Kromatografija likwida ta 'prestazzjoni għolja (HPLC) u spettrometrija tal-massa tal-kromatografija likwida (LCMS) huma żewġ tekniki analitiċi qawwija li jintużaw f'varjetà ta' oqsma, inklużi farmaċewtiċi, xjenzi ambjentali, u xjenzi tal-ħajja. Filwaqt li ż-żewġ metodi jinvolvu s-separazzjoni u l-analiżi tal-komposti, il-prinċipji, il-funzjonijiet, u l-applikazzjonijiet tagħhom huma differenti ħafna. Din il-kariga tal-blog se tqabbel l-HPLC u l-LCMS, billi tiffoka fuq id-differenzi ewlenin tagħhom u l-vantaġġi ta 'kull teknika.

Prinċipju ta 'Operazzjoni

HPLC

L-HPLC hija teknika kromatografika li tifred il-komposti bbażati fuq l-interazzjonijiet tagħhom mal-fażijiet wieqfa u mobbli. Fl-HPLC, fażi mobbli likwida tiġi ppumpjata permezz ta 'kolonna mimlija b'fażi wieqfa, li ġeneralment hija magħmula minn partiċelli żgħar ta' silika jew polimeri. Meta taħlita ta 'kampjun tiddaħħal fis-sistema, il-komponenti huma separati abbażi tal-affinità tagħhom għall-fażi wieqfa. Komposti li jinteraġixxu b'mod aktar qawwi mal-fażi wieqfa jelenkaw aktar bil-mod, filwaqt li komposti li jinteraġixxu inqas jelenkaw aktar malajr. Il-komposti separati mbagħad jiġu skoperti bl-użu ta 'varjetà ta' ditekters, bħalma huma l-UV-Vis, il-fluworexxenza, jew l-indiċi ta 'rifrazzjoni.

Trid tkun taf aktar dwar l-applikazzjonijiet tal-kunjetti tal-kromatografija, jekk jogħġbok iċċekkja dan l-artikolu:15 Applikazzjonijiet tal-Kunjetti tal-Kromatografija f'oqsma differenti

LCMS

LCMS jgħaqqad il-kapaċitajiet ta 'separazzjoni ta' HPLC mal-kapaċitajiet ta 'analiżi tal-massa ta' spettrometrija tal-massa. Fl-LCMS, il-kampjuni huma l-ewwel separati bl-użu ta 'HPLC, l-istess bħal fil-HPLC konvenzjonali. Madankollu, minflok ma jiġu skoperti minn ditekter konvenzjonali, il-komposti elużi huma introdotti fi spettrometru tal-massa. L-ispettrometru tal-massa jonizza l-komposti u jkejjel il-proporzjon tal-massa-għal-ħlas tagħhom, u jipprovdi informazzjoni dettaljata dwar il-piż molekulari u l-istruttura tal-analit. Din il-kombinazzjoni ta 'separazzjoni u spettrometrija tal-massa tipprovdi sensittività u speċifiċità akbar minn HPLC biss.

Mekkaniżmu ta 'separazzjoni

HPLC:HPLC juża pressjoni għolja biex jimbotta fażi mobbli likwida permezz ta 'kolonna ppakkjata li fiha fażi wieqfa. Il-komposti huma separati abbażi tal-interazzjonijiet differenzjali tagħhom mal-fażi wieqfa, li jirriżultaw f'separazzjonijiet preċiżi u effiċjenti.

LCMS:LCMS jgħaqqad il-kapaċitajiet ta 'separazzjoni fiżika ta' HPLC mal-kapaċitajiet ta 'spettrometrija tal-massa ta' spettrometrija tal-massa (MS). Il-komponent tal-kromatografija likwida jifred il-komposti, filwaqt li l-ispettrometru tal-massa jkejjel il-proporzjon massa-charge tal-ispeċi jonizzati.

Sensittività u selettività

HPLC:L-HPLC għandu sensittività u selettività tajba, speċjalment meta kkombinat ma 'ditekters avvanzati bħal UV-Vis, fluworexxenza, jew ditekters ta' firxa tad-dijodi. Madankollu, HPLC waħdu jista 'ma jipprovdix speċifiċità adegwata għal kampjuni kumplessi.

