ပြီးပြည့်စုံသောလမ်းညွှန် - HPLC နမူနာ prep အကြောင်းသင်သိထားသင့်သမျှ
အသိပညာ
အမျိုးအစားများ
မေးမြန်းခြင်း

သင် HPLC နမူနာပြင်ဆင်မှုအကြောင်းသိထားသင့်သမျှ

သွဂုတ် 20, 2024
စွမ်းဆောင်ရည်မြင့်မားသောအရည်ရုပ်သိမ်းခြင်း (HPLC) သည်ဆေးဝါးများ, ပတ် 0 န်းကျင်သိပ္ပံများနှင့်စားနပ်ရိက္ခာဖူလုံမှုနှင့်စားနပ်ရိက္ခာဖူလုံမှုများအပါအ 0 င်လယ်ကွင်းများစွာတွင်အရေးပါသောကဏ် entytical technique တစ်ခုဖြစ်သည်။ သို့သော် HPLC ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း၏အောင်မြင်မှုသည်နမူနာပြင်ဆင်မှု၏အရည်အသွေးအပေါ်များစွာမူတည်သည်။ သင့်လျော်သောနမူနာပြင်ဆင်မှုသည် Target Analytes ၏တိကျသောအရေအတွက်ကိုသေချာစေပြီး 0 င်ရောက်စွက်ဖက်မှုများကိုလျှော့ချပေးသည်။ ဤဘက်စုံလမ်းညွှန်သည် 4 င်း၏အရေးပါမှု, နည်းစနစ်များ, အကောင်းဆုံးအလေ့အကျင့်များနှင့်ပြ esh နာဖြေရှင်းခြင်းများအပါအ 0 င် HPLC နမူနာပြင်ဆင်မှုအကြောင်းသင်သိထားသင့်သည့်အရာအားလုံးကိုဖုံးလွှမ်းထားသည်။

Chromatography Office များအကြောင်းပိုမိုသိလိုပါက ကျေးဇူးပြု. ဤဆောင်းပါးကိုစစ်ဆေးပါ။ ကွဲပြားခြားနားသောလယ်ပြင်၌ Chromatogography vials ၏ applications 15

HPLC တွင်နမူနာပြင်ဆင်မှု၏အရေးပါမှု


နမူနာပြင်ဆင်မှုသည်အကြောင်းပြချက်များစွာအတွက် HPLC ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းအတွက်အရေးကြီးသောခြေလှမ်းတစ်ခုဖြစ်သည်။

interferences minimize:နမူနာများသည်အညစ်အကြေးခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာချက်များကိုရှာဖွေတွေ့ရှိနိုင်သည့်အညစ်အကြေးများနှင့် matrix အစိတ်အပိုင်းများပါ 0 င်သည်။ ထိရောက်သောနမူနာပြင်ဆင်မှုနည်းစနစ်များသည်ဤမလိုချင်တဲ့အရာဝတ်ထုတွေကိုဖယ်ရှားပြီးခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတိကျမှန်ကန်မှုကိုတိုးတက်စေနိုင်ပါတယ်။

analyte ပြန်လည်ထူထောင်ရေးကိုတိုးတက်အောင်တိုးတက်အောင်သင့်လျော်သောပြင်ဆင်မှုသည်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာပြန်လည်နာလန်ထူမှုကိုတိုးတက်စေပြီးရလဒ်များကိုမူရင်းနမူနာ၏အမှန်တကယ်အာရုံစူးစိုက်မှုကိုထင်ဟပ်စေသည်။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုနည်းပါးခြင်းတွင်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများရှိနေသည်ကိုသဲလွန်စခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းအတွက်အထူးအရေးကြီးသည်။

တိုးမြှင့်အထွတ်အထိပ်ပုံသဏ်: ာန်:စနစ်တကျပြင်ဆင်ထားသည့်နမူနာများသည် ChromatoGram တွင်အချိုးကျနှင့်သတ်မှတ်ထားသောထိပ်များကိုဖန်တီးရန်ကူညီသည်။ ၎င်းသည်တိကျသောပမာဏအတွက်မရှိမဖြစ်လိုအပ်သည်။ မလျောက်ပတ်သောနမူနာပြင်ဆင်မှုသည်အမြင့်ဆုံးအမြီးနှင့်ကျယ်ပြန့်မှုကိုဖြစ်စေနိုင်သည်။

