូនីទ័រនៅម៉ោង 2 ព្រឹក មើលខ្សែបន្ទាត់មូលដ្ឋានដូចជាទូកដែលបាត់នៅសមុទ្រ ដោយឆ្ងល់ថាតើ "HPLC doo-hickey" ត្រូវបានបង្កើតឡើងដើម្បីសាកល្បងអនាម័យរបស់ខ្ញុំឬអត់។ ប្រសិនបើអ្នកកំពុងមានអារម្មណ៍ធុញថប់ក្នុងការព្យាយាមរុំក្បាលរបស់អ្នកជុំវិញមុខងាររាវ chromatography (HPLC) សូមដកដង្ហើម។ វាមិនមែនគ្រាន់តែជាប្រអប់នៃផ្នែកថ្លៃៗប៉ុណ្ណោះទេ វា​ជា​របាំ​ដ៏​ស្រទន់​រវាង​គីមីវិទ្យា និង​រូបវិទ្យា។

នៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ យើងតែងតែនិយាយថា ដំណាក់កាលចល័ត គឺជា "ខ្សែជីវិត" នៃប្រព័ន្ធ។ បើគ្មានវាទេ គំរូរបស់អ្នកគឺគ្រាន់តែអង្គុយក្នុងម៉ាស៊ីនចាក់ថ្នាំ មិនទៅណាទេ។ ប៉ុន្តែតើអ្នកជ្រើសរើស "រថភ្លើង" ត្រឹមត្រូវដើម្បីដឹកម៉ូលេគុលរបស់អ្នកទៅឧបករណ៍ចាប់ដោយរបៀបណា? ចូរបំបែកវាចុះ ដូចជាយើងកំពុងជជែកគ្នាលើកាហ្វេនៅក្នុងបន្ទប់សម្រាក។

1. តើ HPLC ជាអ្វី?

នៅស្នូលរបស់វា HPLC និយាយអំពីការបំបែក។ គិតថាវាដូចជាការប្រណាំងដែល "បទ" គឺជាដំណាក់កាលស្ថានី (ជួរឈរ) ហើយ "ខ្យល់" ដែលរុញអ្នករត់តាមនោះគឺជាដំណាក់កាលចល័ត hplc ។

វេទមន្តកើតឡើងដោយសារតែម៉ូលេគុលផ្សេងគ្នាមាន "ទំនាក់ទំនង" ផ្សេងគ្នា។ ម៉ូលេគុលមួយចំនួនចូលចិត្តដំណាក់កាលចល័ត ហើយពង្រីកតាមជួរ។ អ្នកផ្សេងទៀតគឺ "ស្អិត" - ពួកគេមានការប៉ះទង្គិចលើដំណាក់កាលស្ថានីហើយយឺតយ៉ាវ។ ភាពខុសគ្នានៃល្បឿននេះគឺជាអ្វីដែលបង្កើតចំណុចកំពូលទាំងនោះនៅលើក្រូម៉ាតូក្រាមរបស់អ្នក។

2. ដំណាក់កាលធម្មតាធៀបនឹងដំណាក់កាលបញ្ច្រាស

ជាធម្មតានេះគឺជាកន្លែងដែលមនុស្សគ្រប់គ្នាចាប់ផ្តើមដកសក់របស់ពួកគេ។ នៅក្នុងការអនុវត្តជាច្រើនឆ្នាំរបស់ខ្ញុំ ខ្ញុំបានរកឃើញវិធីដែលស្រួលបំផុតក្នុងការចងចាំនេះគឺដោយមើលលើបន្ទាត់រាងប៉ូល។

ក. ក្រូម៉ាតូក្រាមដំណាក់កាលធម្មតា។

នេះគឺជាវិធី "សាលាចាស់" ។ នៅក្នុងដំណាក់កាលធម្មតា chromatography ដំណាក់កាលស្ថានីគឺប៉ូល - គិតថាវាដូចជាមេដែកសម្រាប់ម៉ូលេគុលប៉ូល។ ដំណាក់កាលចល័តដែលយើងប្រើនៅទីនេះគឺមិនមានប៉ូល ជាធម្មតាសារធាតុរំលាយដូចជា hexane ឬ heptane ។

• តក្កវិជ្ជា៖ ម៉ូលេគុលប៉ូឡា "ស្អិត" ត្រូវបានទប់ដោយជួរឈរប៉ូល។ ម៉ូលេគុលដែលមិនមានប៉ូលលាងចេញយ៉ាងឆាប់រហ័សជាមួយនឹងដំណាក់កាលចល័តមិនប៉ូល

• គន្លឹះគាំទ្រ៖ ប្រសិនបើអ្នកបង្កើនភាពរាងប៉ូលនៃដំណាក់កាលចល័តរបស់អ្នក (បន្ថែមអ៊ីសូផូផាណុលបន្តិច) គំរូរបស់អ្នកពិតជានឹងផ្លាស់ទីលឿនជាងមុន។

