Одабир праве пуфера за вашу ХПЛЦ мобилну фазу је пресудно за постизање оптималног одвајања и анализе вашег узорковање. Пуфери помажу у одржавању стабилног пХ, који је неопходан за контролу ионизационе државе ваших аналитика, на тај начин утицало на њихово време задржавања и вршног облика. Испод је детаљан преглед како да одаберете најбољи пуфер за вашу ХПЛЦ апликацију.

Знате ли за припрему узорка ХПЛЦ-а? Кликните овај чланак да бисте сазнали више: "Све што је потребно да знате о припреми ХПЛЦ узорака"

Важност селекције пуфера

Буффер је решење чији се пХ не мења након додавања мале количине киселине или базе. На основу њиховог састава, пуфери се могу класификовати као кисели или основни. Ефикасност пуфера одређује се њеном пККом, што идеално треба да буде унутар ± 1 пХ јединица жељеног пХ мобилног фазе за оптималан капацитет пуферирања.

Кључни фактори за разматрање

1.ФХ Опсег: ПХ мобилне фазе треба да буде најмање 2 пХ јединице удаљено од ПКЕ аналите. Ово помаже у сузбијању јонизације киселих или основних аналитика, максимизирање њиховог задржавања на колони. На пример, ако је аналит слаба киселина са ПКК од 4,5, користећи мобилну фазу са пХ око 2.0, задржало би је у нејонизованом стању, унапређењу задржавања.

2.Буффер тип: Заједнички пуфери који се користе у ХПЛЦ-у укључују:

Фосфатни пуфери: Ефикасно у пХ асортиману од 2,0 до 8,0, фосфатни пуфери се широко користе због стабилности и компатибилности са многим аналицијама. Посебно су погодни за ЛЦ-УВ апликације.

Ацетатни пуфери: Они су такође популарни за ЛЦ-УВ тестове и могу се користити у сличним пХ распонима као фосфатни пуфери.

Испарљиви пуфери: За ЛЦ-МС апликације, испарљиви пуфери попут Формата, ацетата и амонијум бикарбоната су пожељни јер се могу лако уклонити током процеса масене спектрометрије.

3. Концентрација: типична почетна концентрација за пуфере у ХПЛЦ је између 25-50 мм. Веће концентрације могу побољшати врхунски облик и ефикасност, али могу такође довести до падавина када се меша са органским растварачима. Препоручљиво је да концентрација пуфера држите испод 25 мм да бисте избегли компликације.

4.Хемијска чистоћа: Увек користите пуфере високо-чистоће хроматографских разреда да бисте спречили контаминацију и осигурали поуздане резултате. Нечистоће могу довести до неочекиваних интеракција и променљивости у временском времену.

Температурни ефекти: Температура може утицати на пХ пуферска решења. Важно је припремити и складиштети пуфере на доследној температури да бисте одржали њихову ефикасност.

Желите да знате 50 одговора о ХПЛЦ бочицама, молимо вас да проверите овај чланак: 50 најчешће постављана питања о ХПЛЦ бочицама

Практични савети за припрему међуспремника

Начин припреме: пуфери се могу припремити мешањем еквимоларних количина њихових киселих и основних компоненти или титровањем основног раствора са киселином. Избегавајте подешавање пХ након додавања органских растварача, јер то може довести до недоследних резултата.

Свежи решења: Редовно припремите свежина пуферска решења да бисте умањили раст микробне и разградње компоненти, које могу утицати на хроматографске перформансе.

Избегавање корозије: Одређени пуфери, попут цитрата, могу коритира на цорморе од нехрђајућег челика система ХПЛЦ система. Осигурајте темељно испирање система након коришћења таквих пуфера да спречите оштећење.

Закључак

Одабир праве пуфера за вашу ХПЛЦ мобилну фазу је пресудно за постизање поузданих и репродуктивних резултата. Размислите о пХ, међуспремнику, концентрацију и чистоћу приликом одабира. Слиједећи ове смернице можете оптимизирати своју ХПЛЦ методу да ефикасно одвојите и анализирате своје узорке.

Желите да знате цену ХПЛЦ бочица, молимо вас да проверите овај чланак: ХПЛЦ бочице Цена: 50 најчешће постављана питања

Претходно:

Како правилно користити епрувете за испитивање кода за тестирање квалитета воде?

Следећи:

Како избећи пробој филтера у филтерима шприца