ප්‍රවාහය ප්‍රගුණ කිරීම: HPLC ජංගම අදියර සඳහා විද්‍යාගාර ප්‍රවීණයෙකුගේ මාර්ගෝපදේශය

හැඳින්වීම

මම ඔබ සිටින තැන සිට ඇත-පෙ.ව. 2 ට මොනිටරයක් ​​දෙස බලා සිටිමින්, මුහුදේ නැතිවූ බෝට්ටුවක් වැනි මූලික ප්ලාවිතයක් නරඹමින්, "HPLC doo-hickey" නිර්මාණය කළේ මගේ සිහිබුද්ධිය පරීක්ෂා කිරීමට පමණක්දැයි සිතමින්. ඉහළ ක්‍රියාකාරී ද්‍රව වර්ණදේහ (HPLC) වටේ ඔබේ හිස ඔතා ගැනීමට උත්සාහ කිරීමට ඔබට ව්‍යාකූල බවක් දැනේ නම්, හුස්මක් ගන්න. එය මිල අධික කොටස් පෙට්ටියක් පමණක් නොවේ; එය රසායන විද්‍යාව සහ භෞතික විද්‍යාව අතර සියුම් නර්තනයකි.

රසායනාගාරයේදී, අපි බොහෝ විට පවසන්නේ ජංගම අවධිය පද්ධතියේ "ජීවන රේඛාව" බවයි. එය නොමැතිව, ඔබේ නියැදිය නිකම්ම ඉන්ජෙක්ටරයක වාඩි වී, කොහේවත් යන්නේ නැත. නමුත් ඔබේ අණු අනාවරකයට ගෙන යාමට නිවැරදි "දුම්රිය" තෝරා ගන්නේ කෙසේද? අපි එය බිඳ දමමු, අපි බ්‍රේක් රූම් එකේ කෝපි එකක් බීලා කතා කරනවා වගේ.

1. ඇත්තටම HPLC යනු කුමක්ද?

එහි හරය, HPLC යනු වෙන්වීමයි. ධාවන පථය යනු නිශ්චල අවධිය (තීරුව) වන අතර ධාවකයන් තල්ලු කරන "සුළං" hplc ජංගම අදියර වන තරඟයක් මෙන් සිතන්න.

මැජික් සිදු වන්නේ විවිධ අණු වලට විවිධ "අනුකූලතා" ඇති බැවිනි. සමහර අණු ජංගම අදියරට ආදරය කරන අතර තීරුව හරහා විශාලනය කරයි. අනෙක් ඒවා "ඇලෙන සුළු" - ඔවුන් නිශ්චල අවධිය කෙරෙහි ඇල්මක් ඇති අතර පසුගාමී වේ. මෙම වේගයේ වෙනස තමයි ඔබේ ක්‍රොමැටෝග්‍රෑම් මත එම උච්චයන් නිර්මාණය කරන්නේ.

2. සාමාන්‍ය අදියර එදිරිව ප්‍රතිලෝම අදියර

සාමාන්‍යයෙන් සෑම කෙනෙකුම තම හිසකෙස් ඉවත් කිරීමට පටන් ගන්නේ මෙයයි. මගේ වසර ගණනාවක පුහුණුවීම්වලදී, මම මෙය මතක තබා ගැනීමට පහසුම ක්‍රමය සොයාගෙන ඇත්තේ ධ්‍රැවීයතාව දෙස බැලීමයි.

A. සාමාන්‍ය අදියර වර්ණදේහය

මෙය "පැරණි පාසල්" ක්‍රමයයි. සාමාන්‍ය අවධි වර්ණදේහ විද්‍යාවේදී, නිශ්චල අවධිය ධ්‍රැවීය වේ - එය ධ්‍රැවීය අණු සඳහා චුම්බකයක් ලෙස සිතන්න. අප මෙහි භාවිතා කරන ජංගම අදියර ධ්‍රැවීය නොවන, සාමාන්‍යයෙන් හෙක්සේන් හෝ හෙප්ටේන් වැනි ද්‍රාවක වේ.

• තර්කනය: ධ්‍රැවීය "ඇලෙන" අණු ධ්‍රැවීය තීරුව මගින් රඳවා ගනු ලැබේ. ධ්‍රැවීය නොවන අණු ධ්‍රැවීය නොවන ජංගම අවධිය සමඟ ඉක්මනින් සෝදා හරිනු ලැබේ.

