HPLC 샘플 준비에 대해 알아야 할 모든 것

샘플 준비는 여러 가지 이유로 HPLC 분석에서 중요한 단계입니다.

간섭 최소화 :샘플은 종종 표적 분석 물의 검출을 방해 할 수있는 불순물 및 매트릭스 성분을 포함합니다. 효과적인 샘플 준비 기술은 이러한 원치 않는 물질을 제거하고 분석 정확도를 향상시키는 데 도움이 될 수 있습니다.

분석 물 회복 개선 :적절한 준비는 분석 물 회복을 향상시키고 결과가 원래 샘플의 실제 농도를 반영하도록합니다. 이것은 분석 물이 저농도로 존재하는 미량 분석에 특히 중요합니다.

강화 된 피크 모양 :적절하게 제조 된 샘플은 크로마토 그램에서 대칭적이고 잘 정의 된 피크를 형성하는 데 도움이됩니다. 이것은 정확한 정량화에 필수적입니다. 부적절한 샘플 준비는 피크 테일링 및 확장을 초래하여 데이터 해석을 복잡하게 만듭니다.

HPLC 시스템 보호 :샘플의 오염 물질은 HPLC 시스템의 열 및 기타 구성 요소를 손상시켜 유지 보수 비용과 다운 타임을 증가시킬 수 있습니다. 적절한 샘플 준비는 시스템 막힘 및 마모의 위험을 줄입니다.

샘플 준비의 첫 번째 단계는 샘플을 올바르게 수집하는 것입니다. 여기에는 다음이 포함됩니다.

깨끗한 용기 사용 :오염을 피하기 위해 항상 깨끗하고 불활성 용기를 사용하십시오. 유리 또는 고품질 플라스틱 용기가 권장됩니다.

오염을 피하십시오 :피지 및 기타 소스의 오염을 방지하기 위해 장갑과 깨끗한 도구를 사용하십시오.

적절한 라벨링 :믹스 업을 피하고 추적 성을 보장하기 위해 샘플에 명확하게 레이블을 지정합니다.

샘플 균질화는 균질성을 보장하며, 이는 재현 가능한 결과에 중요합니다. 균질화 기술에는 다음이 포함됩니다.

기계적 균질화 : 교반기 또는 균질화 제를 사용하여 고체 또는 반고체 샘플을 혼합합니다.

초음파 균질화 :액체 샘플 내에 입자를 분산시키기위한 초음파의 적용.

예상되는 분석 물의 농도에 따라 샘플을 희석하거나 농축해야 할 수도 있습니다. 이것은 다음과 같이 달성 할 수 있습니다.

노동 희석:이동상과 동일한 용매를 사용하여 샘플을 원하는 농도로 희석하십시오.

집중:분석 물은 증발 또는 고체 추출 (SPE)과 같은 기술을 사용하여 집중할 수 있습니다.

여과는 HPLC 컬럼을 막을 수있는 미립자 물질을 제거하는 데 필수적입니다. 일반적인 필터링 방법은 다음과 같습니다.

막 여과 :사용0.2µm 또는 0.45µm 필터입자를 제거합니다. 일반적으로 폴리에 테 설 폰 (PES) 또는 나일론 필터가 사용됩니다.

프리 필트레이션 :입자 함량이 높은 샘플의 경우 더 큰 기공 크기 필터를 통한 프리 필터는 막힘을 방지 할 수 있습니다.


주사기 필터에 대해 자주 묻는 질문 50이 정보 기사를 확인하십시오. "주사기 필터"라는 주제 50 자주 묻는 질문

분석 물의 저하를 방지하기 위해 샘플을 안정화하는 것을 고려하십시오.

pH 조정 :pH를 조정하면 특정 분석 물을 안정화시키는 데 도움이 될 수 있습니다. 예를 들어, 산성 화합물은 분해를 방지하기 위해 산성화가 필요할 수 있습니다.

첨가제 :안정제 또는 방부제를 추가하면 저장 및 분석 중에 샘플 무결성을 유지하는 데 도움이 될 수 있습니다.

샘플을 녹이고 HPLC 시스템과의 호환성을 보장하기 위해 올바른 용매를 선택하는 것이 중요합니다. 다음을 고려하십시오.

솔벤트 극성 :완전한 용해를 달성하려면 용매는 분석 물의 극성과 일치해야합니다.

이동 상 호환성 : 잠재적 간섭을 최소화하기 위해 이동상과 호환되는 용매를 사용하십시오.

