Chromatography ແຫຼວທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງ ເຖິງຢ່າງໃດກໍ່ຕາມ, ຄວາມສໍາເລັດຂອງການວິເຄາະ HPLC ແມ່ນຂື້ນກັບຄຸນນະພາບຂອງການກະກຽມຕົວຢ່າງ. ການກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ເຫມາະສົມຮັບປະກັນປະລິມານທີ່ຖືກຕ້ອງຂອງການວິເຄາະເປົ້າຫມາຍແລະຫຼຸດຜ່ອນການແຊກແຊງ. ຄໍາແນະນໍາທີ່ສົມບູນແບບນີ້ມີຫຼາຍຢ່າງທີ່ທ່ານຕ້ອງຮູ້ກ່ຽວກັບການກະກຽມຕົວຢ່າງ HPLC, ລວມທັງຄວາມສໍາຄັນ, ການປະຕິບັດທີ່ດີທີ່ສຸດ, ແລະຄໍາແນະນໍາທີ່ດີທີ່ສຸດ.
ຕ້ອງການຢາກຮູ້ເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບການນໍາໃຊ້ vials chromatography, ກະລຸນາກວດເບິ່ງບົດຄວາມນີ້: 15 ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກຂອງ vials chromatography ໃນຂົງເຂດທີ່ແຕກຕ່າງກັນ
ຄວາມສໍາຄັນຂອງການກະກຽມຕົວຢ່າງໃນ HPLC
ການກະກຽມຕົວຢ່າງແມ່ນບາດກ້າວທີ່ສໍາຄັນໃນການວິເຄາະ HPLC ສໍາລັບຫຼາຍໆເຫດຜົນ.
ຫຼຸດຜ່ອນການແຊກແຊງໃຫ້ຫນ້ອຍທີ່ສຸດ:ຕົວຢ່າງມັກຈະມີສ່ວນປະກອບທີ່ບໍ່ສະອາດແລະອົງປະກອບມາຕຣິກເບື້ອງທີ່ສາມາດແຊກແຊງການກວດພົບການວິເຄາະເປົ້າຫມາຍ. ເຕັກນິກການກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ມີປະສິດຕິຜົນສາມາດຊ່ວຍກໍາຈັດສານທີ່ບໍ່ຕ້ອງການເຫລົ່ານີ້ແລະປັບປຸງຄວາມຖືກຕ້ອງຂອງການວິເຄາະ.
ປັບປຸງການຟື້ນຟູການວິເຄາະ:ການກະກຽມທີ່ເຫມາະສົມປັບປຸງການຟື້ນຟູການວິເຄາະແລະຮັບປະກັນວ່າຜົນໄດ້ຮັບສະທ້ອນໃຫ້ເຫັນເຖິງຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງຕົວຢ່າງຕົ້ນສະບັບ. ນີ້ແມ່ນສິ່ງທີ່ສໍາຄັນເປັນພິເສດສໍາລັບການວິເຄາະຮ່ອງຮອຍທີ່ນັກວິເຄາະມີຢູ່ໃນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຕໍ່າ.
ການປັບປຸງຮູບຮ່າງສູງສຸດ:ຊ່ວຍໃຫ້ມີການກະກຽມຢ່າງຖືກຕ້ອງຊ່ວຍໃຫ້ມີການປະສົມປະສານກັບຈຸດສູງສຸດທີ່ຖືກກໍານົດແລະກໍານົດໄວ້ໃນ chromatogram. ນີ້ແມ່ນສິ່ງທີ່ຈໍາເປັນສໍາລັບການປະລິມານທີ່ຖືກຕ້ອງ. ການກະກຽມຕົວເອງທີ່ບໍ່ເຫມາະສົມສາມາດເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມຜິດພາດແລະເປີດກວ້າງ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ມີຄວາມສັບສົນໃນການຕີຄວາມຫມາຍ.
ປົກປ້ອງລະບົບ HPLC ຂອງທ່ານ:ສິ່ງປົນເປື້ອນໃນຕົວຢ່າງຂອງທ່ານສາມາດທໍາລາຍຖັນແລະສ່ວນປະກອບອື່ນໆໃນລະບົບ HPLL ຂອງທ່ານ, ເຮັດໃຫ້ຄ່າໃຊ້ຈ່າຍໃນການບໍາລຸງຮັກສາແລະເວລາທີ່ດີຂື້ນ. ການກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ເຫມາະສົມຊ່ວຍຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງຕໍ່ການອຸດຕັນແລະສວມໃສ່.
