HPLC vs. LCMS: Qual você deve escolher? 5 pontos

Princípio da operação

HPLC

O HPLC é uma técnica cromatográfica que separa os compostos com base em suas interações com as fases estacionárias e móveis. Na HPLC, uma fase móvel líquida é bombeada através de uma coluna preenchida com uma fase estacionária, que geralmente é composta por pequenas partículas de sílica ou polímeros. Quando uma mistura de amostra é introduzida no sistema, os componentes são separados com base em sua afinidade pela fase estacionária. Os compostos que interagem mais fortemente com a fase estacionária eluem mais lentamente, enquanto os compostos que interagem menos fortemente eluem mais rapidamente. Os compostos separados são então detectados usando uma variedade de detectores, como UV-Vis, fluorescência ou detectores de índice de refração.

Deseja saber mais sobre as aplicações dos frascos de cromatografia, verifique este artigo:15 Aplicações de frascos de cromatografia em diferentes campos

LCMS

O LCMS combina os recursos de separação do HPLC com as capacidades de análise de massa da espectrometria de massa. No LCMS, as amostras são primeiro separadas usando HPLC, assim como no HPLC convencional. No entanto, em vez de serem detectados por um detector convencional, os compostos eluídos são introduzidos em um espectrômetro de massa. O espectrômetro de massa ioniza os compostos e mede sua taxa de massa / carga, fornecendo informações detalhadas sobre o peso molecular e a estrutura do analito. Essa combinação de separação e espectrometria de massa fornece maior sensibilidade e especificidade do que a HPLC isolada.

Mecanismo de separação

HPLC:O HPLC usa alta pressão para empurrar uma fase móvel líquida através de uma coluna embalada contendo uma fase estacionária. Os compostos são separados com base em suas interações diferenciais com a fase estacionária, resultando em separações precisas e eficientes.

LCMS:O LCMS combina os recursos de separação física do HPLC com os recursos de espectrometria de massa da espectrometria de massa (MS). O componente de cromatografia líquida separa os compostos, enquanto o espectrômetro de massa mede a razão de massa / carga das espécies ionizadas.

Sensibilidade e seletividade

HPLC:O HPLC possui boa sensibilidade e seletividade, especialmente quando combinadas com detectores avançados como UV-Vis, fluorescência ou detectores de matriz de diodos. No entanto, o HPLC sozinho pode não fornecer especificidade adequada para amostras complexas.

LCMS:O LCMS possui sensibilidade e seletividade superiores em comparação com HPLC. Os espectrômetros de massa podem identificar e quantificar com precisão os compostos com base em suas taxas exclusivas de massa / carga, mesmo em matrizes complexas. Isso torna os LCMs particularmente úteis para analisar compostos rastreadores e confirmar a identidade de substâncias desconhecidas.

HPLC:A preparação da amostra para HPLC normalmente envolve diluição, filtração ou técnicas de extração simples. As amostras não precisam ser evaporadas; portanto, a HPLC é adequada para uma ampla gama de compostos, incluindo substâncias polares e não voláteis.

LCMS:A preparação da amostra para LCMS é semelhante à do HPLC, mas podem ser necessárias etapas adicionais para garantir a compatibilidade com o espectrômetro de massa. Por exemplo, buffers ou aditivos voláteis podem ser necessários para melhorar a ionização e impedir a supressão de íons.

Aplicações

HPLC:A HPLC é amplamente utilizada para a análise de produtos farmacêuticos, alimentos e amostras ambientais. É particularmente eficaz para separar e quantificar compostos em misturas complexas, como impurezas de drogas, aditivos alimentares e resíduos de pesticidas.

LCMS:O LCMS possui uma ampla gama de aplicações, incluindo:

Análise farmacêutica: usada em descoberta de medicamentos, desenvolvimento e controle de qualidade.

Proteômica e metabolômica: usado para identificar e quantificar proteínas e metabólitos em amostras biológicas.

Análise Ambiental: Usado para detectar traços contaminantes em amostras de água, solo e ar.

Curioso sobre o papel dos frascos de HPLC certificados para garantir uma análise precisa da amostra? Leia este artigo: A importância dos frascos de HPLC certificados para análise de amostra precisa

Conclusão

HPLC e LCMs são poderosas técnicas analíticas com seus próprios pontos fortes e limitações. A escolha entre os dois depende dos requisitos específicos da análise, como sensibilidade, seletividade, complexidade da amostra e recursos disponíveis.

A HPLC é uma boa escolha para a análise de rotina de compostos conhecidos em matrizes relativamente simples, onde o custo e a facilidade de uso são fatores importantes. O LCMS, por outro lado, é a técnica preferida para analisar amostras complexas, identificar compostos desconhecidos e alcançar a detecção de nível de ultra-rastreamento.

À medida que a tecnologia continua avançando, a integração de HPLC e LCMS desempenhará um papel cada vez mais importante no atendimento às necessidades em evolução da química analítica e garantindo resultados de alta qualidade em várias aplicações.