Prapreatment sampel termasuk semua operasi sebelum suntikan. Selain menimbang, membubarkan, dan pencairan, ia juga melibatkan langkah -langkah berikut:

Penapisan
Pengekstrakan
Derivatisasi (derivatisasi pra-lajur)
Kromatografi cecair (kromatografi lajur tekanan rendah)

Pretreatment boleh dilakukan secara manual atau automatik. Adakah anda biasa dengan pretreatment sampel?

Derivatisasi

Sesetengah sampel masih tidak boleh disuntik secara langsung selepas pretreatment. Derivatisasi diperlukan untuk membuat sebatian tanpa penyerapan UV atau pendarfluor yang dapat dikesan oleh pengesan UV atau pendarfluor.

Meningkatkan kepekaan
Meningkatkan Pemisahan (Perubahan Kualiti)

Isu yang mungkin termasuk kehilangan sampel, pencemaran, tindak balas yang tidak lengkap, atau produk sampingan yang banyak, yang boleh menjejaskan ketepatan atau memperkenalkan kesilapan.

Contoh penapisan

Sampel LC mestilah seragam dan bebas zarah; Zarah boleh merosakkan penyuntik atau menyekat lajur. Langkah -langkah termasuk:

Goncang sampel sebelum suntikan dan periksa zarah, kekeruhan, atau emulsi
Jika zarah diperhatikan, tapis sampel menggunakan membran yang dapat mengekalkan zarah ≥0.15μm

Isu yang berpotensi: Pencemaran sampel, penyerapan mengurangkan kepekatan komponen, dan penyejatan pelarut menyebabkan kesilapan.

Kaedah pengekstrakan

Pengekstrakan memisahkan analisis dari pelarut bersama atau membuang bahan yang mengganggu (mis., Protein). Pelarut organik hendaklah rendah-toksis, tidak menentu, rendah dalam kekotoran, dan membubarkan sampel dengan baik.

Pelarut biasa: dietil eter, etil asetat, diklorometana, kloroform, benzena, atau campuran.

Selepas pengekstrakan, sampel boleh disuntik secara langsung atau tertumpu untuk meningkatkan kepekatan dan kepekaan analit.

Pengekstrakan sampel larut air

Komponen dan garam berasid: Ekstrak kekotoran dengan pelarut organik, menyesuaikan diri dengan asid, kemudian ekstrak atau suntikan; atau kering di bawah N₂ dan larut dalam pelarut yang sesuai sebelum suntikan.
Komponen asas dan garam: Ekstrak kekotoran dengan pelarut organik, menyesuaikan diri dengan asas, kemudian ekstrak atau suntikan; atau kering di bawah N₂ dan larut dalam pelarut yang sesuai sebelum suntikan.
Komponen neutral: Ekstrak kekotoran dengan pelarut organik, kemudian menganalisis secara langsung oleh kromatografi fasa terbalik.

Pengekstrakan sampel larut lemak

Ekstrak dengan pelarut organik atau suntikan secara langsung; atau kering di bawah N₂ dan larut dalam pelarut yang sesuai sebelum suntikan.

Sumber pencemaran

Potensi sumber pencemaran dalam analisis:

Jenis pencemaran	Sumber	Langkah -langkah pencegahan
Alam sekitar	Gas berbahaya, habuk, aerosol	Pastikan bilik instrumen terpencil, bersih; Pasang AC; kelembapan kawalan <70%; mencegah kelembapan, kakisan, getaran
Bekas	Kaca, Seramik, Kuarza, Makmal Plastik	Pilih bekas yang sesuai bagi setiap jenis sampel; Bersihkan dengan teliti
Reagen	Reagen gred bukan kromatografi	Gunakan gred kromatografi, kemurungan tinggi, atau reagen gred analisis

Penyediaan penyelesaian standard

Menyediakan penyelesaian standard dalaman terlebih dahulu; Gunakan kumpulan yang sama dalam piawaian dan sampel untuk mengurangkan kesilapan
Bahan mestilah gred kromatografi dan stabil
Simpan penyelesaian standard dalam botol coklat pada suhu rendah
Untuk vitamin, gunakan potongan volumetrik coklat atau melindungi dari cahaya

Masalah biasa dalam pretreatment dan penyelesaian sampel

Masalah	Sebab	Penyelesaian
Puncak yang tidak berkaitan dalam kromatogram	Pencemaran penapis	Rendam penapis dalam pelarut sampel dan suntikan ujian Tukar jenis penapis Gunakan teknik pembersihan alternatif
Respons Puncak Rendah (terutamanya Sampel Konsentrasi Rendah)	Penjerapan pada permukaan penapis	Tukar jenis penapis Proses semua sampel dalam keadaan yang sama Gunakan teknik pembersihan alternatif
Pemulihan yang rendah	Pengekstrakan tidak lengkap	Meningkatkan masa pengekstrakan, gunakan pelarut panas Laraskan kaedah pembersihan
Puncak yang diperluaskan, jangka hayat lajur yang dipendekkan	Contoh gangguan dan pencemaran	Meningkatkan kaedah pembersihan
Ketepatan yang lemah	Pemulihan yang tidak lengkap	Mengoptimumkan atau menggantikan derivatisasi, pemisahan, pengekstrakan, atau syarat lain Gunakan pengendalian automatik untuk meningkatkan ketepatan

Sebelumnya:

Sangat tinggi \ / kesan suhu rendah dan pendedahan cahaya pada kestabilan sampel: teori & metodologi

Seterusnya:

Kembali ke senarai