उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमाटिलोग्राफी (HPLC) एक कुञ्जी विश्लेषणात्मक प्रविधि हो कि खेतमा प्रयोगशालाहरू, वातावरणीय विज्ञान विज्ञान, र खाद्य सुरक्षा। HPLC विश्व भित्र, त्यहाँ दुई मुख्य कोटीहरू छन्: विश्लेषणात्मक HPLC र तयारी एचपीएलसी। जबकि दुबै प्रविधिले समान सिद्धान्तहरूलाई छुट्टै क्षेत्रीयले प्रयोग गर्दछ, तिनीहरू बिभिन्न उद्देश्यका लागि प्रयोग गरिन्छ र फरक अपरेटिंग प्यारामिटरहरू हुन्छन्। यो ब्लगले विश्लेषणात्मक र कतारिवन एचपीएलबीबीचको भिन्नता पत्ता लगाउनेछ, अपरेशन, उपकरण र अनुप्रयोगहरूको मापन, उनीहरूको उद्देश्य, मापन, को मापन,।
HPLC VINTS को बारे मा पूर्ण सूजन जान्न चाहानुहुन्छ, कृपया यो लेख जाँच गर्नुहोस्: HPLC VINITS को विश्वकोश
सैताधिकार HPLC बुझ्नुहोस्
परिभाषा र उद्देश्य
विश्लेषणात्मक HPLC मुख्य रूपमा नमूनामा विभाजनहरू र पहिचान गर्दै एक नमूनामा कम्पाउन्डहरू पहिचान गर्दै। प्राथमिक लक्ष्य भनेको मिश्रणमा उपस्थित घटकहरूको बारेमा गुणात्मक र मात्रात्मक जानकारी प्राप्त गर्नु हो। विश्लेषणात्मक HPLC प्राय: प्रयोग गरिन्छ:
गुणात्मक विश्लेषण: नमूनाको कम्पोनेन्टहरू पहिचान गर्दै।
मात्रात्मक विश्लेषण: नमूनामा एक विशिष्ट यौगिकको एकाग्रता निर्धारण गर्दै।
अपरेशनको स्केल
विश्लेषणात्मक HPLC ले सानो मापनमा सञ्चालन गर्दछ, सामान्यतया माइक्रोलीटर नमूना ईन्जेक्शन समावेश गर्दछ। भोल्युमहरू प्रयोग गरिएको सामान्यतया 1 देखि 100 मा 100 मा, बहु नमूनाहरू एकल रनमा विश्लेषण गर्न अनुमति दिँदै। यो सानो स्केल नियमित परीक्षण र गुणवत्ताको नियन्त्रणको लागि आदर्श छ।
स्तम्भ आकार र कण आकार
विश्लेषणात्मक HPLC मा प्रयोग गरिएका स्तम्भहरू प्राय: व्यासको व्यासमा सानो हुन्छन्, सामान्यतया करिब 4..6 मिमी, र सानो स्टेशनरी चरणको कणहरू (-5--5 μm) यस कन्फिगरेसनले उच्च रिजोलुसन र कुशल यौगिक विभाजनको लागि अनुमति दिन्छ, विस्तृत विश्लेषणका लागि उपयुक्त।
पत्ता लगाउने तरिका
विश्लेषणात्मक HPLC UV-दृश्यात्मक, उम्पान, र मास स्पेक्ट्रोमेटी सहित धेरै किसिमका प्रकारहरू पत्ता लगाउने प्रकारहरू प्रयोग गर्दछ। डिटिटोटरको छनौट विश्लेषणको प्रकृति र विश्लेषणको विशिष्ट आवश्यकताहरूको प्रकृतिमा निर्भर गर्दछ। गैर-विनाशकारी डिटेक्टरहरू प्राय: महत्त्वपूर्ण नोक्सान बिना विश्लेषण गर्न सकिन्छ भन्ने कुरा निश्चित गर्न प्रयोग गरिन्छ।