ຂັ້ນຕອນສໍາຄັນໃນການກະກຽມຕົວຢ່າງ HPLC
1. ການເກັບຕົວຢ່າງ
ຂັ້ນຕອນທໍາອິດໃນການກະກຽມຕົວຢ່າງແມ່ນການເກັບກໍາຕົວຢ່າງຂອງທ່ານໃຫ້ຖືກຕ້ອງ. ນີ້ປະກອບມີ:
ໃຊ້ພາຊະນະທີ່ສະອາດ:ສະເຫມີໃຊ້ຖັງບັນຈຸທີ່ສະອາດ, inert ເພື່ອຫລີກລ້ຽງການປົນເປື້ອນ. ເຄື່ອງບັນຈຸຢາງພາດສະຕິກທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງຫຼືມີຄຸນນະພາບສູງ.
ຫລີກລ້ຽງການປົນເປື້ອນ:ໃຊ້ຖົງມືແລະເຄື່ອງມືທີ່ສະອາດເພື່ອປ້ອງກັນການປົນເປື້ອນຈາກ sebum ແລະແຫຼ່ງອື່ນໆ.
ປ້າຍທີ່ເຫມາະສົມ:ຫມາຍຈໍາຫນ່າຍຕົວຢ່າງຢ່າງຈະແຈ້ງເພື່ອຫລີກລ້ຽງການປະສົມແລະຮັບປະກັນການຕິດຕາມ.
2. ການ homogeneous ຕົວຢ່າງ
ການ homogeneous ຕົວຢ່າງຮັບປະກັນຄວາມເປັນເອກະພາບ, ເຊິ່ງເປັນສິ່ງສໍາຄັນສໍາລັບຜົນໄດ້ຮັບທີ່ສາມາດແຜ່ພັນໄດ້. ເຕັກນິກການລັກເງິນປະກອບມີ:
homogenization ກົນຈັກ: ການປະສົມຕົວຢ່າງທີ່ແຂງຫຼືເຄິ່ງແຂງໂດຍໃຊ້ເຄື່ອງປັ່ນປ່ວນຫຼື homogenizer.
homogeneization ultrasonic:ການນໍາໃຊ້ ultrasound ເພື່ອກະແຈກກະຈາຍອະນຸພາກພາຍໃນຕົວຢ່າງຂອງແຫຼວ.
3. ການລະລາຍຫຼືຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ
ອີງຕາມການສຸມໃສ່ການວິເຄາະຂອງຄາດຄະເນ, ຕົວຢ່າງອາດຈະຈໍາເປັນຕ້ອງໄດ້ເຈືອຈາງຫຼືເຂັ້ມຂຸ້ນ. ນີ້ສາມາດບັນລຸໄດ້ໂດຍ:
ການລະລາຍ:ເຈືອຈາງຕົວຢ່າງໃຫ້ກັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ຕ້ອງການໂດຍໃຊ້ຕົວລະລາຍດຽວກັນກັບໄລຍະມືຖື.
ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ:ການວິເຄາະສາມາດສຸມໃສ່ການໃຊ້ເຕັກນິກຕ່າງໆເຊັ່ນ: ການລະເຫີຍຫຼືການສະກັດເອົາໄລຍະທີ່ແຂງແກ່ນຫຼືໄລຍະ).
4. ການກັ່ນຕອງ
ການກັ່ນຕອງແມ່ນສິ່ງທີ່ຈໍາເປັນໃນການກໍາຈັດບັນຫາທີ່ສາມາດເອົາບັນຫາທີ່ສາມາດອຸດຕັນຖັນ hplc. ວິທີການກັ່ນຕອງທົ່ວໄປປະກອບມີ:
ການກັ່ນຕອງ Membrane:ໃຊ້0.4μmຫຼື0.45μmການກັ່ນຕອງເພື່ອກໍາຈັດອະນຸພາກ. ໂດຍປົກກະຕິ polyethersulfone (pes) ຫຼື Nylon Filters ແມ່ນໃຊ້.
Prefilt:ສໍາລັບຕົວຢ່າງທີ່ມີເນື້ອໃນຂອງພາກສ່ວນທີ່ສູງ, prefiltration ໂດຍຜ່ານການກັ່ນຕອງຂະຫນາດ Pore ທີ່ໃຫຍ່ກວ່າສາມາດປ້ອງກັນການອຸດຕັນ.