• ප්‍රෝ ඉඟිය: ඔබ ඔබේ ජංගම අදියරෙහි ධ්‍රැවීයතාව වැඩි කළහොත් (අයිසොප්‍රොපානෝල් ස්වල්පයක් එකතු කිරීම), ඔබේ සාම්පල ඇත්ත වශයෙන්ම වේගයෙන් ගමන් කරයි.

B. ප්‍රතිලෝම අදියර ක්‍රොමැටෝග්‍රැෆි

අද මෙය රන් සම්මතයයි. සමහර විට මම රසායනාගාරයේ කරන වැඩවලින් 90% ක් ප්‍රතිලෝම අදියර වර්ණදේහ ඇතුළත් වේ. මෙන්න, අපි පිටපත පෙරළන්නෙමු. තීරුව ධ්‍රැවීය නොවන (තෙල් වැනි ජලභීතික), සහ අදියර ජංගම ධ්‍රැවීය වේ (සාමාන්‍යයෙන් ජලය සහ මෙතනෝල් හෝ ඇසිටොනයිට්‍රයිල් මිශ්‍රණයකි).

• තර්කනය: ජලයට ආදරය කරන (ධ්‍රැවීය) අණු තෙල් සහිත තීරුවට වෛර කරන නිසා විශාලනය කරයි. මේද-ආදරණීය (ධ්‍රැවීය නොවන) අණු මැලියම් මෙන් තීරුවට ඇලී සිටී.

• අපි එයට ආදරය කරන්නේ ඇයි: එය පුරෝකථනය කළ හැකි, බහුකාර්ය, සහ කළමනාකරණය කිරීමට පහසු වන ජලය මත පදනම් වූ ද්‍රාවක භාවිතා කරයි.

3. ද්‍රාවක ගුණයේ "රන් රීතිය"

ඔබ හේතුවක් සඳහා ලේබල මත "HPLC ශ්‍රේණිය" දකිනු ඇත. ACS ශ්‍රේණිය හෝ ඊට අඩු දෙයක් භාවිතා කිරීම ගැන සිතන්නවත් එපා. ඇයි? අඩු ශ්‍රේණියේ ද්‍රාවකවල ඇති එම "කුඩා" අපද්‍රව්‍ය කාලයත් සමඟ ඔබේ තීරුව මත එකතු වී ඔබේ විභේදනය විනාශ කර අමුතු අවතාර මුදුන් නිර්මාණය කරන බැවිනි.

සෑම විටම Milli-Q (18.2 MΩ.cm) ශ්‍රේණියේ ජලය භාවිතා කරන්න. ඔබේ ජලය "අපිරිසිදු" නම්, ඔබේ මූලික රේඛාව කඳු වැටියක් මෙන් පෙනෙනු ඇති අතර, ඒ මන්දැයි සොයා බැලීමට ඔබ දින තුනක් ගත කරනු ඇත.

4. වායු ඉවත් කිරීම සහ පෙරීම: කාර්ය සාධන ඝාතකයන්

වාතය hplc ජංගම අදියරෙහි සතුරා වේ. සාමාන්‍ය පීඩනය යටතේ වාතය ඔබේ ද්‍රාවකවල දිය වේ. නමුත් එම ද්‍රාවකය පොම්පයට වැදුණු පසු එම කුඩා බුබුලු චෙක් කපාටවල හෝ අනාවරක කෝෂයේ සිරවිය හැක.

• ප්‍රතිඵලය: ප්‍රවාහ අනුපාත උච්චාවචනයන්, ස්පන්දන මූලික රේඛා සහ චලනය වන රඳවා ගැනීමේ වේලාවන්.

• නිවැරදි කිරීම: ඔබ අධි-සංවේදීතා විශ්ලේෂණ ක්‍රියාත්මක කරන්නේ නම්, ගොඩනඟන ලද degassers, හෝ sonication\/vacuum filtration භාවිතා කරන්න.

පෙරීම විකල්ප නොවේ. HPLC ශ්‍රේණියේ ද්‍රාවකවල පවා නිෂ්පාදන ක්‍රියාවලියෙන් හෝ බෝතල් පියනෙන් අන්වීක්ෂීය අංශු තිබිය හැක. ඔබේ ජලාශය ස්පර්ශ කිරීමට පෙර සෑම විටම 0.22µm හෝ 0.45µm පටලයක් හරහා පෙරන්න. එය ඔබගේ තීරුව අකල් මරණයකින් ගලවා ගත හැකි මිනිත්තු 5 ක කාර්යයකි.