HPLC VINTS को बारेमा 50 जवाफहरू जान्न चाहानुहुन्छ, कृपया यो लेख जाँच गर्नुहोस्: Every0 प्राय: अक्सर एचपीएलसी शीशीहरूमा प्रश्नहरू सोधे
तयारी एचपीएलसी बुझाइ
परिभाषा र उद्देश्य
अर्कोतर्फ प्रोपृतियत HPLC, अर्कोतर्फ, मिश्रणबाट विशेष यौगिकहरू अलग र शुद्ध गर्ने लक्ष्य राख्दछ। मुख्य लक्ष्य भनेको अर्को विश्लेषण वा प्रयोगको लागि लक्ष्य कम्पाउन्डको पर्याप्त मात्रा अलग गर्नु हो। अगाडिको तयारी
HPLC सामान्य अनुप्रयोगहरूको लागि सामान्य रूपमा प्रयोग गरिन्छ:
कम्पाउन्ड एक्लोसन: अनुसन्धान वा औद्योगिक अनुप्रयोगहरूको लागि विशिष्ट यौगिकहरूको निकास र शुद्धीकरण।
नमूना तयारी: पछिल्लो विश्लेषण वा गठनको लागि नमूनाहरूको तयारी।
अपरेशनको स्केल
प्रोपेटेन्ट एचपीएलसी एयाक्लीटिकल HPLC भन्दा ठूलो मापनमा प्रदर्शन गरिन्छ। नमूना भोल्युमहरू केहि मिलिलिटरहरू देखि धेरै लिलिटरसम्मको लक्षित कम्पाउन्डको अपेक्षित उत्पादनमा निर्भर गर्दछ। यो ठूलो मात्राले थप प्रयोगको लागि संकलन गर्न शुद्ध सामग्रीको पर्याप्त मात्रा अनुमति दिन्छ।
स्तम्भ आकार र कण आकार
कक्षुनिभ HPLC को लागि प्रयोग गरिएका स्तम्भहरू उल्लेख्य रूपमा ठूलो छन्, सामान्यतया 20 मिमीसम्म 100 मा 100 मिमी वा व्यासमा ठूलो हुन्छन्। स्तम्भहरू ठूलो स्थिर चरणको चरणहरू (सामान्यतया 10-20 μm) प्रवाह दरहरू बढाउन र ठूला नमूना भोल्युमहरू समाहित गर्न आउँदछन्। यो डिजाइनले पछाडि दबाब कम गर्न र यौगिकहरू यौगिकहरू प्राप्त गर्न मद्दत गर्दछ।
पत्ता लगाउने तरिका
प्रोपेटेरिक HPLC मा, पत्ता लगाउने तरिकाहरू विश्लेषणात्मक HPLC मा प्रयोग हुने भन्दा फरक हुन सक्छ। जबकि गैर-विनाशकारी डिटेक्टरहरू अझै साझा गर्छन्, तयारी प्रणालीहरू अक्सर डिटेस्ट प्रोफाइलमा आधारित अंशहरू स collecting ्कलन गर्न सक्षम छन्। यसले विशेष यौगिकहरूलाई अट्न अनुमति दिन्छ किनकि उनीहरू स्तम्भबाट फुट्छन्।
क्रोमेटोग्राफी आर्द्रहरूको अनुप्रयोगको बारेमा बढि जान्न चाहानुहुन्छ, कृपया यो लेख जाँच गर्नुहोस्:HPLC VINITS को लागी पाँच सफाई विधिहरू
विश्लेषणात्मक र तयारी एचपीएलसीबीच मुख्य भिन्नताहरू
|
विशेषता
|
विश्लेषणात्मक HPLC
|
Parivated HPLC
|
|
लक्य
|
गुणात्मक र मात्रात्मक विश्लेषण
|
कम्पाउन्डस र यौगिकहरूको शुद्धिकरण
|
|
अपरेशनको स्केल
|
सानो-स्केल (μL खण्डहरू)
|
ठूला-स्केल (एमएल एलएचएस आवश्यक छ)
