Adakah anda tahu mengenai kromatografi kertas?

Kromatografi kertas adalah teknik analisis yang digunakan secara meluas yang memisahkan dan mengenal pasti campuran bahan berdasarkan pertalian yang berbeza untuk fasa pegun (kertas) dan fasa mudah alih (pelarut). Ia amat berguna dalam kimia dan biokimia untuk menganalisis sejumlah kecil bahan seperti pigmen, asid amino, dan sebatian organik yang lain.

Apakah kromatografi kertas?

Kromatografi kertas adalah sejenis kromatografi cecair di mana fasa pegun adalah helaian kertas penapis dan fasa mudah alih adalah pelarut yang mengalir melalui kertas penapis. Teknik ini bergantung pada pembahagian kebezaan sebatian antara fasa pegun (kertas penapis) dan fasa mudah alih (pelarut). Oleh kerana pelarut menggerakkan kertas penapis dengan tindakan kapilari, ia membawa komponen campuran pada kadar yang berbeza berdasarkan pertalian mereka untuk kedua -dua fasa.

Prinsip asas di sebalik kromatografi kertas dapat difahami melalui dua konsep utama: kromatografi partition dan kromatografi penjerapan.

Kromatografi Partition: Dalam jenis ini, bahan diedarkan antara dua fasa cecair. Fasa pegun terdiri daripada air di dalam liang kertas penapis, manakala fasa mudah alih adalah pelarut yang bergerak melalui liang -liang ini. Pemisahan berlaku kerana sebatian yang berbeza mempunyai pertalian yang berbeza untuk fasa pegun dan mudah alih.

Kromatografi penjerapan: Di sini, permukaan pepejal kertas bertindak sebagai fasa pegun dan pelarut cecair bertindak sebagai fasa mudah alih. Komponen dalam campuran dipisahkan berdasarkan penjerapan mereka ke permukaan pepejal dan kelarutan mereka dalam fasa cecair.

Komponen

Fasa pegun: Kertas kromatografi, biasanya diperbuat daripada selulosa. Ia menyediakan permukaan untuk komponen untuk mematuhi.

Fasa mudah alih: Pelarut atau campuran pelarut yang bergerak di atas kertas dengan tindakan kapilari. Pilihan pelarut boleh menjejaskan proses pemisahan yang ketara.

Contoh: Campuran yang akan dianalisis, biasanya dilihat pada titik permulaan yang ditetapkan di atas kertas.

Ingin mengetahui lebih lanjut mengenai penyediaan sampel HPLC, sila periksa artikel ini: Penyelesaian Penyediaan Contoh HPLC untuk hasil terbaik

Proses kromatografi kertas

Penyediaan: Pilih kertas penapis berkualiti tinggi dengan keliangan tertentu untuk memastikan pemisahan yang berkesan. Sapukan sebahagian kecil campuran sampel ke garis dasar kertas kromatografi.

Penyediaan Sampel: Larutkan campuran sampel dalam pelarut yang sesuai sebagai sebahagian daripada fasa mudah alih.

Spotting: Gunakan kapilari atau mikropipet untuk menjatuhkan sedikit penyelesaian sampel pada garis dasar pada kertas penapis.

Pembangunan: Dip pinggir bawah kertas ujian ke dalam pelarut pembangunan (fasa mudah alih). Apabila tindakan kapilari berlaku, pelarut meningkat melalui kertas ujian, membawa komponen sampel dengannya.

Pemisahan: Apabila langkah pelarut, komponen sampel yang berlainan akan bergerak pada kadar yang berbeza kerana interaksi mereka dengan fasa pegun dan kelarutan yang berbeza dalam fasa mudah alih.

Visualisasi: Selepas bahagian pelarut telah memindahkan jarak yang mencukupi, kertas itu dikeluarkan dari pelarut dan dibiarkan kering. Komponen ini boleh digambarkan menggunakan cahaya UV, reagen kimia, atau dengan mengamati perubahan warna.

Analisis: Jarak yang dilalui oleh setiap komponen berbanding dengan hadapan pelarut diukur untuk mengira nilai RF (faktor pengekalan) untuk pengenalpastian.

Aplikasi kromatografi kertas

Kromatografi kertas mempunyai pelbagai aplikasi dalam pelbagai bidang:

Biokimia: analisis asid amino, gula, dan biomolekul lain.

Farmaseutikal: Pengenalpastian bahan -bahan aktif dan kekotoran dalam formulasi dadah. Digunakan untuk mengenal pasti sebatian aktif dan kekotoran dalam formulasi dadah semasa pembangunan dan kawalan kualiti.

Sains Alam Sekitar: Kromatografi kertas digunakan untuk mengesan bahan cemar dalam sampel air dan menganalisis bahan cemar dalam ekstrak tanah.

Industri makanan: Teknik ini membantu dalam menganalisis bahan tambahan, bahan pencemar, dan pewarna dalam makanan untuk memastikan pematuhan peraturan keselamatan.

Kelebihan Kromatografi Kertas

Keberkesanan kos: Ia memerlukan peralatan dan bahan yang minimum berbanding dengan teknik kromatografi lain seperti HPLC (kromatografi cecair prestasi tinggi). Kesederhanaan: Proses ini sangat mudah dan boleh dilakukan dengan alat makmal asas, jadi ia boleh digunakan untuk tujuan pendidikan.

Keperluan volum sampel yang rendah: Hanya sedikit sampel yang diperlukan untuk analisis, menjadikannya sesuai untuk sampel berharga atau terhad.

Fleksibiliti: Ia boleh memisahkan pelbagai bahan berdasarkan sifat kimia, termasuk sebatian kutub dan bukan polar

Batasan kromatografi kertas

Walaupun kelebihannya, kromatografi kertas mempunyai beberapa batasan:

Kapasiti terhad: umumnya sesuai untuk jumlah sampel kecil.

Resolusi: Resolusi mungkin tidak setinggi yang dicapai oleh teknik yang lebih maju seperti HPLC atau kromatografi gas (GC).

Makan masa: Oleh kerana kadar penghijrahan yang lebih perlahan, proses itu mungkin mengambil masa lebih lama berbanding dengan kaedah kromatografi yang lain.

Analisis kuantitatif terhad: Walaupun hasil kualitatif dapat diperoleh dengan mudah, kaedah penentukuran tambahan mungkin diperlukan untuk mengukur kepekatan.

Kromatografi kertas kekal sebagai teknik yang berharga untuk memisahkan dan menganalisis campuran dalam pelbagai bidang saintifik. Kesederhanaan, keberkesanan kos, dan keupayaan untuk memberikan hasil intuitif menjadikannya alat penting untuk ahli kimia dan penyelidik. Walaupun batasannya berbanding dengan teknik kromatografi yang lebih maju, ia masih banyak digunakan untuk tujuan pendidikan dan analisis awal di makmal.

Ingin mengetahui 50 jawapan mengenai vial HPLC, sila periksa artikel ini: 50 soalan paling kerap ditanya mengenai botol HPLC