HPLC vs. LCMS: Ktorý zvoliť? 5 kľúčových bodov, ktoré je potrebné zvážiť
Novinky
kategórie
Vyšetrovanie

HPLC vs. LCMS: Ktorý z nich by ste si mali zvoliť? 5 bodov

22. augusta 2024
Vysokoúčinná kvapalina chromatografia (HPLC) a spektrometria kvapaliny-chromatografie (LCM) sú dve silné analytické techniky, ktoré sa používajú v rôznych oblastiach, vrátane farmaceutických výrobkov, environmentálnych vied a životných vedy. Zatiaľ čo obe metódy zahŕňajú separáciu a analýzu zlúčenín, ich princípy, funkcie a aplikácie sú veľmi odlišné. Tento blogový príspevok porovná HPLC a LCMS so zameraním na ich kľúčové rozdiely a výhody každej techniky.

Prevádzka


Hplc


HPLC je chromatografická technika, ktorá oddeľuje zlúčeniny na základe ich interakcií so stacionárnymi a mobilnými fázami. V HPLC sa cez stĺpec naplnenú stacionárnou fázou, ktorá sa zvyčajne skladá z malých častíc kremičita alebo polymérov, čerpa sa kvapalná mobilná fáza. Keď sa do systému zavedie zmes vzorky, komponenty sa oddeľujú na základe ich afinity k stacionárnej fáze. Zlúčeniny, ktoré interagujú silnejšie so stacionárnou fázou, sa elutujú pomalšie, zatiaľ čo zlúčeniny, ktoré interagujú menej silne, sa rýchlejšie eluujú. Oddelené zlúčeniny sa potom detegujú pomocou rôznych detektorov, ako sú detektory UV-Vis, fluorescencia alebo index lomu.

Chcete sa dozvedieť viac o aplikáciách chromatografie, prosím, skontrolujte tento článok:15 Aplikácie chromatografie fľaštičky v rôznych oblastiach


LCMS


LCMS kombinuje separačné schopnosti HPLC s schopnosťami hmotnostnej analýzy hmotnostnej spektrometrie. V LCMS sa vzorky najskôr oddelia pomocou HPLC, rovnako ako v konvenčnom HPLC. Namiesto toho, aby boli detegované konvenčným detektorom, sa eluované zlúčeniny zavádzajú do hmotnostného spektrometra. Hmotnostný spektrometer ionizuje zlúčeniny a meria ich pomer hmotnosti k poplatku a poskytuje podrobné informácie o molekulovej hmotnosti a štruktúre analytu. Táto kombinácia separácie a hmotnostnej spektrometrie poskytuje väčšiu citlivosť a špecifickosť ako samotná HPLC.


Mechanizmus separácie


HPLC:HPLC využíva vysoký tlak na tlačenie kvapalnej mobilnej fázy cez zabalený stĺpec obsahujúci stacionárnu fázu. Zlúčeniny sú oddelené na základe ich diferenciálnych interakcií so stacionárnou fázou, čo vedie k presným a účinným separáciám.

LCMS:LCMS kombinuje fyzické schopnosti HPLC s schopnosťami hmotnostnej spektrometrie hmotnostnej spektrometrie (MS). Kvapalná chromatografická zložka oddeľuje zlúčeniny, zatiaľ čo hmotnostný spektrometer meria pomer hmotnosti k nabíjaniu ionizovaných druhov.

Citlivosť a selektivita

HPLC:HPLC má dobrú citlivosť a selektivitu, najmä v kombinácii s pokročilými detektormi, ako sú detektory UV-Vis, fluorescencia alebo detektory diódových polí. Samotný HPLC však nemusí poskytnúť primeranú špecifickosť pre komplexné vzorky.

LCMS:LCMS má vynikajúcu citlivosť a selektivitu v porovnaní s HPLC. Hmotnostné spektrometre môžu presne identifikovať a kvantifikovať zlúčeniny na základe ich jedinečných pomerov hmotnosti k nabíjaniu, dokonca aj v zložitých matriciach. Vďaka tomu sú LCM obzvlášť užitočné na analýzu stopových zlúčenín a potvrdzovanie identity neznámych látok.


Príprava vzorky


HPLC:Príprava vzorky na HPLC zvyčajne zahŕňa riedenie, filtráciu alebo jednoduché extrakčné techniky. Vzorky sa nemusia odparovať, takže HPLC je vhodný pre širokú škálu zlúčenín vrátane polárnych a neprchavých látok.


LCMS:Príprava vzorky pre LCM je podobná prípravu pre HPLC, ale môžu byť potrebné ďalšie kroky na zabezpečenie kompatibility s hmotnostným spektrometrom. Napríklad na zvýšenie ionizácie a zabránenie potláčania iónov môžu byť potrebné prchavé vyrovnávacie pamäte alebo prísady.

Žiadosti


HPLC:HPLC sa široko používa na analýzu farmaceutických výrobkov, potravín a environmentálnych vzoriek. Je obzvlášť účinný na oddelenie a kvantifikáciu zlúčenín v zložitých zmesiach, ako sú nečistoty liečiv, potravinové prísady a zvyšky pesticídov.

LCMS:LCMS má širokú škálu aplikácií vrátane:

Farmaceutická analýza: Používa sa pri objavovaní liekov, vývoji a kontrole kvality.

Proteomika a metabolomika: Používa sa na identifikáciu a kvantifikáciu proteínov a metabolitov v biologických vzorkách.

Environmentálna analýza: Používa sa na detekciu stopových kontaminantov vo vzorkách vody, pôdy a vzduchu.

Zaujíma sa o úlohu certifikovaných liekov na HPLC pri zabezpečovaní presnej analýzy vzoriek? Prečítajte si tento článok: Dôležitosť certifikovaných injekčných liekovky HPLC pre presnú analýzu vzoriek

Záver

HPLC a LCMS sú výkonné analytické techniky s vlastnými silami a obmedzeniami. Výber medzi nimi závisí od špecifických požiadaviek analýzy, ako je citlivosť, selektivita, zložitosť vzorky a dostupné zdroje.

HPLC je dobrou voľbou pre rutinnú analýzu známych zlúčenín v relatívne jednoduchých matriciach, kde náklady a ľahké použitie sú dôležitými faktormi. Na druhej strane LCMS je preferovanou technikou na analýzu komplexných vzoriek, identifikáciu neznámych zlúčenín a dosiahnutie detekcie ultra-trasovej úrovne.

Keďže technológia pokračuje v rozvíjaní, integrácia HPLC a LCMS bude hrať čoraz dôležitejšiu úlohu pri uspokojovaní vyvíjajúcich sa potrieb analytickej chémie a zabezpečení vysokokvalitných výsledkov v rôznych aplikáciách.

Dopyt