جديد تجزياتي ليبارٽري ۾، ڪروميٽوگرافي هڪ معمولي پروٽوڪول کان وڌيڪ آهي. اهو ماليڪيولر رابطي جو هڪ پيچيده رقص آهي. ڇا توهان دواسازي جي ناپاڪيءَ جو اندازو لڳائي رهيا آهيو يا ماحولياتي آلودگي جي نشاندهي ڪري رهيا آهيو ٽريس ليول تي، توهان جي علحدگيءَ جي بنيادي فزڪس کي سمجهڻ اهو آهي جيڪو هڪ ٽيڪنيشن کي ماسٽر ڪروميٽوگرافر کان ڌار ڪري ٿو.
ليب ۾ ڪاميابي صرف اعليٰ اوزارن جي سيٽنگن مان نه ايندي آهي. اهو توهان جي طريقي جي ڪيمسٽري ۽ اعلي معيار جي استعمال جي سامان جي وچ ۾ همراه ۾ رهي ٿو جيڪو توهان جي نموني سالميت جي حفاظت ڪري ٿو. جي پيچيدگين کي نيويگيٽ ڪرڻ وارن لاء
HPLC بمقابله LC-MS: جيڪو چونڊڻ لاء
، يا غير مستحڪم بيس لائينز سان جدوجهد ڪندي، هي گائيڊ شيئر ڪري ٿو بينچ سائڊ رازن کي حاصل ڪرڻ لاءِ عالمي سطح جي ڊيٽا حاصل ڪرڻ ۽ اوزار جي اپٽائم کي وڌائڻ لاءِ.
هائيڊروفوبڪ هينڊ شيڪ کي سمجهڻ: ريورس فيز ڪروميٽگرافي ڇا آهي؟
بنيادي سوال جو جواب ڏيڻ لاءِ- ريورس فيز ڪروميٽوگرافي ڇا آهي- هڪ کي درسي ڪتاب جي تعريف کان ٻاهر ڏسڻ گهرجي. ان جي بنيادي طور تي، "پاڻيء جي خوف" (هائيڊروفوبيسيٽي) جي بنياد تي هڪ علحدگي آهي. ريورس فيز هاء پريشر مائع ڪروميٽوگرافي (RP-HPLC) ۾، اسان هڪ غير پولر اسٽيشنري مرحلو ۽ پولر موبائيل مرحلو استعمال ڪريون ٿا ماليڪيولز کي انهن جي هائيڊروفوبڪ ڪردار جي ترتيب سان.
ڪيمسٽري آف دي C18 (Octadecyl) زنجير
سڀ کان عام اسٽيشنري مرحلي ۾ سليڪا تي ٻڌل ذرات شامل آهن جيڪي C18 (octadecyl) زنجيرن سان ڳنڍيل آهن. منهنجي تجربي مان، هنن C18 زنجيرن جي کثافت ۽ سليڪا سپورٽ جو معيار توهان جي طريقي جي بي رحميءَ جو اندازو لڳائي ٿو. بنيادي مرڪب جو تجزيو ڪرڻ دوران ڪيترائي تجزيه نگار چوٽي جي ڇنڊڇاڻ کي منهن ڏين ٿا. اهو اڪثر ڪري سليڪا جي مٿاڇري تي رهجي ويل سلانول گروپن جي ڪري آهي جيڪو ناپسنديده آئن ايڪسچينج سائيٽن جي طور تي ڪم ڪري ٿو.