50 ຄໍາຖາມທີ່ຖາມເລື້ອຍໆກ່ຽວກັບການກັ່ນຕອງ syringe, ໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າຈະກວດເບິ່ງບົດຄວາມທີ່ມີຂໍ້ມູນນີ້: ຫົວຂໍ້ຂອງ "ການກັ່ນຕອງ syringe" 50 ຄໍາຖາມທີ່ຖາມເລື້ອຍໆ
5. ສະຖຽນລະພາບຕົວຢ່າງ
ພິຈາລະນາສະຖຽນລະພາບຂອງຕົວຢ່າງຂອງທ່ານເພື່ອປ້ອງກັນການເຊື່ອມໂຊມຂອງການວິເຄາະ.
ການດັດປັບ PH:ການປັບ pH ສາມາດຊ່ວຍສະຖຽນລະພາບໃນການວິເຄາະບາງຢ່າງ. ຍົກຕົວຢ່າງ, ທາດປະສົມກົດອາດຈະຕ້ອງມີການລ້າງເພື່ອປ້ອງກັນການເຊື່ອມໂຊມ.
ສິ່ງເສບຕິດ:ການເພີ່ມສະຖຽນລະພາບຫຼືການຮັກສາໄວ້ສາມາດຊ່ວຍຮັກສາຄວາມຊື່ສັດຕົວໃນລະຫວ່າງການເກັບຮັກສາແລະການວິເຄາະ.
6. ການຄັດເລືອກລະລາຍ
ມັນເປັນສິ່ງສໍາຄັນທີ່ຈະເລືອກຕົວລະລາຍທີ່ຖືກຕ້ອງເພື່ອລະລາຍຕົວຢ່າງຂອງທ່ານແລະຮັບປະກັນຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ກັບລະບົບ HPLC ຂອງທ່ານ. ພິຈາລະນາສິ່ງຕໍ່ໄປນີ້:
Polarity Solvent:ເພື່ອບັນລຸການລະລາຍທີ່ສົມບູນ, ສານລະລາຍຕ້ອງກົງກັບຄວາມໂປ່ງໃສຂອງການວິເຄາະ.
ຄວາມເຂົ້າກັນໄດ້ຂອງໄລຍະ Mobile: ໃຊ້ສານລະລາຍທີ່ເຫມາະສົມກັບໄລຍະມືຖືເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການແຊກແຊງທີ່ອາດເກີດຂື້ນ.
7. ການກະກຽມມາດຕະຖານ
ການກະກຽມມາດຕະຖານການສອບທຽບແມ່ນມີຄວາມຈໍາເປັນເພື່ອໃຫ້ການວິເຄາະດ້ານການວິເຄາະໃນຕົວຢ່າງ. ນີ້ປະກອບມີ:
ການກະກຽມໂຄ້ງການສອບທຽບ:ການກະກຽມຊຸດຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການວິເຄາະທີ່ຮູ້ຈັກໃນຊຸດຂອງການວິເຄາະເພື່ອສ້າງເສັ້ນໂຄ້ງການວັດແທກສໍາລັບປະລິມານ.
ໃຊ້ສານລະລາຍຄືກັນ:ເພື່ອຮັກສາຄວາມສອດຄ່ອງ, ກະກຽມມາດຕະຖານຂອງທ່ານສະເຫມີໂດຍໃຊ້ເງື່ອນໄຂແລະສະພາບການດຽວກັນກັບຕົວຢ່າງຂອງທ່ານ.
ການປະຕິບັດທີ່ດີທີ່ສຸດສໍາລັບການກະກຽມຕົວຢ່າງ HPLC
ປະຕິບັດຕາມຂັ້ນຕອນການປະຕິບັດງານມາດຕະຖານ (Sops):ສ້າງຕັ້ງແລະຍຶດຫມັ້ນກັບ Sops ສໍາລັບການກະກຽມຕົວຢ່າງເພື່ອຮັບປະກັນຄວາມສອດຄ່ອງແລະການສືບພັນ.
ໃຊ້ reagents ທີ່ມີຄຸນນະພາບສູງແລະສານລະລາຍ:ສະເຫມີໃຊ້ສະຖານທີ່ກ່ຽວກັບລະດັບປະລິນຍາຕີ HPLC-Grade ແລະ reagents ທີ່ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນການປົນເປື້ອນ.
