Течна хроматографија со високи перформанси (HPLC) и течна хроматографија-масена спектрометрија (LCMS) се две моќни аналитички техники кои се користат во најразлични полиња, вклучувајќи фармацевтски производи, науки за животната средина и животни науки. Додека и двата метода вклучуваат раздвојување и анализа на соединенија, нивните принципи, функции и апликации се многу различни. Овој пост на блогот ќе ги спореди HPLC и LCMS, фокусирајќи се на нивните клучни разлики и предностите на секоја техника.

Принцип на работа

HPLC

HPLC е хроматографска техника што ги одделува соединенијата врз основа на нивните интеракции со стационарните и мобилните фази. Во HPLC, течна мобилна фаза се пумпа преку колона исполнета со стационарна фаза, која обично е составена од мали честички на силика или полимери. Кога мешавината на примерок се воведува во системот, компонентите се одвоени врз основа на нивниот афинитет кон стационарната фаза. Соединенија кои комуницираат посилно со стационарната фаза елита полека, додека соединенијата што комуницираат помалку силно се еликуваат побрзо. Одделените соединенија потоа се откриваат со употреба на различни детектори, како што се UV-VIS, флуоресценција или детектори на индекс на рефракција.

Сакате да дознаете повеќе за апликациите на ампули за хроматографија, проверете го овој напис:15 апликации на ампули за хроматографија во различни полиња

LCMS

LCMS ги комбинира можностите за раздвојување на HPLC со можностите за масовна анализа на масовната спектрометрија. Во LCM, примероците прво се одделени со употреба на HPLC, исто како и во конвенционалниот HPLC. Како и да е, наместо да бидат откриени од конвенционален детектор, елитираните соединенија се воведуваат во масен спектрометар. Масовниот спектрометар ги јонизира соединенијата и ги мери нивниот однос на маса до полнење, обезбедувајќи детални информации за молекуларната тежина и структурата на аналитот. Оваа комбинација на раздвојување и масена спектрометрија обезбедува поголема чувствителност и специфичност само од HPLC.

Механизам за раздвојување

HPLC:HPLC користи висок притисок за да истурка течна мобилна фаза преку спакувана колона која содржи стационарна фаза. Соединенијата се одделени врз основа на нивните диференцијални интеракции со стационарната фаза, што резултира во прецизни и ефикасни раздвојувања.

LCMS:LCMS ги комбинира можностите за физичко раздвојување на HPLC со можностите за масовна спектрометрија на масовната спектрометрија (MS). Компонентата на течна хроматографија ги раздвојува соединенијата, додека масениот спектрометар го мери односот маса до полнење на јонизираните видови.

Чувствителност и селективност

HPLC:HPLC има добра чувствителност и селективност, особено кога се комбинираат со напредни детектори како што се UV-VIS, флуоресценција или детектори на диоди низа. Сепак, само HPLC може да не обезбеди соодветна специфичност за сложените примероци.

LCMS:LCMS има супериорна чувствителност и селективност во споредба со HPLC. Масовните спектрометри можат точно да ги идентификуваат и квантифицираат соединенијата врз основа на нивните уникатни стапки на маса до полнење, дури и во сложени матрици. Ова го прави LCMS особено корисно за анализирање на соединенија во трагови и потврдување на идентитетот на непознати материи.

Подготовка на примерок

HPLC:Подготовката на примерокот за HPLC обично вклучува техники за разредување, филтрација или едноставни техники на екстракција. Примероците не треба да се испаруваат, така што HPLC е погоден за широк спектар на соединенија, вклучувајќи поларни и неволативни материи.

LCMS:Подготовката на примерокот за LCMS е слична на онаа за HPLC, но може да бидат потребни дополнителни чекори за да се обезбеди компатибилност со масениот спектрометар. На пример, може да бидат потребни испарливи тампони или адитиви за подобрување на јонизацијата и да се спречи јонското потиснување.

Апликации

HPLC:HPLC се користи за анализа на фармацевтски производи, храна и примероци од животната средина. Особено е ефикасен за одвојување и квантифицирање на соединенија во сложени мешавини, како што се нечистотии на лекови, адитиви за храна и остатоци од пестициди.

LCMS:LCMS има широк спектар на апликации, вклучувајќи:

Фармацевтска анализа: Се користи во откривање на лекови, развој и контрола на квалитетот.

Протеомика и метаболика: Се користи за идентификување и квантифицирање на протеините и метаболитите во биолошките примероци.

Анализа на животната средина: Се користи за откривање на загадувачи во трагови во примероци од вода, почва и воздух.

Iousубопитни за улогата на овластени ампули за HPLC за обезбедување точна анализа на примерокот? Прочитајте го овој напис: Важноста на овластените ампули за HPLC за точна анализа на примерокот

Заклучок

HPLC и LCMs се и моќни аналитички техники со свои јаки и ограничувања. Изборот помеѓу двете зависи од специфичните барања на анализата, како што се чувствителност, селективност, сложеност на примерокот и достапни ресурси.

HPLC е добар избор за рутинска анализа на познати соединенија во релативно едноставни матрици, каде што трошоците и лесната употреба се важни фактори. LCMS, од друга страна, е најпосакувана техника за анализирање на комплексни примероци, идентификување на непознати соединенија и постигнување на откривање на ултра-трага на ниво.

Бидејќи технологијата продолжува да напредува, интеграцијата на HPLC и LCMS ќе игра сè поголема важна улога во задоволувањето на потребите за развој на аналитичката хемија и обезбедување на висококвалитетни резултати во различни апликации.

Претходно:

Крајниот водич за филтри за шприц од 0,45 микрони за вас

Следно:

Сè што треба да знаете за подготовката на примерокот на GCSPACE GC