هن کي حل ڪرڻ لاءِ، اسان استعمال ڪريون ٿا آخر-ڪيپ ٿيل ڪالم، جتي ننڍڙا سائلين انهن فعال سائيٽن کي ”ماسڪ“ ڪندا آهن. بهرحال، جيتوڻيڪ بهترين ڪالمن هڪ غريب انجڻ کي درست نٿو ڪري سگهي. جيڪڏهن توهان جي ڪروميٽوگرافڪ چوٽي بگڙيل نظر اچي ٿي ان کان اڳ ته اها ڪالمن کي هٽائي، پنهنجي شيشي کي چيڪ ڪريو. اعلي صفائي استعمال ڪندي
يونيورسل فٽ سان 9mm ننڍو ٿريڊ شيشي
انهي ڳالهه کي يقيني بڻائي ٿو ته توهان جو تجزياتي شيشي جي ڀتين کي جذب نه ڪندو آهي ان کان اڳ جو سوئي ان کي کڻڻ کان اڳ.
HPLC ميٿڊ ڊولپمينٽ ۾ آرگنڪ موڊيفائر جو فن
توهان جي تجزين جي برقرار رکڻ جو وقت آرگنڪ موڊيفائر HPLC ڪنسنٽريشن جي ذريعي سنڀاليو ويندو آهي. Acetonitrile يا Methanol جي تناسب کي ترتيب ڏيڻ سان توھان جي آبي بفر ۾، توھان موبائيل مرحلي جي "elution طاقت" کي ترتيب ڏيو.
ھڪڙي عام خرابي جيڪا مون کي طريقي جي منتقلي ۾ نظر اچي ٿي ھڪڙي غلط سمجھي گريجوئيٽ ايليوشن وکر آھي. جيڪڏهن توهان پنهنجي نامياتي ترميمي کي تمام جلدي ريمپ ڪريو ٿا، توهان قرارداد وڃائي ڇڏيو. تمام سست، ۽ توهان چوٽي جي وسيع ۽ ضايع ٿيل محلول کان متاثر آهيو. جڏهن وچ ۾ ڦيرائڻ
تجزياتي بمقابله تياري واري HPLC
، گريجوئيٽ سلپ کي منظم ڪرڻ ڪامياب اسڪيل اپ ۾ بنيادي عنصر بڻجي ويندو آهي. ياد رکو، Acetonitrile پيش ڪري ٿو گھٽ viscosity ۽ اعلي elution جي طاقت، جڏهن ته Methanol پولر مرکبات لاءِ مختلف چونڊ مهيا ڪري سگھي ٿو جيڪي ACN وڃائي سگھن ٿا.
GC Elution آرڊر جي وضاحت ڪرڻ: مرڪب علحدگي جي اڳڪٿي ڪرڻ
گيس ڪروميٽوگرافر لاءِ اڳڪٿي ڪرڻ جي سي ايليوشن آرڊر سڀ کان وڌيڪ فائدي واري چئلينج مان هڪ آهي. HPLC جي برعڪس، جتي سولوينٽ ڪيمسٽري بنيادي ليور آهي، GC علحدگيءَ کي ”ٽرينيٽي آف سيپريشن“ ذريعي ترتيب ڏنو ويو آهي: ابلندڙ نقطو، ماليڪيولر پولارٽي، ۽ ڪالمن جي درجه حرارت پروگرامنگ.
Thermodynamics vs. Dipole Interactions
هڪ غير پولر اسٽيشنري مرحلي ۾، جي سي ايليوشن آرڊر سختي سان ابلندڙ نقطي تي عمل ڪري ٿو. وڌيڪ volatile compounds پهرين نڪرندا آهن. بهرحال، راند تبديل ٿي ويندي آهي جڏهن توهان پولر ڪالم استعمال ڪندا آهيو جهڙوڪ PEG\/Wax. مون تازو هڪ پروجيڪٽ کي هٿ ڪيو آهي جنهن ۾ isomers شامل آهن جتي ابلندڙ پوائنٽون لڳ ڀڳ هڪجهڙا هئا. پولر مرحلي ۾ تبديل ٿيڻ سان، ڊيپول-ڊائپول رابطي اسان کي اجازت ڏني ته انهن مرکبن کي انهن جي سائيز جي بجاءِ انهن جي برقي ساخت جي بنياد تي الڳ ڪري سگهون.