7. 표준 준비

샘플에서 분석 물을 정량화하려면 교정 표준의 준비가 필수적입니다. 여기에는 다음이 포함됩니다.

교정 곡선 준비 :정량화를위한 ​​교정 곡선을 확립하기 위해 일련의 알려진 농도의 분석 물을 준비하십시오.

동일한 용매를 사용하십시오.일관성을 유지하려면 항상 샘플과 동일한 용매 및 조건을 사용하여 표준을 준비하십시오.

표준 운영 절차 (SOPS) 다음 :일관성과 재현성을 보장하기 위해 샘플 준비를 위해 SOPS를 설정하고 준수하십시오.

고품질 시약 및 용매를 사용하십시오.오염을 최소화하기 위해 항상 HPLC 등급 용매 및 고급 시약을 사용하십시오.

작업 공간을 깨끗하게 유지하십시오.오염 위험을 줄이기 위해 샘플 준비 영역을 깨끗하게 유지하고 구성하십시오.

모든 문서 :표준 프로토콜과의 편차를 포함하여 샘플 준비 절차에 대한 자세한 기록을 유지하십시오.

방법 검증 방법 :신뢰할 수 있고 재현 가능한 결과를 제공하기 위해 샘플 준비 방법을 정기적으로 검증하십시오.

불량한 피크 모양 :피크가 넓거나 꼬리 인 경우, 이것은 불완전한 용해 또는 미립자의 존재를 나타낼 수 있습니다. 샘플이 철저히 혼합되어 필터링되었는지 확인하십시오.

고스트 피크 :고스트 피크는 용매 또는 샘플의 불순물로 인해 발생할 수 있으며 고급 용매를 사용하며 모든 유리 제품과 장비가 깨끗해야합니다.

낮은 감도 :감도가 낮 으면 추출 방법을 최적화하거나 분석 물의 농도를 늘리는 것을 고려하십시오.

열 막힘 :빈번한 막힘은 샘플에 너무 많은 미립자가 포함되어 있거나 적절하게 필터링되지 않음을 나타낼 수 있습니다. 여과 과정을 다시 평가하고 사전 여과를 고려하십시오.

일관성없는 결과 :결과의 변화는 일관되지 않은 샘플 준비에서 비롯 될 수 있습니다. 모든 절차를 표준화하고 샘플 준비에 관련된 인력이 제대로 교육되도록하십시오.

분석 요구가 증가함에 따라 실험실은 효율성과 정확도를 향상시키기 위해보다 고급 샘플 준비 기술을 채택하고 있습니다.

SPE는 복잡한 행렬에서 분석 물을 선택적으로 추출 할 수있는 널리 사용되는 기술입니다. 여기에는 타겟 분석 물을 유지하면서 불순물을 통과 할 수있는 고체 흡착제 재료를 통해 액체 샘플을 전달하는 것이 포함됩니다.

LLE는 2 개의 비연한 액체에서의 용해도를 기반으로 분석 물을 분리하는 기술입니다. 이 방법은 극성이 다른 화합물을 분리하는 데 효과적이며 종종 환경 및 제약 분석에 사용됩니다.

Quechers는 추출 및 정화 단계를 하나의 프로세스로 결합하여 식품 및 환경 샘플을 준비하는 데 인기있는 방법으로 효율적이고 비용 효율적입니다.

자동화 된 샘플 준비 시스템에 의해 처리량 및 재현성을 크게 향상시킬 수 있으며, 이는 최소한의 인간 개입으로 희석, 여과 및 SPE와 같은 작업을 수행하여 오류의 위험을 줄일 수 있습니다.


HPLC 샘플 준비에 대한 자세한 내용을 알고 싶으시면이 기사를 확인하십시오. 최상의 결과를위한 HPLC 샘플 준비 솔루션

HPLC 샘플 준비는 분석 결과의 정확성과 신뢰성에 크게 영향을 줄 수있는 중요한 단계입니다. 모범 사례, 적절한 기술을 사용하고 일반적인 문제를 해결함으로써 실험실은 분석 요구가 발전함에 따라 고급 기술과 기술을 채택하여 샘플 준비 프로세스를 최적화 할 수 있습니다. 자동화는 HPLC 분석의 효율성과 효과를 더욱 향상시킬 것입니다. 적절한 샘플 준비는 결과의 품질을 향상시킬뿐만 아니라 HPLC 시스템을 보호하여 장기 신뢰성과 성능을 보장합니다.