သင်၏ HPLC စနစ်ကိုကာကွယ်ပါ။သင်၏နမူနာရှိညစ်ညမ်းမှုများသည်သင်၏ HPLC စနစ်တွင်ကော်လံများနှင့်အခြားအစိတ်အပိုင်းများကိုပျက်စီးစေနိုင်သည်။ သင့်လျော်သောနမူနာပြင်ဆင်မှုသည်စနစ်ပိတ်ဆို့ခြင်းနှင့် 0 တ်ဆင်မှုအန္တရာယ်ကိုလျော့နည်းစေသည်။

HPLC နမူနာပြင်ဆင်မှုအတွက်အရေးကြီးသောခြေလှမ်းများ


1 ။ နမူနာစုဆောင်းခြင်း


နမူနာပြင်ဆင်မှုအတွက်ပထမအဆင့်မှာသင်၏နမူနာကိုမှန်ကန်စွာစုဆောင်းရန်ဖြစ်သည်။ ၎င်းတွင် -

သန့်ရှင်းတဲ့ကွန်တိန်နာကိုသုံးပါ။ညစ်ညမ်းမှုကိုရှောင်ရှားရန်သန့်ရှင်း။ inert containers များကိုအမြဲတမ်းသုံးပါ။ ဖန်သို့မဟုတ်အရည်အသွေးမြင့်ပလပ်စတစ်ကွန်တိန်နာများကိုအကြံပြုပါသည်။

ညစ်ညမ်းမှုကိုရှောင်ကြဉ်ပါ။Sebum နှင့်အခြားအရင်းအမြစ်များမှညစ်ညမ်းမှုကိုတားဆီးရန်လက်အိတ်နှင့်သန့်ရှင်းသောကိရိယာများကိုသုံးပါ။

သင့်လျော်သောတံဆိပ်ကပ်ခြင်း -ရောနှော -ups နှင့် traceability သေချာစေရန်ရှင်းရှင်းလင်းလင်းတံဆိပ်ကပ်နမူနာ။

2 ။ နမူနာတစ်သားတည်းဖြစ်တည်ခြင်း


နမူနာတစ်သားတည်းဖြစ်တည်ခြင်းသည်တစ်သားတည်းဖြစ်တည်ခြင်းကိုသေချာစေပြီးပြန်လည်ဖော်ပြနိုင်သောရလဒ်များအတွက်အရေးကြီးသည်။ တစ်သားတည်းဖြစ်တည်ခြင်းနည်းစနစ်များပါဝင်သည်:

စက်ယန္တရားဖြစ်စဉ်: stirrer သို့မဟုတ်တစ်သားတည်းဖြစ်တည်ခြင်းကိုအသုံးပြု။ အစိုင်အခဲသို့မဟုတ် semi- အစိုင်အခဲနမူနာပေါင်းစပ်။

ultrasonic တစ်သားတည်းဖြစ်တည်ခြင်း:အရည်နမူနာတစ်ခုအတွင်းအမှုန်များပြန့်ပွားရန် ultrasound ၏ application ။

3 ။ dilution သို့မဟုတ်အာရုံစူးစိုက်မှု


မျှော်လင့်ထားသောခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများ၏မျှော်လင့်ထားသည့်အာရုံစူးစိုက်မှုပေါ် မူတည်. နမူနာများကိုရောနှောခြင်းသို့မဟုတ်အာရုံစိုက်ရန်လိုအပ်နိုင်သည်။ ၎င်းကိုအောင်မြင်နိုင်သည်။

dilution:နမူနာကိုလက်ကိုင်ဖုန်းများနှင့်တူညီသောအရည်ပျော်ပစ္စည်းကို အသုံးပြု. လိုချင်သောအာရုံစူးစိုက်မှုကိုအသုံးပြုပါ။

အာရုံစူးစိုက်မှုခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများသည်ရေငွေ့ပျံခြင်းသို့မဟုတ်အစိုင်အခဲအဆင့်ထုတ်ယူခြင်းကဲ့သို့သောနည်းစနစ်များကိုအသုံးပြုခြင်းကိုအာရုံစိုက်နိုင်သည်။

4 ။ စစ်


HPLC ကော်လံများကိုပိတ်ဆို့နိုင်သောအမှုန်များဖယ်ရှားရန်အမှုန်များဖယ်ရှားရန် filtration မရှိမဖြစ်လိုအပ်သည်။ ဘုံ filtering နည်းလမ်းများပါဝင်သည်:

အမြှေးပါး filtration:အသုံးပြု0.2μmသို့မဟုတ်0.45μm filter များအမှုန်များကိုဖယ်ရှားရန်။ ပုံမှန်အားဖြင့် polyethersulsulfone (pes) သို့မဟုတ်နိုင်လွန်စစ်ထုတ်သန်းများကိုအသုံးပြုသည်။

ဆန့်ကျင်:မြင့်မားသောအမှုန်အကြောင်းအရာနှင့်အတူနမူနာများအတွက်ပိုကြီးတဲ့ pore အရွယ်အစား filter မှတဆင့် prefultration ကပိတ်ဆို့ခြင်းတားဆီးနိုင်ပါတယ်။


Filings filings နှင့် ပတ်သက်. မကြာခဏမေးလေ့ရှိသောမေးခွန်း 50 သည်ဤအချိန်သည်သတင်းအချက်အလက်များကိုစစ်ဆေးရန်သေချာပါစေ။ "ပြွတ် filter" ၏ခေါင်းစဉ်ကိုမကြာခဏမေးလေ့ရှိသောမေးခွန်း 50

5 ။ နမူနာတည်ငြိမ်မှု


ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းကိုပျက်စီးခြင်းမှကာကွယ်ရန်သင်၏နမူနာကိုတည်ငြိမ်စေရန်စဉ်းစားပါ။

PH ညှိနှိုင်းမှု:PH ကိုချိန်ညှိခြင်းအချို့ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကိုတည်ငြိမ်စေသည်။ ဥပမာအားဖြင့်, အက်ဆစ်ဒြပ်ပေါင်းများသည်ပျက်စီးခြင်းကိုကာကွယ်ရန်အက်စစ်ဓာတ်များလိုအပ်နိုင်သည်။

ထပ်တလဲရှင်များတည်ငြိမ်မှုများသို့မဟုတ်တာရှည်ခံမှုများကိုထည့်သွင်းခြင်းမှာသိုလှောင်ခြင်းနှင့်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းအတွင်းနမူနာသမာဓိကိုထိန်းသိမ်းရန်ကူညီနိုင်သည်။

6 ။ solvent ရွေးချယ်ရေး


သင်၏နမူနာကိုဖျက်သိမ်းရန်နှင့်သင်၏ hplc စနစ်နှင့်လိုက်ဖက်နိုင်စေရန်မှန်ကန်သောအရည်ပျော်ပစ္စည်းကိုရွေးချယ်ရန်အရေးကြီးသည်။ အောက်ပါတို့ကိုသုံးသပ်ကြည့်ပါ -

အရည်ပျော်ပစ္စည်း polarity:ပြည့်စုံသောဖျက်သိမ်းမှုရရှိရန်အရည်ပျော်ပစ္စည်းသည်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း၏ polarity နှင့်ကိုက်ညီရမည်။

Mobile Phase Compatibility: ဖြစ်နိုင်ချေရှိသော 0 င်ငွေကိုလျှော့ချရန်မိုဘိုင်းအဆင့်နှင့်လိုက်ဖက်သောအရည်ပျော်ပစ္စည်းကိုသုံးပါ။



7 ။ စံချိန်စံညွှန်းများပြင်ဆင်မှု


စံကိုက်ညှိစံချိန်စံညွှန်းများပြင်ဆင်မှုသည်နမူနာတစ်ခုတွင်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကိုတွက်ချက်ရန်မရှိမဖြစ်လိုအပ်သည်။ ၎င်းတွင် -

စံကိုက်ညှိကုသမှု၏ပြင်ဆင်မှု:ခွဲစိတ်ကုသမှုအတွက်စံကိုက်ညှိပေးရန် CONIBRATE CIRVE ကိုတည်ထောင်ရန်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း၏သေးငယ်သောစူးစမ်းလေ့လာမှုများကိုကြိုတင်ပြင်ဆင်ထားပါ။

တူညီသောအရည်ပျော်ပစ္စည်းကိုသုံးပါ။ရှေ့နောက်ညီညွတ်မှုကိုထိန်းသိမ်းရန်သင်၏စံချိန်စံညွှန်းများနှင့်အလားတူအရည်ပျော်ပစ္စည်းနှင့်အခြေအနေများကိုအမြဲတမ်းပြင်ဆင်ပါ။

