ХПЛЦ вс. ЛЦМС: Који бисте требали изабрати? 5 бодова

Принцип рада

ХПЛЦ

ХПЛЦ је хроматографска техника која раздваја једињења на основу њихових интеракција са стационарним и мобилним фазама. У ХПЛЦ је пумпана течна мобилна фаза кроз колону испуњену стационарном фазом, која се обично састоји од малих честица силика или полимера. Када се у систем уведе смеша узорака, компоненте су одвојене на основу њиховог афинитета за стационарну фазу. Једињења која више комуницирају са непомичним фазом Елуте спорије, док једињења која брже комуницирају мање снажно. Потом се одвојена једињења открију користећи разне детекторе, као што су детектори УВ-ВИС, флуоресценција или рефракцијског индекса.

Желите да знате више о апликацијама бочица хроматографије, молимо вас да проверите овај чланак:15 примене бочица хроматографије у различитим пољима

ЛЦМС

ЛЦМС комбинује могућности раздвајања ХПЛЦ-а са могућностима масене анализе масене спектрометријом. У ЛЦМ-у узорци су први раздвојени помоћу ХПЛЦ, баш као и у конвенционалном ХПЛЦ. Међутим, уместо да их открије конвенционални детектор, елуирана једињења се уводе у масовни спектрометар. Масени спектрометар ионизира једињења и мери њихов однос масовне наводе, пружајући детаљне информације о молекуларној тежини и структури аналита. Ова комбинација раздвајања и масене спектрометрије пружа већу осетљивост и специфичност од самог ХПЛЦ-а.

Механизам раздвајања

ХПЛЦ:ХПЛЦ користи висок притисак да притисне течну мобилну фазу кроз паковану колону која садржи стационарну фазу. Једињења су одвојена на основу њихових диференцијалних интеракција са стационарним фазом, што резултира прецизним и ефикасним одвајањем.

ЛЦМС:ЛЦМС комбинује могућности физичке раздвајања ХПЛЦ са могућностима масене спектрометријске масене спектрометрије (МС). Компонента течне хроматографије раздваја једињења, док масени спектрометар мери омјер масовне наводе јонизованих врста.

Осетљивост и селективност

ХПЛЦ:ХПЛЦ има добру осетљивост и селективност, посебно у комбинацији са напредним детекторима, као што су УВ-Вис, флуоресценција или детектори диоде. Међутим, сама ХПЛЦ не може пружити адекватну специфичност за сложене узорке.

ЛЦМС:ЛЦМС има врхунску осетљивост и селективност у поређењу са ХПЛЦ. Масени спектрометри могу тачно да идентификују и квантификују једињења на основу њихових јединствених омјера масовне наводе, чак и у сложеним матрицама. То чини ЛЦМС, посебно корисно за анализу једињења у траговима и потврђујући идентитет непознатих супстанци.

ХПЛЦ:Припрема узорка за ХПЛЦ обично укључује разблаживање, филтрацију или једноставне технике екстракције. Узорци не треба да се испаре, тако да је ХПЛЦ погодан за широк спектар једињења, укључујући поларне и невојне материје.

ЛЦМС:Припрема узорака за ЛЦМС је слична оној за ХПЛЦ, али могу се тражити додатни кораци да би се осигурала компатибилност са масеним спектрометром. На пример, могу се тражити испарљиви пуфери или адитиви за побољшање јонизације и спречавање сузбијања јона.

Апликације

ХПЛЦ:ХПЛЦ се широко користи за анализу фармацеутских производа, хране и узорака животне средине. Посебно је ефикасан за раздвајање и квантификацију једињења у сложеним смешама, као што су нечистоће лекова, адитиви за храну и остаци пестицида.

ЛЦМС:ЛЦМС има широк спектар апликација, укључујући:

Фармацеутска анализа: користи се у откривању, развоју и контроли квалитета.

Протеомика и метаболомика: користи се за идентификацију и квантификацију протеина и метаболита у биолошким узорцима.

Анализа животне средине: Користи се за откривање контаминаната у траговима у води, земљишту и узорцима ваздуха.

Занимљиво због улоге сертификованих ХПЛЦ бочица у обезбеђивању тачних анализа узорка? Прочитајте овај чланак: Важност сертификованих ХПЛЦ бочица за тачну анализу узорка

Закључак

ХПЛЦ и ЛЦМС су и снажне аналитичке технике са сопственим снагама и ограничењима. Избор између њих двоје зависи од специфичних захтева анализе, као што су осетљивост, селективност, сложеност узорка и расположивих ресурса.

ХПЛЦ је добар избор за рутинске анализе познатих једињења у релативно једноставним матрицама, где су трошкови и једноставност употребе важни фактори. С друге стране, преферирана техника за анализу сложених узорака, идентификовање непознатих једињења и постизање откривања нивоа ултратра.

Како се технологија и даље напредује, интеграција ХПЛЦ и ЛЦМС играће све важну улогу у испуњавању еволуираних потреба аналитичке хемије и обезбеђивање висококвалитетних резултата у различитим апликацијама.