Како се ХПЛЦ разликује од ступца ГЦ?

ХПЛЦ (течна хроматографија високих перформанси) и ГЦ (гасна хроматографија) су и снажне аналитичке технике које се користе за одвајање, идентификацију и квантификовати једињења у широком разноликој узорака. Међутим, увелико се разликују у погледу рада, опреме и апликација. Овај чланак оцртава кључне разлике између ХПЛЦ и ГЦ ступаца, фокусирајући се на њихов дизајн, функционалност и подобност за различите врсте анализе.

Дизајн колоне

ХПЛЦ стубови

ХПЛЦ стубови су обично краћи и шири од ГЦ ступаца. Они су обично дужине до 30 цм и имају унутрашњи пречник који се крећу од 2,1 мм до 8 мм. Паковање унутар ХПЛЦ ступаца састоји се од малих честица (обично мање од 5 микрона пречника) који пружају велику површину за интеракцију са компонентама узорака. Својства паковања ових стубова омогућавају им ефикасно одвајање једињења на основу њихових хемијских својстава.

Главне карактеристике:

Дужина: До 30 цм

Пречник: обично између 2,1 мм и 8 мм

Материјали за паковање: Мале честице (нпр. Силика) са различитим модификацијама површине погодне за различите механизме раздвајања (нпр. Обрнута фаза, нормална фаза).

ГЦ ступци

ГЦ колоне, насупрот томе, су дужи и ужи, обично до 100 м и имају унутрашњи пречник у распону од 0,1 мм до 1 мм. Они се могу поделити у две главне врсте: упаковане ступце и капиларне ступце. Спуштене ступце садрже чврсту стационарну фазу или течност премазана чврстим подршком, док капиларне ступце имају танки филм стационарне фазе прекривене унутрашњом зидом.

Главне карактеристике:

Дужина: до 100 м

Пречник: обично између 0,1 мм и 1 мм

Врсте: паковане ступце (чврсте или течне стационарне фазе) и капиларне ступце (отворена цеваста структура).

Мобилна фаза

Течна хроматографија високих перформанси

У ХПЛЦ је мобилна фаза обично течни растварач или мешавина поларних или непарних растварача. Уобичајени растварачи укључују воду, метанол, ацетонитрил и разне пуфере. Избор мобилне фазе је критично јер утиче на интеракцију између аналита и стационарне фазе у колони.

Гасна хроматографија

ГЦ користи гасовити мобилну фазу, најчешће инертни гас као што је хелијум или азот. Узорак мора бити довољно нестабилан да испари када се уведе у колону. Овај захтев значи да је ГЦ пре свега погодан за анализу испарљивих једињења, док ХПЛЦ може да поднесе шири спектар супстанци, укључујући невојно једињења.

Механизам раздвајања

Течна хроматографија високих перформанси

ХПЛЦ раздваја једињења на основу њиховог афинитета према стационарној фази у односу на мобилну фазу. Могу се користити различити начини хроматографије:

Реверсед Фазно-хроматографија: Неполарне стационарне фазе са Полар мобилном фазом.

Нормална фазна хроматографија: Поларна стационарна фаза са ненополарном мобилном фазом.

ИН-ова хроматографија за размену: раздваја наплаћене врсте на основу њихове интеракције са набијеном стационарном фазом.

Хроматографија искључења величине: раздваја молекуле на основу величине.

Гасна хроматографија

У гасној хроматографији, одвајање се првенствено постиже разликама у волатилности и кључастим тачкама аналитима. Једињења која лако испарава ће прво изаћи из колоне, док ће мање испарљиве једињења потрајати дуже да прође. Интеракције између аналита и стационарне фазе такође могу утицати на време задржавања.

Осетљивост и резолуција

ХПЛЦ осетљивост

ХПЛЦ углавном има већу осетљивост на нехлабиље једињења јер је у могућности да анализира ниже концентрације узорака без испаравања. Коришћење мањих величина честица у ХПЛЦ стубовима пружа већу површину за интеракцију, што побољшава резолуцију.

ГЦ осетљивост

Будући да је гасна хроматографија у стању да концентрише аналитике путем испаравања, то је у стању да постигне високу осетљивост на испарљива једињења. Капиларне ступце углавном имају бољу резолуцију него препуна колона због дуже дужине и мањег пречника.

Апликације ХПЛЦ и ГЦ

ХПЛЦ апликације

ХПЛЦ се користи у широком разноликој пољима због његове свестраности:

Фармацеутска анализа: користи се за испитивање формулације лекова и контролу квалитета.

Испитивање животне средине: Анализирајте контаминанте у узорцима воде и тла.

Испитивање сигурности хране: Откријте контаминанте и провери квалитет хране.

Биотехнологија: прочишћавање протеина и нуклеинских киселина.

Апликације за гасну хроматографију

ГЦ се пре свега користи за анализу испарљивих органских једињења:

Анализа заштите животне средине: Мерење испарљивих органских једињења у загађивачима ваздуха и води.

Форензичка наука: Анализа материјала на призорима криминала.

Петрохемијска индустрија: Карактеришући угљоводонике у горивима.

Анализа укуса и ароме: идентификовање испарљивих компоненти у храни.

Укратко, ХПЛЦ и ГЦ су различите хроматографске технике које су погодне за различите врсте анализе засноване на њиховом дизајну колумне, мобилне фазе, механизму за одвајање, примене, осетљивост и могућности решења и резолуције. ХПЛЦ је погодан за нехлапљива или термички лабилна једињења која је потребна течна мобилна фаза, док ГЦ одликује анализу испарљивих супстанци користећи гасовити мобилну фазу. Разумевање ових разлика омогућава истраживачима да одабере одговарајућу методу за своје специфичне аналитичке потребе, осигуравајући тачне резултате у различитим научним областима.

Да ли знате разлику између ХПЛЦ бочица и ГЦ бочица? Проверите овај чланак: Која је разлика између ХПЛЦ бочица и ГЦ бочица?