HPLC (kromatografi cecair prestasi tinggi) dan GC (kromatografi gas) adalah teknik analisis yang kuat yang digunakan untuk memisahkan, mengenal pasti, dan mengukur sebatian dalam pelbagai sampel. Walau bagaimanapun, mereka sangat berbeza dari segi operasi, peralatan, dan aplikasi. Artikel ini menggariskan perbezaan utama antara lajur HPLC dan GC, yang memberi tumpuan kepada reka bentuk, fungsi, dan kesesuaian mereka untuk pelbagai jenis analisis.

Reka bentuk lajur

Lajur HPLC

Lajur HPLC biasanya lebih pendek dan lebih luas daripada lajur GC. Mereka biasanya sehingga 30 cm panjang dan mempunyai diameter dalaman antara 2.1 mm hingga 8 mm. Pembungkusan dalam lajur HPLC terdiri daripada zarah kecil (biasanya kurang daripada 5 mikron diameter) yang menyediakan kawasan permukaan yang besar untuk berinteraksi dengan komponen sampel. Ciri -ciri pembungkusan lajur ini membolehkan mereka untuk memisahkan sebatian secara efisien berdasarkan sifat kimia mereka.

Ciri -ciri utama:

Panjang: Sehingga 30 cm

Diameter: Biasanya antara 2.1 mm dan 8 mm

Bahan Pembungkusan: Zarah -zarah kecil (mis. Silika) dengan pelbagai pengubahsuaian permukaan yang sesuai untuk mekanisme pemisahan yang berlainan (mis. Fasa terbalik, fasa normal).

Lajur GC

Lajur GC, sebaliknya, lebih panjang dan sempit, biasanya sehingga 100 m panjang dan mempunyai diameter dalaman antara 0.1 mm hingga 1 mm. Mereka boleh dibahagikan kepada dua jenis utama: lajur yang dibungkus dan lajur kapilari. Lajur yang dibungkus mengandungi fasa pegun pepejal atau cecair yang dilapisi pada sokongan pepejal, sedangkan lajur kapilari mempunyai filem nipis fasa pegun yang dilapisi pada dinding dalaman.

Ciri -ciri utama:

Panjang: Sehingga 100 m

Diameter: Biasanya antara 0.1 mm dan 1 mm

Jenis: Lajur yang dibungkus (fasa pegun pepejal atau cecair) dan lajur kapilari (struktur tiub terbuka).

Fasa mudah alih

Kromatografi cecair prestasi tinggi

Dalam HPLC, fasa mudah alih biasanya merupakan pelarut cecair atau campuran pelarut kutub atau bukan kutub. Pelarut biasa termasuk air, metanol, asetonitril, dan pelbagai buffer. Pilihan fasa mudah alih adalah kritikal kerana ia mempengaruhi interaksi antara analit dan fasa pegun dalam lajur.

Kromatografi gas

GC menggunakan fasa mudah alih gas, yang paling biasa gas lengai seperti helium atau nitrogen. Sampel mestilah tidak menentu untuk menguap apabila diperkenalkan ke dalam lajur. Keperluan ini bermakna GC terutamanya sesuai untuk menganalisis sebatian yang tidak menentu, sementara HPLC dapat mengendalikan pelbagai bahan yang lebih luas, termasuk sebatian yang tidak berubah.

Mekanisme pemisahan

Kromatografi cecair prestasi tinggi

HPLC memisahkan sebatian berdasarkan pertalian mereka untuk fasa pegun berbanding fasa mudah alih. Pelbagai mod kromatografi boleh digunakan:

Kromatografi fasa terbalik: Fasa pegun nonpolar dengan fasa mudah alih kutub.

Kromatografi fasa normal: Fasa pegun polar dengan fasa mudah alih nonpolar.

Kromatografi pertukaran ion: Memisahkan spesies yang dikenakan berdasarkan interaksi mereka dengan fasa pegun yang dikenakan.

Kromatografi Pengecualian Saiz: Memisahkan molekul berdasarkan saiz.

Kromatografi gas

Dalam kromatografi gas, pemisahan terutamanya dicapai oleh perbezaan dalam turun naik dan titik mendidih analisis. Sebatian yang menguap dengan mudah akan elute dari lajur terlebih dahulu, sementara sebatian yang tidak menentu akan mengambil masa yang lebih lama untuk dilalui. Interaksi antara analit dan fasa pegun juga boleh menjejaskan masa pengekalan.

Kepekaan dan resolusi

Kepekaan HPLC

HPLC umumnya mempunyai kepekaan yang lebih tinggi untuk sebatian yang tidak menentu kerana ia dapat menganalisis kepekatan sampel yang lebih rendah tanpa penyejatan. Menggunakan saiz zarah yang lebih kecil dalam lajur HPLC menyediakan kawasan permukaan yang lebih besar untuk interaksi, yang meningkatkan resolusi.

Kepekaan GC

Oleh kerana kromatografi gas dapat menumpukan analisis melalui penyejatan, ia dapat mencapai kepekaan yang tinggi untuk sebatian yang tidak menentu. Lajur kapilari umumnya mempunyai resolusi yang lebih baik daripada lajur yang dibungkus kerana panjangnya panjang dan diameter yang lebih kecil.

Aplikasi HPLC dan GC

Aplikasi HPLC

HPLC digunakan dalam pelbagai bidang kerana fleksibiliti:

Analisis farmaseutikal: digunakan untuk ujian formulasi dadah dan kawalan kualiti.

Ujian Alam Sekitar: Menganalisis bahan pencemar dalam sampel air dan tanah.

Ujian Keselamatan Makanan: Mengesan bahan cemar dan mengesahkan kualiti makanan.

Bioteknologi: membersihkan protein dan asid nukleik.

Aplikasi kromatografi gas

GC digunakan terutamanya untuk menganalisis sebatian organik yang tidak menentu:

Analisis Alam Sekitar: Mengukur sebatian organik yang tidak menentu dalam bahan pencemar udara dan air.

Sains Forensik: Menganalisis bahan -bahan di adegan jenayah.

Industri petrokimia: mencirikan hidrokarbon dalam bahan api.

Analisis rasa dan aroma: Mengenal pasti komponen yang tidak menentu dalam makanan.

Ringkasnya, HPLC dan GC adalah teknik kromatografi yang berbeza yang sesuai untuk pelbagai jenis analisis berdasarkan reka bentuk lajur mereka, fasa mudah alih, mekanisme pemisahan, aplikasi, kepekaan, dan keupayaan resolusi. HPLC sesuai untuk sebatian labil yang tidak berubah-ubah atau termal yang memerlukan fasa mudah alih cecair, sementara GC cemerlang dalam menganalisis bahan-bahan yang tidak menentu menggunakan fasa mudah alih gas. Memahami perbezaan ini membolehkan para penyelidik memilih kaedah yang sesuai untuk keperluan analisis khusus mereka, memastikan hasil yang tepat dalam pelbagai bidang saintifik.

Adakah anda tahu perbezaan antara botol HPLC dan botol GC? Semak artikel ini: Apakah perbezaan antara botol HPLC dan botol GC?

Sebelumnya:

Kromatografi Flash vs HPLC: Perbandingan terperinci

Seterusnya:

Bagaimana silanisasi dibandingkan dengan kaedah penyahaktifan permukaan yang lain