HPLC နမူနာပြင်ဆင်မှုအတွက်အကောင်းဆုံးအလေ့အကျင့်များ


ပုံမှန်လည်ပတ်မှုလုပ်ထုံးလုပ်နည်းများကိုလိုက်နာပါ။ရှေ့နောက်ညီညွတ်မှုနှင့်မျိုးပွားနိုင်မှုကိုသေချာစေရန်နမူနာပြင်ဆင်မှုအတွက် sops ကို sops များကိုတည်ထောင်ရန်နှင့်လိုက်နာပါ။

အရည်အသွေးမြင့်မားသောဓါတ်ကူပစ္စည်းနှင့်အရည်ကိုသုံးပါ။ညစ်ညမ်းမှုကိုလျှော့ချရန် HPLC-GRATS Solvents နှင့် High- သန့်ရှင်းရေးဓါတ်ငွေ့ကိုသုံးပါ။

သင်၏ Workspace ကိုသန့်ရှင်းစွာထားပါ။သင်၏နမူနာပြင်ဆင်မှု area ရိယာကိုသန့်ရှင်းစင်ကြယ်စေပြီးညစ်ညမ်းမှုအန္တရာယ်ကိုလျှော့ချရန်စနစ်တကျထားပါ။

အရာအားလုံးကိုမှတ်တမ်းတင်ပါ:Standard Protocols မှမည်သည့်သွေဖီမှုအပါအ 0 င်သင့်နမူနာပြင်ဆင်မှုလုပ်ထုံးလုပ်နည်းများကိုအသေးစိတ်မှတ်တမ်းများထားရှိပါ။

အတည်ပြုနည်းလမ်းများ -ယုံကြည်စိတ်ချရသောနှင့်ပြန်လည်ထုတ်လုပ်နိုင်သောရလဒ်များကိုသေချာစေရန်အတွက်နမူနာပြင်ဆင်မှုနည်းလမ်းများပုံမှန်အားဖြင့်ပုံမှန်။

ဘုံနမူနာပြင်ဆင်မှုပြ problems နာများကိုဖြေရှင်းခြင်း


ဆင်းရဲသောအထွေထွေပုံသဏ္ဌာန်အကယ်. Peaks သည်ကျယ်ပြန့်သောသို့မဟုတ်အမြီးများဖြစ်ခဲ့လျှင်၎င်းသည်မပြည့်စုံသောဖျက်သိမ်းခြင်းသို့မဟုတ်အမှုန်များရှိနေခြင်းကိုညွှန်ပြနိုင်သည်။ သင်၏နမူနာကိုနှိုက်နှိုက်ချွတ်ချွတ်ရောထွေးပြီးစီရန်သေချာစေပါ။

Ghost ထိပ်:Ghost Peaks သည်အရည်ပျော်ပစ္စည်းသို့မဟုတ်နမူနာတွင်အညစ်အကြေးများကြောင့်ဖြစ်စေ,

အားနည်းချက်နည်း:အကယ်. sensitivity သည်နိမ့်ကျပါကသင်၏ထုတ်ယူနည်းကိုပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းသို့မဟုတ်သင်၏ arealte ၏အာရုံစူးစိုက်မှုကိုတိုးမြှင့်ပါ။

ကော်လံပိတ်ဆို့ခြင်းမကြာခဏပိတ်ဆို့ခြင်းသည်သင်၏နမူနာများ၌များစွာသောအမှုန်များပါ 0 င်ခြင်းသို့မဟုတ်လုံလောက်စွာစစ်ထုတ်ခြင်းမခံရဟုညွှန်ပြနိုင်သည်။ သင်၏ filtration process ကိုပြန်လည်အကဲဖြတ်ခြင်းနှင့် Pre-filtration စဉ်းစားပါ။

ကိုက်ညီမှုရလာသောရလဒ်များရလဒ်များအတွက်အပြောင်းအလဲသည်ကိုက်ညီမှုနမူနာပြင်ဆင်မှုမှဖြစ်ပေါ်နိုင်သည်။ လုပ်ထုံးလုပ်နည်းများအားလုံးကိုစံသတ်မှတ်ပြီးနမူနာပြင်ဆင်မှုတွင်ပါ 0 င်သော 0 န်ထမ်းများကိုလေ့ကျင့်သင်ကြားထားကြောင်းသေချာစေပါ။

