Аналитическое и препаративный ВЭЖХ: понимание ключевых различий
Знание
категории
Запрос

В чем разница между аналитическим и препаративным ВЭЖХ?

30 августа 2024 года

Высокопроизводительная жидкая хроматография (ВЭЖХ) является ключевым аналитическим методом, используемым в лабораториях в таких разнообразных областях, как фармацевтические препараты, экологические науки и безопасность пищевых продуктов. В мире ВЭЖХ есть две основные категории: аналитический ВЭЖХ и препаративный ВЭЖХ. В то время как оба метода используют сходные принципы для разделения соединений, они используются для разных целей и имеют разные рабочие параметры. В этом блоге будут изучаться различия между аналитическим и подготовительным ВЭЖХ, включая их цель, масштаб работы, оборудование и приложения.

Хотите узнать полную информацию о флаконах ВЭЖХ, пожалуйста, проверьте эту статью: Энциклопедия флаконов ВЭЖХ

Понимание аналитического ВЭЖХ


Определение и цель

Аналитический ВЭЖХ фокусируется в первую очередь на разделении и идентификации соединений в образце. Основная цель - получить качественную и количественную информацию о компонентах, присутствующих в смеси. Аналитический ВЭЖХ часто используется для:

Качественный анализ: выявление компонентов образца.

Количественный анализ: определение концентрации специфического соединения в образце.


Масштаб работы

Аналитический ВЭЖХ работает в меньшем масштабе, обычно с участием инъекций образца микролитра. Используемые объемы обычно находятся в диапазоне от 1 до 100 мкл, что позволяет анализировать несколько образцов за один запуск. Этот небольшой масштаб идеально подходит для рутинного тестирования и контроля качества.


Размер столбца и размер частиц

Колонны, используемые в аналитическом ВЭЖХ, обычно малы в диаметре, обычно около 4,6 мм и упаковываются небольшими стационарными фазами частицами (3-5 мкм). Эта конфигурация обеспечивает высокое разрешение и эффективное составное разделение, подходящее для подробного анализа.


Методы обнаружения

Аналитический ВЭЖХ использует различные методы обнаружения, в том числе ультрафиолетовую, флуоресцентную и масс-спектрометрию. Выбор детектора зависит от характера аналита и конкретных требований анализа. Неразрушающие детекторы часто используются для обеспечения того, чтобы выборка была проанализирована без значительных потерь.

Хотите узнать 50 ответов о флаконах ВЭЖХ, пожалуйста, проверьте эту статью: 50 наиболее часто задаваемые вопросы о флаконах ВЭЖХ


Понимание подготовительного ВЭЖХ


Определение и цель

Подготовительный ВЭЖХ, с другой стороны, стремится отделить и очистить определенные соединения от смеси. Основная цель состоит в том, чтобы выделить достаточное количество целевого соединения для дальнейшего анализа или использования. Подготовка


ВЭЖХ обычно используется для следующих приложений:

Составной выделение: извлечение и очистка конкретных соединений для исследований или промышленных применений.

Подготовка образца: подготовка образцов для последующего анализа или состава.


Масштаб операций

Препаративный ВЭЖХ выполняется в более широком масштабе, чем аналитический ВЭЖХ. Объем образцов может варьироваться от нескольких миллилитров до нескольких литров, в зависимости от ожидаемого выхода целевого соединения. Этот более крупный масштаб позволяет собирать достаточное количество очищенного материала для дальнейшего использования.


Размер столбца и размер частиц

Колонны, используемые для препаративного ВЭЖХ, значительно больше, как правило, от 20 до 100 мм или больше в диаметре. Колонны упакованы с более крупными частицами стационарной фазы (обычно 10-20 мкм) для увеличения скорости потока и размещения больших объемов выборки. Эта конструкция помогает снизить обратное давление и достичь эффективного разделения соединений.


Методы обнаружения

При препаративном ВЭЖХ методы обнаружения могут отличаться от тех, которые используются в аналитическом ВЭЖХ. В то время как неразрушающие детекторы все еще распространены, препаративные системы часто используют детекторы, которые способны собирать фракции на основе профиля элюирования. Это позволяет выделить конкретные соединения, когда они элюируют из столбца.

Хотите узнать больше о применении хроматографических флаконов, проверьте эту статью:Пять методов очистки для флаконов ВЭЖХ


Ключевые различия между аналитическим и препаративным ВЭЖХ

Особенность

Аналитический ВЭЖХ

Подготовительный ВЭЖХ

Цель

Качественный и количественный анализ

Изоляция и очистка соединений

Масштаб работы

Мелкомасштабные (мкл объемов)

Крупномасштабные (ML до L томов)

Размеры столбца

Меньший диаметр (4,6 мм)

Больший диаметр (20-100 мм)

Размер частиц

Меньшие частицы (3-5 мкм)

Большие частицы (10-20 мкм)

Скорости потока

Более низкие скорости потока (0,1-5 мл \ / мин)

Более высокие скорости потока (10-200 мл \ / мин)

Методы обнаружения

Неразрушающие детекторы (ультрафиолетовое ультрафиолетовое мс)

Сбор фракций на основе профиля элюирования


Выбор между аналитическим и препаративным ВЭЖХ


При выборе между аналитическим и препаративным ВЭЖХ рассмотрите следующие факторы:

Цель анализа: Определите, является ли основной целью качественно и количественно анализировать соединения или выделить конкретные соединения для дальнейшего использования.


Количество выборки: оцените количество доступного образца. Если доступно небольшое количество выборки, аналитический ВЭЖХ может быть более подходящим. И наоборот, если требуется большое количество выборки, препаративный ВЭЖХ является лучшим выбором.


Требуемая чистота и урожайность: рассмотрим необходимую чистоту и урожайность целевого соединения. Подготовительный ВЭЖХ направлен на максимизацию восстановления конкретного соединения, в то время как аналитический ВЭЖХ фокусируется на предоставлении подробной информации о составе образца.


Ресурсы и оборудование: оценить доступные ресурсы, включая оборудование и бюджет. Подготовительные системы ВЭЖХ, как правило, более дороги и требуют большего инвестиций в оборудование и эксплуатационные расходы.


Заинтересованы в освоении приготовления образца ВЭЖХ? Проверьте эту статью:Решения для приготовления образца ВЭЖХ для достижения наилучших результатов.


Заключение

Как аналитические, так и препаративные ВЭЖХ являются ценными методами в области хроматографии, и каждый из них имеет различное использование в зависимости от потребностей исследователей и промышленности. В то время как аналитический ВЭЖХ идеально подходит для подробного анализа и количественного определения соединений, препаративный ВЭЖХ имеет важное значение для изоляции и очистки конкретных соединений для дальнейших применений. Понимание различий между этими двумя методами поможет исследователям принимать обоснованные решения, оптимизировать свои рабочие процессы и получить точные и надежные результаты в своих анализах. Поскольку технология ВЭЖХ продолжает продвигаться, как аналитические, так и подготовительные методы останутся неотъемлемой частью успешных научных исследований всех видов.

Расследование