|
|
स्तम्भ आयाम
|
सानो व्यास (6.6 मिमी)
|
ठूलो व्यास (20-100 मिमी)
|
|
चालू आकार
|
सानो कणहरू (-5--5 μm)
|
ठूला कणहरू (10-20 μm)
|
|
प्रवाह दरहरू
|
तल्लो प्रवाह दरहरू (0.1-5- m मिलि \ / मिनेट)
|
उच्च प्रवाह दरहरू (10-200 मिली \ / मिनेट)
|
|
पत्ता लगाउने तरिका
|
गैर-विनाशकारी डिटेक्टरहरू (UV, MS)
|
फ्रेसन संग्रह ईनस्टिस्ट प्रोफाइलमा आधारित
|
विश्लेषणात्मक र तयारी HPLC बीच छनौट गर्दै
जब विश्लेषणात्मक र कतारिने एचपीएलसी बीच छनौट, निम्न कारकहरू विचार गर्नुहोस्:
विश्लेषणको उद्देश्य: निर्धारण गर्नुहोस् कि प्राथमिक लक्ष्य भनेको क्वालिटीभरि प्रकाशित र मात्रात्मक विश्लेषणको साथ विश्लेषण गर्दछ वा अधिक प्रयोगको लागि विशिष्ट यौगिकहरू अलग गर्नुहोस्।
नमूनाको मात्रा: नमूनाको मात्रा उपलब्ध गर्दछ। यदि नमूनाको थोरै मात्रा उपलब्ध छ भने, विश्लेषणात्मक HPLC अधिक उपयुक्त हुन सक्छ। यसको विपरित, यदि नमूना को एक ठूलो रकम आवश्यक छ, अग्रिम HPLC राम्रो विकल्प हो।
आवश्यक शुद्धता र उपज: लक्षित कम्पाउन्डको आवश्यक शुद्धता र उपजलाई विचार गर्नुहोस्। प्रोपेटेन्ट एचपीएलसीले एक विशिष्ट यौगिकको पुन: प्राप्ति अधिकतम गर्न सक्दछ, जबकि विश्लेषणात्मक HPLC नमूना को रचना को बारे मा विस्तृत जानकारी प्रदान गर्न को लागी।
संसाधन र उपकरण: उपकरण र बजेट सहित उपलब्ध स्रोतहरू मूल्यांकन गर्नुहोस्। कगरिएको एचपीएलसी प्रणालीहरू अधिक महँगो हुन्छन् र उपकरण र अपरेटिंग लागतमा अधिक लगानी आवश्यक पर्दछ।
HEPLC नमूना तयारीको मास्टर गर्न रुचि? यो लेख जाँच गर्नुहोस्:HPLC नमूना उत्तम परिणामहरू उत्तम परिणामहरूको लागि।
निष्कर्ष
दुबै विश्लेषणात्मक र कतारिन एचपीएलसी क्रोमाटोग्राफीको क्षेत्रमा मूल्यवान प्रविधिहरू छन्, र प्रत्येकमा अन्वेषक र उद्योगको आवश्यकताहरूमा विभिन्न प्रयोगहरू छन्। एक्सलटिकल HPLC विस्तृत विश्लेषणको लागि आदर्श हो र थप अनुप्रयोगहरूको लागि विशेष यौगिकहरू अलग गर्न र प्रतिगरि दक्ष हरूको लागि आवश्यक HPLC आवश्यक छ। यी दुई प्रविधिहरू बीचको भिन्नता बुझेर अन्वेषकहरू अनुसन्धान भएका निर्णयहरू अनुकूलन गर्न, र उनीहरूको विश्लेषणमा सही र भरपर्दो परिणामहरू प्राप्त गर्न मद्दत गर्दछ। एचपीएलसीसी टेक्नोलोजी अघि बढ्दैछ भने विश्लेषणात्मक र तयारीको विधिहरू सबै प्रकारको सफल वैज्ञानिक अनुसन्धानको अभिन्न अंग रहनेछ।
अंग्रेजी
चीनियाँ