ខ. ក្រូម៉ាតូក្រាមដំណាក់កាលបញ្ច្រាស

សព្វថ្ងៃនេះនេះគឺជាស្តង់ដារមាស។ ប្រហែលជា 90% នៃការងារដែលខ្ញុំធ្វើនៅក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍ពាក់ព័ន្ធនឹងក្រូម៉ាតូក្រាមដំណាក់កាលបញ្ច្រាស។ នៅទីនេះយើងត្រឡប់ស្គ្រីប។ ជួរឈរគឺមិនមានរាងប៉ូល (hydrophobic ដូចជាប្រេង) ហើយដំណាក់កាលចល័តគឺប៉ូល (ជាធម្មតាលាយទឹកនិងមេតាណុលឬអាសេតូនីទ្រីល) ។

• តក្កវិជ្ជា៖ ម៉ូលេគុលដែលស្រលាញ់ទឹក (ប៉ូល) ពង្រីកដោយសារតែពួកគេស្អប់ជួរឈរដែលមានខ្លាញ់។ ម៉ូលេគុលដែលស្រលាញ់ជាតិខ្លាញ់ (មិនរាងប៉ូល) ជាប់នឹងជួរឈរដូចជាកាវ។

• ហេតុអ្វីបានជាយើងស្រលាញ់វា៖ វាអាចព្យាករណ៍បាន មានភាពចម្រុះ និងប្រើប្រាស់សារធាតុរំលាយដែលមានមូលដ្ឋានលើទឹក ដែលងាយស្រួលគ្រប់គ្រង។

3. "ច្បាប់មាស" នៃគុណភាពសារធាតុរំលាយ

អ្នកនឹងឃើញ "HPLC Grade" នៅលើស្លាកសម្រាប់ហេតុផលមួយ។ កុំ​គិត​អំពី​ការ​ប្រើ​ថ្នាក់ ACS ឬ​អ្វី​ដែល​តិច​ជាង។ ហេតុអ្វី? ដោយសារតែភាពមិនបរិសុទ្ធ "តូច" ទាំងនោះនៅក្នុងសារធាតុរំលាយថ្នាក់ទាបនឹងកកកុញនៅលើជួរឈររបស់អ្នកតាមពេលវេលា សម្លាប់ដំណោះស្រាយរបស់អ្នក និងបង្កើតកំពូលខ្មោចចំលែក។

ប្រើទឹកកម្រិត Milli-Q (18.2 MΩ.cm) ជានិច្ច។ ប្រសិនបើទឹករបស់អ្នក "កខ្វក់" បន្ទាត់មូលដ្ឋានរបស់អ្នកនឹងមើលទៅដូចជាជួរភ្នំ ហើយអ្នកនឹងចំណាយពេលបីថ្ងៃដើម្បីស្វែងរកមូលហេតុ។

4. Degassing and Filtration: The Performance Killers

ខ្យល់គឺជាសត្រូវនៃដំណាក់កាលចល័ត hplc ។ នៅក្រោមសម្ពាធធម្មតា ខ្យល់រលាយនៅក្នុងសារធាតុរំលាយរបស់អ្នក។ ប៉ុន្តែនៅពេលដែលសារធាតុរំលាយនោះប៉ះនឹងស្នប់ ពពុះតូចៗទាំងនោះអាចជាប់នៅក្នុងសន្ទះត្រួតពិនិត្យ ឬកោសិកាឧបករណ៍ចាប់។

• លទ្ធផល៖ ភាពប្រែប្រួលនៃអត្រាលំហូរ គំនូសនៃជីពចរ និងពេលវេលារក្សាចលនា។

• ការជួសជុល៖ ប្រើឧបករណ៍បំលែងឧស្ម័នដែលភ្ជាប់មកជាមួយ ឬការបន្សុតសំឡេង\/បូមធូលី ប្រសិនបើអ្នកកំពុងដំណើរការការវិភាគដែលមានភាពប្រែប្រួលខ្ពស់។

ការច្រោះគឺមិនមែនជាជម្រើសទេ។ សូម្បីតែសារធាតុរំលាយថ្នាក់ទី HPLC អាចមានភាគល្អិតមីក្រូទស្សន៍ពីដំណើរការផលិត ឬគម្របដប។ តែងតែត្រងតាមរយៈភ្នាស 0.22µm ឬ 0.45µm មុនពេលវាប៉ះអាងស្តុកទឹក។ វាជាកិច្ចការរយៈពេល 5 នាទីដែលអាចជួយសង្គ្រោះជួរឈររបស់អ្នកពីការស្លាប់មុនអាយុ។

