Penyediaan & Penapisan Contoh: Memastikan Kualiti dalam Kromatografi

Sampel prep -clean sampel yang betul, keluarkan partikel, memperkayakan analisis, dan, jika diperlukan, derivatisasi -mengharamkan lebih dari 90% bunyi bising dan anomali tekanan, memastikan puncak tajam dan garis dasar yang stabil. Kegagalan di sini mengakibatkan puncak tailing, garis dasar hanyut, atau penyumbatan lajur.

1. Pencemaran & gangguan matriks

Masalah

• Baseline drift dan peningkatan bunyi bising yang tidak jelas.

• Puncak yang tidak dijangka muncul dari kekotoran.

• Reproducibility yang lemah antara suntikan.
  

  

Sebab

• Residuals dalam Glassware: Asid -Wash Tidak lengkap Silicates; Plasticware boleh melepaskan plasticizers.

• Ejen pembersih: Trace Organics dalam pelarut bilas tetap terserap.

• Partikel Alam Sekitar: Debu udara makmal dan VOCS menyerap ke sampel terbuka.
  

  

Penyelesaian

1. SOP pembersihan yang ketat: Asid Rendam → Ultrasonik Pure -Water Rinse → Nitrogen Kering untuk Gelas; Detergen khusus untuk plastik.

2. Pra -penyebaran: Centrifuge pada 3000rpm untuk 10 minit atau gunakan prefilter 5μm sebelum penapisan 0.22μm akhir.

3. Persekitaran terkawal: Lakukan persiapan dalam tudung aliran laminar untuk meminimumkan pencemaran udara.
   
   

2. Penapis menyumbat dari penapis yang tidak serasi

Masalah

• Penggera tekanan autosampler dan penggantian jarum yang kerap.

• Kadar aliran menurun, kawasan puncak yang tidak konsisten.

• Peningkatan tekanan belakang dan penyumbatan masuk lajur.
  

  

Sebab

• Mismatch membran: Nylon membengkak dalam pelarut organik; PVDF merayap pada suhu tinggi.

• Saiz liang yang tidak betul: 0.22μm penapis perangkap zarah halus tetapi mengurangkan aliran; Penapis 0.45μm masih boleh menyumbat mikrokristal.

Penyelesaian

1. Matriks pembuangan membran: Gunakan hidrofilik PES \ / MCE untuk berair (pH4-8), PTFE hidrofobik \ / PVDF untuk fasa organik; Elakkan selulosa asetat dalam asid kuat.

2. Pilih saiz liang yang betul: Gunakan 0.45μm untuk HPLC rutin, 0.22μm untuk UHPLC atau kerja jejak; Sampel -sampel kelikatan tinggi prefilter melalui 5μm.

3. Monitor ΔP: Kenaikan tekanan trek; Ganti penapis apabila tekanan backpressure> 15%.
   
   

   

3. Ketidakserasian Kimia Pelarut -Membrane

Masalah

• Sampel yang ditapis kelihatan mendung atau membawa zarah.

• Bunyi asas baru atau puncak hantu pasca -pengabaian.

• Mengurangkan pemulihan analit.
  

  

Sebab

• Pembengkakan pelarut: THF membengkak PTFE, mengubah saiz liang dan aliran.

• Leachables membran: Nilon dalam asid formik mengeluarkan oligomer yang menyerap pada 214nm.

Penyelesaian

1. Ujian keserasian: Rendam penapis dalam pelarut yang dimaksudkan selama 24h pada 25 ° C; Periksa pembengkakan atau perubahan berat badan.

2. Ujian LC -MS Pilot: Bandingkan jumlah kromatogram ion yang ditapis dan sampel yang tidak diisi.

3. Gunakan penapis rendah: PTFE atau PES yang dilengkapi dengan ultrasonik tanpa pelekat.
   
   

Sistem Kualiti: Pertahanan -Monitoring -Korporat

Pertahanan

Menyeragamkan SOP untuk pembersihan, penapisan, dan pemilihan membran untuk mengelakkan kesilapan.

Pemantauan

Kadar aliran rekod, backpressure, dan baselin kosong kosong untuk mengesan drift.

Pembetulan

Mengekalkan analisis pokok kesalahan untuk pengenalpastian akar -sebab yang cepat dan tindakan pembetulan.

"Ketepatan analisis bermula dengan memintas zarah terkecil."