Жогорку деңгээлдеги суюктук хроматография (HPLC) - фармацевтика, экологиялык илимдер жана азык-түлүк коопсуздугу боюнча ар кандай спектаклерде колдонулган лабораторияларда колдонулган негизги аналитикалык ыкма. HPLC дүйнө жүзүндө эки негизги категориясы бар: аналитикалык HPLC жана даярдык HPLC. Эки ыкма тең бирдей принциптерди өзүнчө бириктирүү үчүн колдонушат, алар ар кандай максатта колдонулат жана ар кандай операциялык параметрлерге ээ болушат. Бул блог аналитикалык жана даярдык HPLC, анын ичинде алардын максаты, иштөө, жабдуулардын, жабдууларды жана арыздардын өлчөмү ортосундагы айырмачылыктарды изилдей алат.
HPLC шишелерине толук маалымат алгыңыз келсе, бул макаланы текшериңиз: HPLC шишелеринин энциклопедиясы
Аналитикалык HPLCти түшүнүү
Аныктамасы жана максат
Аналитикалык HPLC, негизинен, үлгүдөгү кошулмаларды бөлүп-бөлүп, аныктоого багытталган. Негизги максат - аралашмада тартылган компоненттер жөнүндө сапаттык жана сандык маалымат алуу. Аналитикалык HPLC көбүнчө төмөнкүлөр үчүн колдонулат:
Сапаттуу анализ: үлгүнүн компоненттерин аныктоо.
Сандык анализ: Белгилүү бир кошулма концентрациясын тандоо.
Иштөө шкаласы
Аналитикалык HPLC, адатта, микрологиялык үлгүдөгү инъекцияларга катышуу менен, кичинекей масштабда иштейт. Колдонулган томдор жалпысынан 1ден 100гө жакын / 100дөн 100гө чейин бир нече үлгүлөрдү талдоого мүмкүнчүлүк берет. Бул чакан масштаб режим күнүмдүк сыноо жана сапатты контролдоо үчүн идеалдуу.
Мамычанын көлөмү жана бөлүкчөлөрдүн өлчөмү
Аналитикалык HPLCде колдонулган графалар, адатта, диаметри 4,6 мм болжол менен 4,6 мм жана чакан стационардык фаза бөлүкчөлөрү (3-5 мам). Бул конфигурация жогорку резолюцияны жана натыйжалуу компокалдык бөлүнүүнү талап кылат, деталдуу анализге ылайыктуу.
Аныктоо ыкмалары
Аналитикалык HPLC, анын ичинде UV көрүнгөн, флуоресценцияны жана массалык спектрометрияны кошо алганда, ар кандай аныктоочу ыкмаларды колдонот. Детекторду тандоо аналитиканын мүнөзүнө жана анализдин конкреттүү талаптарына жараша болот. Кыйратуучу эмес детекторлор көп учурда үлгүлөрдү олуттуу жоготпостон анализдеп жаткандыгын камсыз кылуу үчүн колдонулат.
HPLC шишелерине 50 жоопту билгиңиз келсе, бул макаланы текшериңиз: HPLC шишээри боюнча 50 эң көп берилүүчү суроолор
Алдын ала даярдануу HPLC
Аныктамасы жана максат
Ал эми даярдалган HPLC, экинчи жагынан, аралашмадан айрым кошулмаларды бөлүп-бөлүп, тазалоону көздөйт. Негизги максат - бул максаттуу кошулманын андан ары талдоо же пайдалануу үчүн жетиштүү көлөмүн обочолонот. Даярдануу
HPLC көбүнчө төмөнкү тиркемелер үчүн колдонулат:
Кошулуучу изоляциялоо: изилдөө же өнөр жай үчүн конкреттүү кошулмаларды алуу жана тазалоо.
Үлгүлүү даярдоо: Кийинки талдоо же формуланы түзүү үчүн үлгүлөрдү даярдоо.
Операциялардын шкаласы
Деп даярдык HPLC аналитикалык HPLC караганда чоңураак масштабда жүргүзүлөт. Үлгү көлөмү максаттуу кошулманын күтүлгөн кирешелүүлүгүнө жараша бир нече литрге бир нече литрге чейин жетиши мүмкүн. Бул чоң масштабда кошумча колдонуу үчүн чогултула турган жетиштүү көлөмдөгү сансыз көлөмдө жетиштүү көлөмдө болот.
Мамычанын көлөмү жана бөлүкчөлөрдүн өлчөмү
Түзүлгөн HPLC үчүн колдонулган мамылар, адатта, болжол менен 20 мм 100 мм же диаметри чоңураак. Тилкендер агымдарды көбөйтүү үчүн чоң стационардык фаза бөлүкчөлөрү (адатта 10-20 м / жыл) чоңураак үнөмдөөнү жайгаштырат. Бул дизайн артка басымын азайтууга жана кошулмалардын натыйжалуу бөлүнүүнү жетүүгө жардам берет.