LCMS:LCMS għandu sensittività u selettività superjuri meta mqabbel ma 'HPLC. L-ispettrometri tal-massa jistgħu jidentifikaw u jikkwantifikaw b'mod preċiż il-komposti bbażati fuq il-proporzjonijiet uniċi tagħhom ta 'massa għal ħlas, anke f'matriċi kumplessi. Dan jagħmel l-LCMS partikolarment utli għall-analiżi ta 'komposti ta' traċċi u l-konferma tal-identità ta 'sustanzi mhux magħrufa.

Preparazzjoni tal-kampjun

HPLC:Il-preparazzjoni tal-kampjun għall-HPLC tipikament tinvolvi dilwizzjoni, filtrazzjoni, jew tekniki ta 'estrazzjoni sempliċi. Il-kampjuni m'għandhomx għalfejn jiġu evaporate, u għalhekk HPLC huwa adattat għal firxa wiesgħa ta 'komposti, inklużi sustanzi polari u mhux volatili.

LCMS:Il-preparazzjoni tal-kampjun għal LCMS hija simili għal dik għall-HPLC, iżda jistgħu jkunu meħtieġa passi addizzjonali biex tkun assigurata l-kompatibilità mal-ispettrometru tal-massa. Pereżempju, buffers volatili jew addittivi jistgħu jkunu meħtieġa biex itejbu l-jonizzazzjoni u jipprevjenu t-trażżin tal-joni.

Applikazzjonijiet

HPLC:L-HPLC huwa użat ħafna għall-analiżi ta 'farmaċewtiċi, ikel, u kampjuni ambjentali. Huwa partikolarment effettiv għas-separazzjoni u l-kwantifikazzjoni tal-komposti f'taħlitiet kumplessi, bħal impuritajiet tad-droga, addittivi tal-ikel, u residwi ta 'pestiċidi.

LCMS:LCMS għandu firxa wiesgħa ta 'applikazzjonijiet, inklużi:

Analiżi farmaċewtika: Użata fl-iskoperta tad-droga, l-iżvilupp, u l-kontroll tal-kwalità.

Proteomics u Metabolomics: Użati biex jidentifikaw u jikkwantifikaw il-proteini u l-metaboliti f'kampjuni bijoloġiċi.

Analiżi Ambjentali: Użata biex tiskopri traċċi ta 'kontaminanti fl-ilma, ħamrija, u kampjuni ta' l-arja.

Kurjuż dwar ir-rwol tal-kunjetti tal-HPLC iċċertifikati fl-iżgurar ta 'analiżi preċiża tal-kampjun? Aqra dan l-artikolu: L-importanza tal-kunjetti tal-HPLC iċċertifikati għal analiżi preċiża tal-kampjun

Konklużjoni

L-HPLC u l-LCMs huma t-tnejn tekniki analitiċi qawwija bil-vantaġġi u l-limitazzjonijiet tagħhom stess. L-għażla bejn it-tnejn tiddependi fuq ir-rekwiżiti speċifiċi tal-analiżi, bħal sensittività, selettività, kumplessità tal-kampjun, u riżorsi disponibbli.

L-HPLC hija għażla tajba għall-analiżi ta 'rutina ta' komposti magħrufa f'matriċi relattivament sempliċi, fejn l-ispiża u l-faċilità ta 'użu huma fatturi importanti. L-LCMs, min-naħa l-oħra, hija t-teknika preferuta għall-analiżi ta 'kampjuni kumplessi, tidentifika komposti mhux magħrufa, u biex tinkiseb skoperta ta' livell ultra-traċċa.

Hekk kif it-teknoloġija tkompli tavvanza, l-integrazzjoni ta 'HPLC u LCMs se jkollha rwol dejjem aktar importanti biex tissodisfa l-ħtiġijiet li qed jevolvu tal-kimika analitika u fl-iżgurar ta' riżultati ta 'kwalità għolja f'diversi applikazzjonijiet.

Preċedenti:

Il-gwida aħħarija għal 0.45 filtri tas-siringa mikron għalik

Li jmiss:

Dak kollu li għandek bżonn tkun taf dwar il-preparazzjoni tal-kampjun tal-headpace gc