5. Buffers និង អន្ទាក់កញ្ចក់

នៅក្នុងដំណាក់កាលបញ្ច្រាស chromatography យើងប្រើ buffers ដើម្បីរក្សា pH មានស្ថេរភាពសម្រាប់គំរូ ionizable ។

• គន្លឹះជំនួយ៖ ប្រសិនបើអ្នកប្រើសតិបណ្ដោះអាសន្នថ្ងៃនេះ សូមលាងសម្អាតប្រព័ន្ធដោយទឹកសុទ្ធ\/ ល្បាយសរីរាង្គ មុនពេលអ្នកទៅផ្ទះ។ ប្រសិនបើ​អ្នក​មិន​ធ្វើ​ទេ អំបិល​ទាំងនោះ​នឹង​ក្លាយជា​គ្រីស្តាល់ និង​កាត់​ត្រា​ស្នប់​របស់អ្នក។

• អន្ទាក់កញ្ចក់៖ តើអ្នកដឹងទេថាប្រសិនបើ hplc mobile phase pH របស់អ្នកគឺ> 8.0 វាពិតជាអាចបញ្ចេញអ៊ីយ៉ុងដែកចេញពីអាងស្តុកទឹកកញ្ចក់? ប្តូរទៅដែកអ៊ីណុក ឬធុងប្លាស្ទិកពិសេសនៅក្នុងករណីទាំងនេះ។

សូមឱ្យការបំបែករបស់អ្នកល្អឥតខ្ចោះ

ការទទួលបានដំណាក់កាលចល័តត្រឹមត្រូវគឺ 80% នៃការប្រយុទ្ធនៅក្នុង HPLC ។ ប្រសិនបើអ្នកកំពុងតស៊ូជាមួយ "កម្រាលព្រំ" មូលដ្ឋាន សម្ពាធកើនឡើង ឬលទ្ធផលមិនស៊ីសង្វាក់គ្នា កុំចំណាយពេលស្មានថ្ងៃទៀត។

ខ្ញុំបានចំណាយពេលរាប់ពាន់ម៉ោងនៅឯកៅអី ដើម្បីដោះស្រាយបញ្ហាពិតប្រាកដទាំងនេះ។ ខ្ញុំតែងតែរីករាយក្នុងការចែករំលែកនូវដំបូន្មាន "lab-proven" បន្តិចដើម្បីឱ្យគម្រោងរបស់អ្នកដំណើរការឡើងវិញ។

• WhatsApp៖ 86 18338832256

• អ៊ីមែល៖boonemi@aijirenvial.com
  

ឯកសារយោង

• Snyder, L. R., Kirkland, J. J., & Dolan, J. W. (2011) ។ សេចក្តី​ណែនាំ​អំពី​ការ​ក្រូម៉ាត​រាវ​ទំនើប។ ការបោះពុម្ពលើកទី 3 ។ John Wiley & Sons ។ ("ស្តង់ដារមាស" សម្រាប់ការយល់ដឹងអំពីយន្តការបំបែក HPLC)។

• Dolan, J. W. (2002) ។ "ការរៀបចំដំណាក់កាលចល័ត។" LCGC អាមេរិកខាងជើង ស៊េរីដោះស្រាយបញ្ហា។ (មគ្គុទ្ទេសក៍ជាក់ស្តែងសំខាន់ៗសម្រាប់ degassing និង filtration)។

• Aparicio, R. (Ed ។ ) ។ (2013)។ សៀវភៅណែនាំអំពីការបង្កើនប្រសិទ្ធភាព HPLC ។ អេលសេវី។ (ទិន្នន័យ​ទូលំទូលាយ​អំពី​ប៉ូល​សារធាតុ​រំលាយ និង​ការ​ជ្រើសរើស​សតិបណ្ដោះ​អាសន្ន​នៅ​ក្នុង​ក្រូម៉ាតូក្រាម​ដំណាក់កាល​បញ្ច្រាស)។

• បច្ចេកវិទ្យារហ័ស។ "មគ្គុទ្ទេសក៍ដោះស្រាយបញ្ហាប្រព័ន្ធ HPLC៖ ជៀសវាងកំហុសក្នុងដំណាក់កាលចល័តទូទៅ។" បណ្ណាល័យធនធានបច្ចេកទេស។

• សាជីវកម្ម Waters ។ "គោលការណ៍នៃ Chromatography៖ ដំណាក់កាលធម្មតាទល់នឹងដំណាក់កាលបញ្ច្រាស។" ស៊េរីអប់រំ។

• សន្និសីទអន្តរជាតិស្តីពីសុខដុមនីយកម្ម (ICH) ។ សំណួរទី 2(R1) សុពលភាពនៃនីតិវិធីវិភាគ៖ អត្ថបទ និងវិធីសាស្រ្ត។ (ស្តង់ដារសម្រាប់បរិមាណតំបន់កំពូល និងស្ថេរភាពពេលវេលារក្សា)។