HPLC vs. LCMS: Które wybrać? 5 kluczowych punktów do rozważenia
Dom
Aktualności
kategorie
Zapytanie

HPLC vs. LCMS: Który należy wybrać? 5 punktów

22 sierpnia 2024
Wysoko wydajna chromatografia cieczowa (HPLC) i spektrometria chromatografii cieczowej (LCMS) to dwie potężne techniki analityczne stosowane w różnych dziedzinach, w tym farmaceutyki, nauki o środowisku i nauki o życiu. Podczas gdy obie metody obejmują rozdzielenie i analizę związków, ich zasady, funkcje i zastosowania są bardzo różne. Ten post na blogu porównuje HPLC i LCMS, koncentrując się na ich kluczowych różnicach i zaletach każdej techniki.

Zasada działania


HPLC


HPLC to technika chromatograficzna, która oddziela związki na podstawie ich interakcji z fazami stacjonarnymi i ruchowymi. W HPLC ciekła faza mobilna jest pompowana przez kolumnę wypełnioną fazą stacjonarną, która zwykle składa się z małych cząstek krzemionki lub polimerów. Gdy do systemu wprowadza się mieszanina próbki, komponenty są oddzielone na podstawie ich powinowactwa do fazy stacjonarnej. Związki, które silniej oddziałują z fazą stacjonarną, elutują wolniej, podczas gdy związki, które wchodzą w interakcje mniej szybciej. Oddzielone związki są następnie wykrywane przy użyciu różnych detektorów, takich jak detektory UV-VIS, fluorescencja lub współczynniki załamania światła.

Chcesz dowiedzieć się więcej o aplikacjach fiolków chromatograficznych, sprawdź ten artykuł:15 Zastosowania fiolków chromatograficznych w różnych dziedzinach


LCMS


LCMS łączy możliwości separacji HPLC z możliwościami analizy masy spektrometrii mas. W LCMS próbki najpierw oddzielane są za pomocą HPLC, tak jak w konwencjonalnym HPLC. Jednak zamiast wykryć przez konwencjonalny detektor, eluowane związki są wprowadzane do spektrometru masowego. Spektrometr masowy jonizuje związki i mierzy ich stosunek masy do ładowania, dostarczając szczegółowych informacji o masie cząsteczkowej i strukturze analitu. Ta kombinacja separacji i spektrometrii mas zapewnia większą czułość i swoistość niż sam HPLC.


Mechanizm separacji


HPLC:HPLC wykorzystuje wysokie ciśnienie, aby przepchnąć płynną fazę mobilną przez zapakowaną kolumnę zawierającą fazę stacjonarną. Związki są oddzielone na podstawie ich różnicowych interakcji z fazą stacjonarną, co powoduje precyzyjne i wydajne separacje.

LCMS:LCMS łączy fizyczne możliwości separacji HPLC z możliwościami spektrometrii masowej spektrometrii mas (MS). Składnik chromatografii cieczowej oddziela związki, podczas gdy spektrometr mas mierzy stosunek masy do ładowania gatunków jonizowanych.

Czułość i selektywność

HPLC:HPLC ma dobrą czułość i selektywność, szczególnie w połączeniu z zaawansowanymi detektorami, takimi jak detektory macierzy UV, fluorescencji lub macierzy diod. Jednak samo HPLC może nie zapewniać odpowiedniej swoistości dla złożonych próbek.

LCMS:LCMS ma doskonałą czułość i selektywność w porównaniu do HPLC. Spektrometry masowe mogą dokładnie identyfikować i określić ilościowe związki na podstawie ich unikalnych stosunków masy do ładowania, nawet w złożonych matrycach. To sprawia, że ​​LCM jest szczególnie przydatne do analizy związków śladowych i potwierdzania tożsamości nieznanych substancji.


Przygotowanie próbki


HPLC:Przygotowanie próbki do HPLC zazwyczaj obejmuje rozcieńczenie, filtrację lub proste techniki ekstrakcji. Próbki nie muszą być odparowane, więc HPLC jest odpowiednia dla szerokiego zakresu związków, w tym substancji polarnych i nielotnych.


LCMS:Przygotowanie próbki do LCM jest podobne do tego dla HPLC, ale mogą być wymagane dodatkowe kroki w celu zapewnienia kompatybilności ze spektrometrem masowym. Na przykład mogą być wymagane lotne bufory lub dodatki w celu zwiększenia jonizacji i zapobiegania tłumieniu jonów.

Zastosowania


HPLC:HPLC jest szeroko stosowany do analizy farmaceutyków, żywności i próbek środowiskowych. Jest szczególnie skuteczny w oddzielaniu związków i kwantyfikacji w złożonych mieszaninach, takich jak zanieczyszczenia narkotyków, dodatki żywności i pozostałości pestycydów.

LCMS:LCMS ma szeroki zakres aplikacji, w tym:

Analiza farmaceutyczna: stosowany w odkrywaniu leków, rozwoju i kontroli jakości.

Proteomika i metabolomika: stosowane do identyfikacji i kwantyfikacji białek i metabolitów w próbkach biologicznych.

Analiza środowiska: użyta do wykrywania śladowych zanieczyszczeń w wodzie, glebie i próbkach powietrza.

Ciekawe roli certyfikowanych fiolek HPLC w zapewnieniu dokładnej analizy próbek? Przeczytaj ten artykuł: Znaczenie certyfikowanych fiolek HPLC do dokładnej analizy próbek

Wniosek

HPLC i LCM są potężnymi technikami analitycznymi o własnych mocnych stronach i ograniczeniach. Wybór między nimi zależy od konkretnych wymagań analizy, takich jak czułość, selektywność, złożoność próbki i dostępne zasoby.

HPLC jest dobrym wyborem do rutynowej analizy znanych związków w stosunkowo prostych matrycach, w których koszt i łatwość użytkowania są ważnymi czynnikami. Z drugiej strony LCMS jest preferowaną techniką analizy złożonych próbek, identyfikacji nieznanych związków i osiągania detekcji poziomu ultra-trupa.

W miarę postępów technologii integracja HPLC i LCMS odgrywa coraz ważniejszą rolę w zaspokajaniu ewoluujących potrzeb chemii analitycznej i zapewnieniu wysokiej jakości wyników w różnych zastosowaniach.

Zapytanie