Неки узорци се још увек не могу директно убризгати након претходног третмана. Дериватизација је потребна да би се направила једињења без УВ апсорпције или флуоресценције коју детектују УВ или флуоресцентни детектори.

Побољшава осетљивост
Побољшава раздвајање (промена квалитета)

Могући проблеми укључују губитак узорка, контаминацију, непотпуне реакције или више нуспроизвода, што може утицати на тачност или довести до грешака.

Филтрација узорка

ЛЦ узорци морају бити уједначени и без честица; честице могу оштетити ињектор или блокирати колону. Кораци укључују:

Протресите узорак пре убризгавања и проверите да ли постоје честице, замућеност или емулзије
Ако се примете честице, филтрирајте узорак помоћу мембране која може да задржи честице ≥0,15 μм

Потенцијални проблеми: контаминација узорка, концентрација компоненти која смањује адсорпцију и испаравање растварача које узрокује грешке.

Методе екстракције

Екстракција одваја аналите од ко-растварача или уклања супстанце које ометају (нпр. протеине). Органски растварачи треба да буду ниске токсичности, испарљиви, са мало нечистоћа и добро растворе узорак.

Уобичајени растварачи: диетил етар, етил ацетат, дихлорометан, хлороформ, бензол или смеше.

Након екстракције, узорци се могу директно убризгати или концентрисати да би се повећала концентрација и осетљивост аналита.

Екстракција узорка растворљивог у води

Киселе компоненте и соли: екстраховати нечистоће органским растварачем, подесити на кисело, затим екстраховати или убризгати; или осушити под Н2 и растворити у одговарајућем растварачу пре убризгавања.
Основне компоненте и соли: екстраховати нечистоће органским растварачем, прилагодити на базично, затим екстраховати или убризгати; или осушити под Н2 и растворити у одговарајућем растварачу пре убризгавања.
Неутралне компоненте: екстраховати нечистоће органским растварачем, затим анализирати директно хроматографијом реверзне фазе.

Екстракција узорака растворљивих у мастима

Екстраховати органским растварачем или директно убризгати; или осушити под Н2 и растворити у одговарајућем растварачу пре убризгавања.

Извори контаминације

Потенцијални извори контаминације у анализи:

Врста контаминације	Извор	Мере превенције
Енвиронментал	Штетни гасови, прашина, аеросоли	Одржавајте собу са инструментима изолованом, чистом; инсталирати АЦ; контрола влажности <70%; спречити влагу, корозију, вибрације
Контејнери	Лабораторијски прибор од стакла, керамике, кварца, пластике	Изаберите одговарајуће контејнере по типу узорка; темељито очистити
Реагенси	Реагенси који нису хроматографски	Користите реагенсе квалитета за хроматографију, високе чистоће или аналитичког квалитета

Стандардна припрема раствора

Прво припремите раствор интерног стандарда; користите исту серију у стандардима и узорцима да бисте смањили грешке
Супстанце морају бити хроматографске и стабилне
Чувати стандардне растворе у смеђим боцама на ниској температури
За витамине користите смеђе волуметријске боце или заштитите од светлости

Уобичајени проблеми у претходној обради узорка и решењима

Проблем	Узрок	Решење
Неповезани пикови у хроматограму	Контаминација филтера	Потопите филтер у растварач узорка и тестирајте ињекцију Промените тип филтера Користите алтернативне технике чишћења
Низак вршни одговор (нарочито узорци ниске концентрације)	Адсорпција на површини филтера	Промените тип филтера Обрадите све узорке под истим условима Користите алтернативне технике чишћења
Низак опоравак	Непотпуно извлачење	Повећајте време екстракције, користите врући растварач Подесите начин чишћења
Проширени врхови, скраћени животни век колоне	Интерференција и контаминација узорка	Побољшајте метод чишћења
Лоша прецизност	Непотпуни опоравак	Оптимизујте или замените дериватизацију, одвајање, екстракцију или друге услове Користите аутоматизовано руковање да бисте побољшали прецизност

Претходно:

Екстремно висока\/ниска температура и утицај излагања светлости на стабилност узорка: теорија и методолог

Следеће:

Назад на листу