ຮັກສາພື້ນທີ່ເຮັດວຽກຂອງທ່ານໃຫ້ສະອາດ:ຮັກສາພື້ນທີ່ກະກຽມຕົວຢ່າງຂອງທ່ານໃຫ້ສະອາດແລະຈັດແຈງເພື່ອຫຼຸດຜ່ອນຄວາມສ່ຽງຂອງການປົນເປື້ອນ.
ເອກະສານທຸກຢ່າງ:ຮັກສາບັນທຶກລາຍລະອຽດຂອງຂັ້ນຕອນການກະກຽມຕົວຢ່າງຂອງທ່ານ, ລວມທັງຄວາມແຕກຕ່າງຈາກໂປໂຕຄອນມາດຕະຖານ.
validate ວິທີການ:validate ວິທີການກະກຽມຕົວຢ່າງເປັນປະຈໍາເພື່ອຮັບປະກັນວ່າພວກເຂົາໃຫ້ຜົນທີ່ເຊື່ອຖືໄດ້ແລະສາມາດແຜ່ພັນໄດ້.
ການແກ້ໄຂບັນຫາບັນຫາການກະກຽມແບບທໍາມະດາຕົວຢ່າງ
ຮູບຮ່າງທີ່ບໍ່ດີ:ຖ້າສູງສຸດແມ່ນກ້ວາງຫຼືຫາງ, ສິ່ງນີ້ອາດຈະສະແດງໃຫ້ເຫັນຄວາມລະອຽດທີ່ບໍ່ຄົບຖ້ວນຫຼືການມີສ່ວນຂອງອະນຸພາກ. ຮັບປະກັນວ່າຕົວຢ່າງຂອງທ່ານປະສົມຢ່າງລະອຽດແລະກັ່ນຕອງ.
ຈຸດສູງສຸດ Ghost:ຈຸດສູງສຸດຜີອາດຈະເກີດມາຈາກຄວາມບໍ່ສະອາດໃນສານລະລາຍຫຼືຕົວຢ່າງ, ໃຫ້ໃຊ້ສານສະອາດທີ່ມີຄວາມບໍລິສຸດສູງແລະຮັບປະກັນວ່າເຄື່ອງແກ້ວແລະອຸປະກອນຕ່າງໆແມ່ນສະອາດ.
ຄວາມອ່ອນໄຫວຕ່ໍາ:ຖ້າຄວາມອ່ອນໄຫວຕໍ່າ, ພິຈາລະນາເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງທ່ານວິທີການສະກັດເອົາຫຼືເພີ່ມຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງການວິເຄາະຂອງທ່ານ.
ການອຸດຕັນຖັນ:ການອຸດຕັນເລື້ອຍໆອາດຈະຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າຕົວຢ່າງຂອງທ່ານມີສ່ວນຫຼາຍເກີນໄປຫຼືບໍ່ໄດ້ຖືກກັ່ນຕອງໃຫ້ພໍສົມຄວນ. ປະເມີນຂັ້ນຕອນການກັ່ນຕອງຂອງທ່ານຄືນໃຫມ່ແລະພິຈາລະນາການສະຫນັບສະຫນູນກ່ອນ.
ຜົນໄດ້ຮັບທີ່ບໍ່ສອດຄ່ອງ:ການປ່ຽນແປງຂອງຜົນໄດ້ຮັບສາມາດເກີດຈາກການກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ບໍ່ສອດຄ່ອງ. ໄດ້ມາດຕະຖານທັງຫມົດແລະຮັບປະກັນວ່າບຸກຄະລາກອນທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການກະກຽມຕົວຢ່າງແມ່ນໄດ້ຮັບການຝຶກອົບຮົມຢ່າງຖືກຕ້ອງ.