اعليٰ حساسيت واري ڪم لاءِ جيئن ماحولياتي ٽريس تجزيو، توهان جي نموني ڪنٽينر جي سالميت اهم آهي. استعمال ڪندي
20mm Crimp مٿين هيڊ اسپيس شيشي
غير مستحڪم تجزين جي نقصان کي روڪي ٿو، انهي کي يقيني بڻائي ٿو ته توهان جي ماس اسپيڪٽرل ڊيڪونولوشن توهان جي نموني جي حقيقي نمائندگي تي ٻڌل آهي، نه هڪ لڪي ٿيل حصو.
HPLC بمقابلہ LC-MS: حساسيت شفٽ کي نيويگيٽ ڪرڻ
اسان جي ليبارٽري ۾ هڪ بار بار سوال آهي: "جڏهن اسان کي HPLC بمقابله LC-MS کان منتقل ڪرڻ گهرجي؟" جواب توهان جي گهربل حساسيت ۾ آهي. جڏهن ته HPLC UV جي چڪاس سان گڏ مائڪروگرام جي سطحن تي معمولي QC لاءِ بهترين آهي، LC-MS جي ضرورت آهي جڏهن توهان کي پڪوگرام جي سطحن کي ڳولڻ يا پيچيده ميٽرس ۾ اڻڄاتل کي سڃاڻڻ جي ضرورت آهي.
جيڪڏهن توهان LC-MS ڏانهن منتقل ٿي رهيا آهيو، توهان جي شيشي جي چونڊ اڃا به وڌيڪ نازڪ ٿي ويندي آهي. معياري ڪيپس پلاسٽڪائزرز کي توهان جي موبائيل مرحلي ۾ داخل ڪري سگھن ٿيون، "Ghost Peaks" ٺاهيندا آهن جيڪي توهان جي ڪروميٽگرام کي ڇڪيندا آهن. اهو ئي سبب آهي جو اجيرن جو
بند ٿيل اسڪرو ڪيپس
MS-تصديق ٿيل ليبز ۾ اهم آهن- اهي سيپٽا جي شيشي ۾ گرڻ يا ڊڪٽر ۾ آلودگي کي خارج ڪرڻ جي خطري کي ختم ڪن ٿا.
هڪ مڪمل ڪروميٽوگرافڪ چوٽي جي اناتومي
هر chromatographic چوٽي هڪ تشخيصي اوزار آهي. هڪ تيز، سميٽريل گاسي چوٽي توهان کي ٻڌائي ٿي ته توهان جو سسٽم بهتر آهي. A "ڪلهي" يا "دم" توهان کي ٻڌائي ٿو ته ڪجهه غلط آهي، اڪثر ڪري هارڊويئر يا مئل حجم سان لاڳاپيل آهي.
مئل حجم ۽ اضافي ڪالمن جي حجم کي ختم ڪرڻ
قرارداد جي خاموش قاتلن مان هڪ مئل حجم آهي. جيڪڏهن توهان جي سوئي ۽ شيشي جي تري جي وچ ۾ ڪو فرق آهي، نموني منتشر ٿي وڃي ٿو. مائڪرو نموني لاءِ، مان هميشه استعمال ڪرڻ جي صلاح ڏيان ٿو ڪنيڪل انسرٽس. اهي داخل ڪرڻ نموني کي هڪ تنگ، عمودي رستي ۾ مجبور ڪن ٿا، هڪ "تيز پلگ" انجڻ کي يقيني بڻائي ٿي. اهو سڌو سنئون هڪ تيز چوٽي ۽ بهتر سگنل کان شور جي نسبت ۾ نتيجو آهي، خاص طور تي هاء پريشر سسٽم ۾ جتي تڪرار دشمن آهي.
هڪ پرو وانگر مسئلو حل ڪرڻ: بيس لائين شور کان سيپٽا ڪورنگ تائين
منهنجي مسئلن جي حل جي سالن ۾، مون ڏٺو آهي ته اوزار جي مسئلن جو 70٪ اصل ۾ قابل استعمال مسئلا آهن.
