Soluzzjonijiet ta 'preparazzjoni tal-kampjun HPLC għall-aħjar riżultati

Erba 'passi għall-preparazzjoni tal-kampjun HPLC

Pass 1. Analiżi ta 'soluzzjonijiet milwiema

Pass 2. Preparazzjoni tal-istandards

Il-preparazzjoni ta 'standards għall-identifikazzjoni u l-kwantifikazzjoni tal-kompost tista' tkun proċess tedjuż u li jieħu ħafna ħin. L-użin preċiż ta 'solidu sabiex ikun jista' jintuża volum definit minn qabel ta 'solvent, u l-iskart minħabba żball jista' jiswa ħafna flus - speċjalment meta taħdem ma 'farmaċewtiċi. Fatturi oħra bħat-temperatura jikkomplikaw aktar il-preparazzjoni standard. Il-varjazzjonijiet fit-temperatura jbiddlu d-densità tas-solvent u jikkontribwixxu għal differenzi drammatiċi fil-konċentrazzjoni.



L-użu ta 'bilanċ li jippermetti preċiżjoni tal-użin sa bosta postijiet deċimali u awtomatizzazzjoni tal-proċess billi jgħaqqad il-bilanċ ma' dispenser tas-solvent jiggarantixxi l-ogħla preċiżjoni. L-użu ta 'softwer bħad-dożaġġ ta' YAPP16 Q-APP jippermetti kalkoli awtomatiċi u monitoraġġ gravimetriku tal-valuri mkejla. Id-dokumentazzjoni tat-temperatura u d-densità tas-solvent tiżgura wkoll konċentrazzjonijiet preċiżi ħafna, speċjalment meta tħejji standards fi ġranet sussegwenti. Trasferiment dirett tad-dejta mill-applikazzjoni tal-użin YAPP16 għas-softwer tat-Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 tas-Sistema tad-Dejta tal-Kromatografija (CDS) huwa għażla għall-immaniġġjar tad-dejta mingħajr karta bl-integrità tad-dejta sħiħa.

Pass 3. Erġa 'lura għall-punti bażiċi b'pipetting tajjeb

L-importanza ta 'pajpijiet preċiżi u preċiżi huma spiss injorati u meħuda bħala fatt. Il-livell u l-esperjenza tal-ħiliet tal-utent jista 'jkollhom implikazzjonijiet sinifikanti għal analiżi sensittivi bħall-HPLC. L-għażla tal-pipetta t-tajba tista 'tnaqqas l-iżball uman u l-ispejjeż assoċjati ta' solventi moħlija.



Pipetti mekkaniċi bi lock tal-volum joffru soluzzjoni sempliċi għall-prevenzjoni ta 'bidliet fil-volum aċċidentali, filwaqt li pipetti elettroniċi aktar sofistikati jeliminaw il-varjabbiltà tal-utent biex iwasslu b'mod konsistenti volumi preċiżi. Il-ponta tal-pipetta hija wkoll dettall importanti biex tikkunsidra għall-analiżi tal-HPLC. Għajnuniet ta 'żamma baxxa huma l-aħjar meta jaħdmu ma' solventi ta 'viskożitajiet differenti, billi jimmassimizzaw l-irkupru tal-kampjun. Il-kontaminazzjoni tal-kampjun tista 'sseħħ ukoll bħala riżultat tal-lissija mill-ponta tal-pipetta. Bħala tali, pariri b'reżistenza kimika għolja jippreservaw l-integrità tal-kampjun.

Pass 4. Iffiltra għall-eżattezza u l-lonġevità

It-teħid ta 'kura addizzjonali biex jiffiltra kampjuni qabel l-analiżi jtejjeb l-affidabbiltà u jista' jtawwal il-ħajja tal-kolonna HPLC billi jipprevjeni effetti ta 'imblukkar. Filtri tas-siringa huma soluzzjoni sempliċi u rapida għall-filtrazzjoni ta 'kampjuni qabel il-kromatografija tal-kolonna. Bħal fil-każ tal-pariri tal-pipetta, is-solventi użati fl-HPLC jeħtieġu filtri speċifiċi biex jipprevjenu l-lissija u l-kontaminazzjoni tal-kampjun.