ເຕັກນິກການກະກຽມແບບພິເສດ
ໃນຖານະເປັນການເພີ່ມຂື້ນຂອງການວິເຄາະ, ຫ້ອງທົດລອງແມ່ນຮັບຮອງເອົາເຕັກນິກການກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ກ້າວຫນ້າໃຫ້ແກ່ປັບປຸງປະສິດທິພາບແລະຄວາມຖືກຕ້ອງ:
1. ການສະກັດເອົາໄລຍະແຂງ (spe)
SEP ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ນໍາໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງເຊິ່ງຊ່ວຍໃຫ້ການຂຸດຄົ້ນທີ່ເລືອກຂອງການວິເຄາະຈາກການວິເຄາະທີ່ສັບສົນ. ມັນກ່ຽວຂ້ອງກັບການຖ່າຍທອດຕົວຢ່າງຂອງແຫຼວຜ່ານອຸປະກອນການໂຄສະນາທີ່ແຂງເຊິ່ງຮັກສາການວິເຄາະເປົ້າຫມາຍໃນຂະນະທີ່ຈະບໍ່ມີຄວາມບໍ່ສະອາດຈະຜ່ານ.
2. ການສະກັດນ້ໍາແຫຼວ - ແຫຼວ (LLE)
LLE ແມ່ນເຕັກນິກທີ່ແຍກອອກຈາກການວິເຄາະໂດຍອີງໃສ່ການລະລາຍຂອງພວກເຂົາໃນສອງຂອງແຫຼວທີ່ບໍ່ອາດປ່ຽນແປງໄດ້. ວິທີການນີ້ມີປະສິດທິຜົນໃນການແຍກທາດປະສົມທີ່ມີຄວາມກະຕັນຍູແລະມີການວິເຄາະສິ່ງແວດລ້ອມແລະຢາ.
3. quechers (ໄວ, ງ່າຍດາຍ, ລາຄາຖືກ, ມີປະສິດຕິຜົນ, rugged ແລະປອດໄພ)
Lecookers ແມ່ນວິທີການທີ່ນິຍົມໃນການກະກຽມຕົວຢ່າງອາຫານແລະສິ່ງແວດລ້ອມ
4. ອັດຕະໂນມັດ
ການປ້ອນຂໍ້ມູນແລະການຈະເລີນພັນສາມາດໄດ້ຮັບການປັບປຸງທີ່ຖືກປັບປຸງຢ່າງຫຼວງຫຼາຍໂດຍລະບົບການກະກຽມແບບອັດຕະໂນມັດ, ເຊິ່ງສາມາດປະຕິບັດວຽກງານໄດ້, ແລະມີການແຊກແຊງຂອງມະນຸດ, ເຮັດໃຫ້ເກີດຄວາມສ່ຽງຂອງຄວາມຜິດພາດ.
ຕ້ອງການຢາກຮູ້ເພີ່ມເຕີມກ່ຽວກັບການກະກຽມຕົວຢ່າງ HPLC, ກະລຸນາກວດເບິ່ງບົດຄວາມນີ້: ວິທີແກ້ໄຂການກະກຽມແບບຟອມ HPLC ສໍາລັບຜົນໄດ້ຮັບທີ່ດີທີ່ສຸດ
ສະຫຼຸບ
ການກະກຽມຕົວຢ່າງຂອງ HPLC ແມ່ນບາດກ້າວທີ່ສໍາຄັນທີ່ສາມາດສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ຄວາມຖືກຕ້ອງແລະຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖືຂອງຜົນໄດ້ຮັບ. ໂດຍປະຕິບັດຕາມການປະຕິບັດທີ່ດີທີ່ສຸດ, ໂດຍໃຊ້ເຕັກນິກທີ່ເຫມາະສົມ, ແລະແກ້ໄຂບັນຫາທົ່ວໄປ, ຫ້ອງທົດລອງສາມາດເພີ່ມປະສິດຕິຜົນເຕັກນິກການກະກຽມຕົວຢ່າງໂດຍການຮັບຮອງເອົາເຕັກໂນໂລຢີຂັ້ນສູງແລະການກວດສອບເຕັກໂນໂລຢີທີ່ກ້າວຫນ້າ. ອັດຕະໂນມັດຈະຊ່ວຍເພີ່ມປະສິດທິພາບໃຫ້ດີຂື້ນແລະປະສິດທິຜົນຂອງການວິເຄາະ HPLC. ການກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ເຫມາະສົມບໍ່ພຽງແຕ່ປັບປຸງຄຸນນະພາບຂອງຜົນໄດ້ຮັບເທົ່ານັ້ນ, ແຕ່ຍັງປົກປ້ອງລະບົບ HPLC, ຮັບປະກັນຄວາມຫນ້າເຊື່ອຖືໃນໄລຍະຍາວແລະການປະຕິບັດ.