Аныктоо ыкмалары
Алдын-ала даярдалган HPLC, аныктоочу ыкмалар аналитикалык HPLCде колдонулгандардан айырмаланышы мүмкүн. Кыйралсыз детекторлор дагы эле кездешкенде, даярдалган, даярдык тутумдар көбүнчө эл үчүн фракцияларды чогултууга жөндөмдүү детекторлорду колдонушат. Бул конкреттүү кошулмалардын колоннасынан оутлюттан бөлүп алууну мүмкүндүк берет.
Хроматография шалбааларынын колдонулушу жөнүндө көбүрөөк билгиңиз келсе, бул макаланы текшериңиз:HPLC шишелеринин беш тазалоо ыкмасы
Аналитикалык жана даярдык HPLC ортосундагы негизги айырмачылыктар
|
Өзгөчөлүк
|
Аналитикалык HPLC
|
Түзүлгөн HPLC
|
|
Максат
|
Сапаттык жана сандык анализ
|
Тазалуулукту изоляциялоо жана тазалоо
|
|
Иштөө шкаласы
|
Кичинекей масштабдуу (μl көлөмү)
|
Чоң масштабдуу (ML TO LOLMEMES)
|
|
Мамычанын өлчөмдөрү
|
Кичинекей диаметри (4.6 мм)
|
Чоң диаметри (20-100 мм)
|
|
Бөлүкчөлөрдүн өлчөмү
|
Кичинекей бөлүкчөлөр (3-5 мам)
|
Чоң бөлүкчөлөр (10-20 μm)
|
|
Агым чендери
|
Агымдардын төмөн деңгээли (0,1-5 мл \ / мин)
|
Жогорку агымдардын жогорку деңгээли (10-200 мл \ / мин)
|
|
Аныктоо ыкмалары
|
Деструктура эмес детекторлор (UV, MS)
|
Элут профилине негизделген бөлчөк жыйнагы
|
Аналитикалык жана даярдык HPLC ортосунда тандоо
Аналитикалык жана даярдык HPLC тандап жатканда төмөнкү факторлорду карап чыгыңыз:
Анализдин максаты: Негизги максат - сапаттуу жана сандык кошулгандыгы үчүн, андан ары колдонуу үчүн конкреттүү кошулмаларды изилдеп алыңыз.
Үлгү суммасы: Мүмкүн болгон үлгүлөрдүн суммасын баалаңыз. Эгерде аз гана сумма бар болсо, аналитикалык HPLC көбүрөөк ылайыктуу болушу мүмкүн. Тескерисинче, эгерде чоң сумма талап кылынса, даярдык HPLC - бул мыкты тандоо.
Керектүү тазалыкты жана түшүмдүүлүк: Максаттуу кошулмадан талап кылынган тазалыкты жана кирешелүүлүктү карап көрөлү. Деп даярдык HPLC конкреттүү кошулманы калыбына келтирүүнү максималдуу түрдө максималдаштырууну максат кылууга багытталган, ал эми аналитикалык HPLC тандалма курамы жөнүндө кеңири маалымат берүү жөнүндө кененирээк маалымат берилет.
Ресурстар жана жабдуулар: Колдо болгон ресурстарды, анын ичинде жабдууларды жана бюджетти баалаңыз. Түзүлгөн HPLC тутумдары жабдууларды жана иштөө чыгымдарына көбүрөөк инвестиция талап кылынат.
HPLC үлгүсүн даярдоону өздөштүрүүгө кызыкдарсызбы? Бул макаланы карап көрүңүз:Мыкты натыйжалар үчүн HPLC үлгүсүн даярдоо чечимдери.
Корутунду
Аналитикалык жана даярдык HPLC - хроматография жаатындагы баалуу ыкмалар жана ар бири изилдөөчүлөрдүн жана өнөр жайдын муктаждыктарына жараша ар кандай колдонууга болот. Аналитикалык HPLC кошулманын деталдуу талдоосу жана көлөмүн саноо үчүн идеалдуу, ал эми даярдануу үчүн даярдык көрүү үчүн даярдык көрүү үчүн талап кылынган кошулмаларды издөө жана тазалоо үчүн маанилүү. Ушул эки ыккананын ортосундагы айырмачылыктарды түшүнүү изилдөөчүлөргө маалыматтуу чечимдерди кабыл алууга, алардын иш-аракеттерин оптималдаштырууга жана алардын анализдерин так жана ишенимдүү жана ишенимдүү алып келүүгө жардам берет. HPLC технологиясы, аналитикалык жана даярдоо ыкмаларын өркүндөтүү улантылса, бардык түрлөрүн ийгиликтүү илимий изилдөө иштеринин ажырагыс бөлүгү бойдон калууда.
Англисче
Кытайча
