It-trattament minn qabel tal-kampjun jinkludi l-operazzjonijiet kollha qabel l-injezzjoni. Minbarra l-użin, id-dewweb u d-dilwizzjoni, jinvolvi wkoll il-passi li ġejjin:

Filtrazzjoni
Estrazzjoni
Derivatizzazzjoni (derivazzjoni ta' qabel il-kolonna)
Kromatografija likwida (kromatografija tal-kolonna bi pressjoni baxxa)

It-trattament minn qabel jista 'jsir manwalment jew awtomatizzat. Inti familjari mat-trattament minn qabel tal-kampjun?

Derivatizzazzjoni

Xi kampjuni għadhom ma jistgħux jiġu injettati direttament wara t-trattament minn qabel. Id-derivazzjoni hija meħtieġa biex il-komposti mingħajr assorbiment tal-UV jew fluworexxenza jinstabu minn UV jew ditekters fluworexxenti.

Ittejjeb is-sensittività
Ittejjeb is-separazzjoni (bidla fil-kwalità)

Kwistjonijiet possibbli jinkludu telf ta 'kampjuni, kontaminazzjoni, reazzjonijiet mhux kompluti, jew prodotti sekondarji multipli, li jistgħu jaffettwaw l-eżattezza jew jintroduċu żbalji.

Filtrazzjoni tal-Kampjun

Il-kampjuni LC għandhom ikunu uniformi u ħielsa mill-partiċelli; partiċelli jistgħu jagħmlu ħsara lill-injettur jew jimblukkaw il-kolonna. Il-passi jinkludu:

Ħawwad il-kampjun qabel l-injezzjoni u iċċekkja għal frak, turbidità, jew emulsjonijiet
Jekk jiġu osservati partiċelli, iffiltra l-kampjun billi tuża membrana li tista 'żżomm partiċelli ≥0.15μm

Kwistjonijiet potenzjali: kontaminazzjoni tal-kampjun, konċentrazzjoni ta 'komponent li tnaqqas l-adsorbiment, u evaporazzjoni tas-solvent li tikkawża żbalji.

Metodi ta' Estrazzjoni

L-estrazzjoni tissepara l-analiti minn kosolventi jew tneħħi sustanzi li jinterferixxu (eż., proteini). Is-solventi organiċi għandhom ikunu ta 'tossiċità baxxa, volatili, baxxi fl-impuritajiet, u ħoll il-kampjun sew.

Solventi komuni: diethyl ether, ethyl acetate, dichloromethane, chloroform, benzene, jew taħlitiet.

Wara l-estrazzjoni, il-kampjuni jistgħu jiġu injettati direttament jew ikkonċentrati biex tiżdied il-konċentrazzjoni u s-sensittività tal-analite.

Estrazzjoni tal-Kampjun Solubbli fl-Ilma

Komponenti aċidużi u melħ: estratt impuritajiet b'solvent organiku, aġġusta għal aċiduż, imbagħad estratt jew injetta; jew nixxef taħt N₂ u dewweb f'solvent xieraq qabel l-injezzjoni.
Komponenti bażiċi u melħ: estratt impuritajiet b'solvent organiku, aġġusta għal bażiku, imbagħad estratt jew injetta; jew nixxef taħt N₂ u dewweb f'solvent xieraq qabel l-injezzjoni.
Komponenti newtrali: estratt l-impuritajiet b'solvent organiku, imbagħad analizza direttament permezz ta 'kromatografija b'fażi inversa.

Estrazzjoni tal-Kampjun li Solubbli fix-Xaħmijiet

Oħroġ b'solvent organiku jew injetta direttament; jew nixxef taħt N₂ u dewweb f'solvent xieraq qabel l-injezzjoni.

Sorsi ta' Kontaminazzjoni

Sorsi potenzjali ta' kontaminazzjoni fl-analiżi:

Tip ta' Kontaminazzjoni	Sors	Miżuri ta' Prevenzjoni
Ambjentali	Gassijiet ta 'ħsara, trab, aerosols	Żomm il-kamra tal-istrumenti iżolata, nadifa; tinstalla AC; kontroll umdità <70%; jipprevjenu umdità, korrużjoni, vibrazzjoni
Kontenituri	Ħġieġ, ċeramika, kwarz, oġġetti tal-laboratorju tal-plastik	Agħżel kontenituri xierqa għal kull tip ta' kampjun; naddaf sewwa
Reaġenti	Reaġenti mhux tal-kromatografija	Uża reaġenti ta' grad ta' kromatografija, ta' purità għolja jew ta' grad analitiku

Preparazzjoni ta' Soluzzjoni Standard

Ipprepara soluzzjoni standard interna l-ewwel; uża l-istess lott fl-istandards u l-kampjuni biex tnaqqas l-iżbalji
Is-sustanzi għandhom ikunu ta' grad ta' kromatografija u stabbli
Aħżen soluzzjonijiet standard fi fliexken kannella f'temperatura baxxa
Għall-vitamini, uża fliexken volumetriċi kannella jew ipproteġi mid-dawl

Problemi Komuni fil-Pretrattament tal-Kampjuni u Soluzzjonijiet

Problema	Kawża	Soluzzjoni
Qċaċet mhux relatati fil-kromatogramma	Kontaminazzjoni tal-filtru	Xarrab il-filtru fis-solvent tal-kampjun u l-injezzjoni tat-test Ibdel it-tip tal-filtru Uża tekniki alternattivi tat-tindif
L-ogħla rispons baxx (speċjalment kampjuni b'konċentrazzjoni baxxa)	Adsorbiment fuq il-wiċċ tal-filtru	Ibdel it-tip tal-filtru Ipproċessa l-kampjuni kollha taħt l-istess kundizzjonijiet Uża tekniki alternattivi tat-tindif
Irkupru baxx	Estrazzjoni mhux kompluta	Żid il-ħin ta 'estrazzjoni, uża solvent sħun Aġġusta l-metodu tat-tindif
Qċaċet mwessa ', ħajja tal-kolonna mqassra	Interferenza tal-kampjun u kontaminazzjoni	Ittejjeb il-metodu tat-tindif
Preċiżjoni fqira	Irkupru mhux komplut	Ottimizza jew ibdel id-derivazzjoni, is-separazzjoni, l-estrazzjoni, jew kundizzjonijiet oħra Uża l-immaniġġjar awtomatizzat biex ittejjeb il-preċiżjoni

Preċedenti:

Effetti ta' Espożizzjoni tad-Dawl u Temperatura Estremament Għolja\/Baxx fuq l-Istabilità tal-Kampjun: Teorija u Metodologu

Li jmiss:

Lura għal-Lista