-
بيس لائين شور ۽ گھوسٽ چوٽيون: جيڪڏهن توهان چوٽي ڏسو جتي ڪٿي به نه هجڻ گهرجي، توهان جا فلٽر مجرم هوندا. هميشه ڏانهن رجوع ڪريو
0.22 مائڪرو فلٽرز لاءِ مڪمل گائيڊ
توهان جي سرنج فلٽر چونڊڻ کان اڳ.
-
سيپتا ڪورنگ: جيڪڏهن توهان پنهنجي شيشي ۾ سلڪون جا ٽڪرا ڏسندا آهيو، توهان جي سوئي سيپتا کي "ڪورنگ" ڪندي آهي. اهو خراب معيار جي ڪيپ سان ٿئي ٿو. اسان جا ND11 Crimp Caps ۽ 10-425 Screw Caps آهن درست-انجنيئر ٿيل آهن ڪيترن ئي پنڪچرن کي بغير ٽڪرائڻ جي.
-
اسٽوريج ۾ استحڪام: EPA طريقن يا ڊگهي مدت اسٽوريج لاء، استعمال ڪندي
24-400 EPA شيشي
borosilicate گلاس مان ٺهيل صفر محلول نقصان ۽ صفر آلودگي کي يقيني بڻائي ٿي.
ڇو ڊيٽا جي سالميت استعمال ٿيندڙ سان شروع ٿئي ٿي
اسان اڪثر خرچ ڪريون ٿا 50,000 USD هڪ اعلي-آخر سسٽم تي، پوءِ شيشي تي پئسا بچائڻ جي ڪوشش ڪندا آهيون. منهنجي تجربي ۾، هڪ ذيلي پار شيشي توهان جي ليب ۾ سڀ کان مهانگي شيءِ آهي ڇاڪاڻ ته اها ”ٻيهر رن“ ۽ ”ناڪام تصديق“ جي ڪري ٿي.
ڇا توهان کي سادي ڪروميٽوگرافي لاءِ 1ml شيل وائلز جي ضرورت آهي يا خودڪار GC لاءِ 18mm اسڪرو ٿريڊ هيڊ اسپيس وائلز، ايجيرين اها استحڪام فراهم ڪري ٿي جيڪا ماهرن جي گهرج آهي. اسان پڪ ڪريون ٿا ته توهان جو gc elution آرڊر ڏينهون ڏينهن ٻيهر پيدا ٿئي ٿو، ۽ توهان جي ڪروميٽوگرافڪ چوٽي اوتري ئي تيز رهي ٿي جيترو توهان اهو طريقو ٺاهيو آهي.
ماهر سپورٽ ۽ پڇا ڳاڇا: ڇا توهان متضاد نتيجن کي منهن ڏئي رهيا آهيو يا طريقي جي ترقي سان جدوجهد ڪري رهيا آهيو؟ اچو ته گڏجي توهان جي ڪم جي فلو کي بهتر بڻايون. مون سان رابطو ڪريو ٽيڪنيڪل مشوري لاءِ:
نتيجي تي عبور حاصل ڪرڻ جو ريورس مرحلو ڇا آهي ۽ توهان جي اوزار جي نزاڪت تي عبور حاصل ڪرڻ مسلسل سکيا جو سفر آهي. صحيح نامياتي ترميم ڪندڙ HPLC ۽ بهترين-ان-طبقاتي استعمال جي سامان کي چونڊڻ سان، توهان پنهنجي ڊيٽا جي سچائي ۾ سيڙپڪاري ڪري رهيا آهيو. هڪ ذيلي پار شيشي کي هڪ شاندار طريقو برباد ڪرڻ نه ڏيو جنهن کي توهان هفتي ترقي ڪندي گذاريو.
انگريزي
چيني