အဆင့်မြင့်နမူနာပြင်ဆင်မှုနည်းစနစ်များ


ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတောင်းဆိုမှုများတိုးပွားလာသည်နှင့်အမျှဓာတ်ခွဲခန်းများသည်စွမ်းဆောင်ရည်နှင့်တိကျမှန်ကန်မှုကိုတိုးတက်စေရန်ပိုမိုအဆင့်မြင့်နမူနာပြင်ဆင်မှုနည်းစနစ်များကိုကျင့်သုံးကြသည်။

1 ။ အစိုင်အခဲအဆင့်ကိုထုတ်ယူခြင်း (SPE)


SPE သည်ကျယ်ပြန့်စွာအသုံးပြုသော technious တစ်ခုဖြစ်သည်။ ၎င်းတွင်အညစ်အကြေးများကိုဖြတ်သန်းရန်ခွင့်ပြုစဉ်ပစ်မှတ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကိုဆက်လက်ထိန်းသိမ်းထားသောအစိုင်အခဲစနမူနာကို ဖြတ်. အရည်နမူနာကိုဖြတ်သန်းခြင်းပါဝင်သည်။

2 ။ အရည် - အရည်ထုတ်ယူခြင်း (lle)


Lle သည်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများကိုသူတို့၏ပျော်ဝင်မှုအခြေအနေနှစ်ခုတွင် အခြေခံ. ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းကိုခွဲခြားထားသည့်နည်းစနစ်တစ်ခုဖြစ်သည်။ ဤနည်းလမ်းသည်ဒြပ်ပေါင်းများကိုမတူကွဲပြားသော polarities များနှင့်ခွဲထုတ်ခြင်းတွင်ထိရောက်မှုရှိသည်။


3 ။ Qechers (မြန်မြန်ဆန်ဆန်, စျေးပေါ, ထိရောက်သော, ထိရောက်သော, ကြမ်းတမ်းပြီးလုံခြုံမှု)


Equipers သည်ထုတ်ယူခြင်းနှင့်သန့်ရှင်းရေးပစ္စည်းများကိုပေါင်းစပ်ခြင်းနှင့်သန့်ရှင်းရေးပစ္စည်းများကိုပေါင်းစပ်ခြင်း,


4 ။ အလိုအလျောက်


dilution, filtration နှင့်အနည်းဆုံးလူသားတို့ဝင်ရောက်စွက်ဖက်မှုကဲ့သို့သောလုပ်ငန်းများကိုလုပ်ဆောင်နိုင်သည့်အလိုအလျောက်နမူနာပြင်ဆင်ခြင်းစနစ်များဖြင့်လှုံ့ဆော်မှုနှင့်ပြန်လည်ထုတ်လွှင့်မှုကိုသိသိသာသာတိုးတက်စေနိုင်သည်။


HPLC နမူနာပြင်ဆင်မှုအကြောင်းပိုမိုသိလိုပါက ကျေးဇူးပြု. ဤဆောင်းပါးကိုစစ်ဆေးပါ။ အကောင်းဆုံးရလဒ်များအတွက် HPLC နမူနာပြင်ဆင်မှုဖြေရှင်းနည်းများ

ကောက်ချက်


HPLC နမူနာပြင်ဆင်မှုသည်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုရလဒ်များ၏တိကျမှန်ကန်မှုနှင့်ယုံကြည်စိတ်ချရမှုကိုသိသိသာသာသက်ရောက်နိုင်သည့်အရေးပါသောခြေလှမ်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ သင့်လျော်သောနည်းစနစ်များကို အသုံးပြု. အကောင်းဆုံးသောအလေ့အကျင့်များကိုအောက်ပါအတိုင်းလိုက်နာခြင်းအားဖြင့်, HPLC ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၏ထိရောက်မှုနှင့်ထိရောက်မှုကိုပိုမိုတိုးတက်စေလိမ့်မည်။ သင့်လျော်သောနမူနာပြင်ဆင်မှုသည်ရလဒ်များ၏အရည်အသွေးကိုတိုးတက်စေရုံသာမကရေရှည်ယုံကြည်စိတ်ချရမှုနှင့်စွမ်းဆောင်ရည်ကိုသေချာစေသည့် HPLC စနစ်ကိုလည်းကာကွယ်ပေးသည်။

မေးခြင်း