Il-membrani taċ-ċelluloża huma reżistenti għal dimetil sulfoxide (DMSO), amidi, ketoni, ester, u komposti ta 'l-ether. Għal solventi speċjalment ħorox, il-membrani tal-polyethersulfone mhux miksijin (PTFO) jipprevjenu l-lissija u l-kontaminazzjoni tal-kampjun. Il-filtrazzjoni tal-kampjun issir ħafna ħin meta n-numru tal-kampjun jiżdied. Unitajiet ta 'filtrazzjoni b'ħafna kampjuni, bħas-sistema ta' filtrazzjoni ta 'Claristep®, jistgħu jipproċessaw kampjuni mingħajr siringi u preparazzjoni ta' kampjun ta 'track veloċi mingħajr ma tissagrifika l-kwalità.

Ħames problemi li għandek bżonn tagħti attenzjoni lil！

1. X'inhuma l-akbar problemi ta 'preparazzjoni tal-kampjun li qed jiffaċċjaw laboratorji?

Il-laboratorji jinsabu taħt pressjoni dejjem tiżdied f'termini ta 'ħin u spejjeż, ħafna drabi jittrattaw mhux biss numru għoli ta' kampjuni iżda wkoll kampjuni ta 'natura varji. Il-preparazzjoni tal-kampjun hija żona fejn differenzi sottili bejn it-tipi ta 'kampjuni jew il-metodi ta' preparazzjoni tal-kampjun u l-materjali użati jistgħu jħallu r-riżultati miksuba. L-iżgurar ta 'kompatibilità bejn il-materjali fl-apparat ta' filtrazzjoni u s-solvent jista 'jimminimizza l-kwistjonijiet; Pereżempju, il-livelli ta 'komposti estrattibbli li jistgħu jinterferixxu mal-iskoperta ta' l-analiti.

2. X'jiġri meta l-preparazzjoni tal-kampjun tmur ħażin?

Qabel l-applikazzjonijiet analitiċi ta 'kromatografija likwida ta' prestazzjoni għolja (HPLC), il-kampjuni huma ppreparati minn varjetà ta 'metodi, li kollha għandhom il-potenzjal li jinfluwenzaw ir-riżultati analitiċi billi jaffettwaw il-kampjun injettat fis-sistema. Tħejjija ineffettiva tal-kampjun tista 'twassal għal tnaqqis fil-ħajja tal-kolonna, żieda fir-rekwiżiti tas-servizz għall-komponenti, ħin ta' waqfien potenzjali ta 'strumentazzjoni, tnaqqis fl-effiċjenza tas-separazzjoni kromatografika u riproduċibilità, u ħafna problemi oħra.

3. L-ewwel daqqa t'għajn, filtrazzjoni tidher qisha proċess sempliċi ...

Għalkemm il-filtrazzjoni hija parti apparentement żgħira ta 'fluss tax-xogħol kbir, l-impatt tal-għażla tal-filtru dritt għal applikazzjoni partikolari jista' jkun sostanzjali. Pereżempju, metodi li ma jneħħux biżżejjed materja partikulata jistgħu jirriżultaw fl-imblukkar tal-kolonna. L-għażla mhux xierqa ta 'apparati ta' preparazzjoni tal-kampjun tista ', taħt ċerti ċirkostanzi, tirrilaxxa komposti estrattibbli fil-kampjun, torbot analiti ta' interess jew tintroduċi żbalji permezz ta 'telf ta' kampjun - kollha li jinfluwenzaw il-kwalità u r-riproduċibilità tar-riżultati osservati. Jekk inti kunfidenti li l-konsumabbli tal-filtrazzjoni tiegħek mhux qed jikkontribwixxu għal żbalji li jeħtieġu xogħol mill-ġdid jew investigazzjonijiet tal-kawżi tal-għeruq, inti tiffranka l-flus u tagħti lilek innifsek is-serħan tal-moħħ.