5. බෆර් සහ වීදුරු උගුල

ප්‍රතිලෝම වර්ණදේහ විද්‍යාවේදී, අයනීකරණය කළ හැකි සාම්පල සඳහා pH අගය ස්ථාවරව තබා ගැනීමට අපි බෆර භාවිතා කරමු.

• ප්‍රෝ ඉඟිය: ඔබ අද බෆරයක් භාවිතා කළේ නම්, ඔබ නිවසට යාමට පෙර පද්ධතිය පිරිසිදු ජලය\/කාබනික මිශ්‍රණයෙන් සෝදන්න. ඔබ එසේ නොකරන්නේ නම්, එම ලවණ ඔබේ පොම්ප මුද්‍රා ස්ඵටික කර ඉරා දමනු ඇත.

• වීදුරු උගුල: ඔබේ hplc ජංගම දුරකථන අදියර pH අගය > 8.0 නම්, එය ඇත්ත වශයෙන්ම වීදුරු ජලාශවලින් ලෝහ අයන කාන්දු කළ හැකි බව ඔබ දන්නවාද? මෙම අවස්ථා වලදී මල නොබැඳෙන වානේ හෝ විශේෂිත ප්ලාස්ටික් බහාලුම් වෙත මාරු වන්න.

ඔබේ වෙන්වීම පරිපූර්ණ කරමු

ජංගම අදියර නිවැරදිව ලබා ගැනීම HPLC හි සටනෙන් 80% කි. ඔබ "ෂැග් කාපට්" මූලික, පීඩන ස්පයික් හෝ නොගැලපෙන ප්‍රතිඵල සමඟ පොරබදන්නේ නම්, අනුමාන කිරීමට තවත් දවසක් නාස්ති නොකරන්න.

මෙම නිවැරදි ගැටළු නිරාකරණය කිරීමට මම පැය දහස් ගණනක් බංකුවෙහි ගත කළෙමි. ඔබේ ව්‍යාපෘතිය නැවත යථා තත්ත්වයට පත් කර ගැනීම සඳහා "ලබන ලද" උපදෙස් ටිකක් බෙදා ගැනීමට මම සැමවිටම සතුටු වෙමි.

• WhatsApp: 86 18338832256

• විද්‍යුත් තැපෑල:boonemi@aijirenvial.com
  

යොමු කිරීම්

• Snyder, L. R., Kirkland, J. J., & Dolan, J. W. (2011). නවීන ද්‍රව වර්ණදේහ පිළිබඳ හැඳින්වීම. 3 වන සංස්කරණය. ජෝන් විලී සහ පුත්‍රයෝ. (HPLC වෙන් කිරීමේ යාන්ත්‍රණයන් අවබෝධ කර ගැනීම සඳහා "රන් ප්‍රමිතිය").

• Dolan, J. W. (2002). "ජංගම අදියර සකස් කිරීම." LCGC උතුරු ඇමරිකාව, දෝශ නිරාකරණ මාලාව. (ගෑස් ඉවත් කිරීම සහ පෙරීම සඳහා අත්‍යවශ්‍ය ප්‍රායෝගික මාර්ගෝපදේශය).

• Aparicio, R. (Ed.). (2013). HPLC ප්‍රශස්තකරණය පිළිබඳ අත්පොත. එල්සෙවියර්. (ප්‍රතිලෝම අදියර වර්ණදේහයේ ද්‍රාවක ධ්‍රැවීයතාව සහ බෆර තේරීම පිළිබඳ සවිස්තර දත්ත).

• Agilent Technologies. "HPLC පද්ධති දෝශ නිරාකරණ මාර්ගෝපදේශය: පොදු ජංගම අදියර දෝෂ වළක්වා ගැනීම." තාක්ෂණික සම්පත් පුස්තකාලය.

• ජල සංස්ථාව. "Chromatography මූලධර්ම: සාමාන්‍ය අදියර එදිරිව ප්‍රතිලෝම අදියර." අධ්යාපන මාලාව.

• සමගිකරණය පිළිබඳ ජාත්‍යන්තර සම්මන්ත්‍රණය (ICH). Q2(R1) විශ්ලේෂණ ක්‍රියා පටිපාටි වලංගු කිරීම: පෙළ සහ ක්‍රමවේදය. (උච්ච ප්‍රදේශ ප්‍රමාණකරණය සහ රඳවා ගැනීමේ කාල ස්ථායීතාවය සඳහා ප්‍රමිතිය).