4. X'inhuma l-iktar preparazzjoni tal-kampjun komuni "tfalli"?

L-għażla mhux korretta tal-membrana tal-filtru hija problema waħda li naraw ħafna. Il-kwistjonijiet jistgħu jidhru bħala qċaċet barra minn estrattabbli, li jistgħu jinterferixxu mal-iskoperta tal-analiti ta 'interess. L-inkompatibilità tal-midja tal-filtri b'kampjun jew solvent f'termini ta 'reżistenza kimika mhix limitata biss għal effetti ta' dissoluzzjoni fuq il-midja tal-filtru. Is-solventi jistgħu jikkawżaw nefħa żgħira ta 'materjali tal-membrana polimeriċi meta ma jkunux kompatibbli għal kollox, li mbagħad jistgħu jaffettwaw il-prestazzjoni tal-filtrazzjoni, li jwassal għal tindif ineffettiv ta' kampjuni. Mod wieħed kif tindirizza din il-kwistjoni huwa billi tagħżel membrana li hija kompatibbli b'mod wiesa 'kemm ma' solventi akweji kif ukoll organiċi. Għal preparazzjoni tipika tal-kampjun HPLC, is-siringa u l-filtri bla siringa li fihom membrani taċ-ċelluloża riġenerati huma għażla tajba minħabba l-kompatibilità wiesgħa tagħhom tas-solvent.

L-użu ta 'apparat tal-filtru li huwa akbar milli meħtieġ għall-volum li jkun qed jitħejja huwa pitfall ieħor komuni. L-użu ta 'apparati tal-filtru kbar wisq ifisser li ammonti żgħar tal-kampjun jibqgħu fil-filtru, anke wara li jittieħdu prekawzjonijiet biex jitkeċċew kemm jista' jkun.

5. X'inhuma l-vantaġġi li tieħu l-pass tal-filtrazzjoni bis-serjetà?

Għan fundamentali tal-biċċa l-kbira tal-laboratorji involuti fl-ittestjar analitiku huwa li jiġu żviluppati proċessi konsistenti li jirfdu riżultati konsistenti - u li jeħtieġu filtrazzjoni konsistenti. L-għażla ta 'apparat ta' filtrazzjoni bid-daqs tal-pori dritt u l-karatteristiċi taż-żamma tgħin biex tiżgura tneħħija effettiva tal-partikuli, filwaqt li l-għażla tad-daqs u d-disinn xieraq tal-unità tal-filtru tista 'tgħin biex timminimizza t-telf tal-kampjun. Filtrazzjoni tajba tgħin ukoll biex tipproteġi l-kolonna u potenzjalment testendi l-ħajja kemm tal-injettur kif ukoll tal-kolonna.

Konklużjoni

L-HPLC hija teknika siewja għax-xjenza tal-ħajja u riċerka bijofarmaċewtika peress li tagħti riżultati preċiżi u riproduċibbli. Din l-eżattezza tiddependi fuq l-integrità tal-kampjun HPLC, u l-aħjar mod biex jiġi żgurat kampjuni ta 'kwalità għolja huwa li tibda bl-aħjar għodda. B'soluzzjonijiet għal ilma ultrapure, preparazzjoni standard, pipetti, ponot, u filtri, il-linja ta 'preparazzjoni tal-kampjun HPLC tirrappreżenta kull dettall. Soluzzjonijiet u software awtomatizzati jgħinu wkoll biex jissimplifikaw il-preparazzjoni tal-kampjun biex iwasslu kampjuni nodfa għal riżultati nodfa.

Aktar diskussjonijiet dwar is-soluzzjonijiet tal-preparazzjoni tal-kampjun HPLC huma milqugħa!