Exempelförberedelse och filtrering: Säkerställa kvalitet i kromatografi

Korrekt provberedning - rena behållare, ta bort partiklar, berika analytter och, om det behövs, derivatisera - eliminerar över 90% av baslinjebuller och tryckavvikelser, vilket säkerställer skarpa toppar och stabila baslinjer. Misslyckande här resulterar i toppskakning, drivande baslinjer eller kolonnblockering.

1. Föroreningar och matrisstörningar

Problem

• Baslinjedrivning och stigande brus döljer mindre toppar.

• Oväntade toppar visas från lakade föroreningar.

• Dålig reproducerbarhet mellan injektioner.
  

  

Orsaka

• Rest i glas: ofullständig syratvätt lämnar silikater; Plastvaror kan läcka mjukgörare.

• Rengöringsmedel: Spår organiska ämnen i sköljlösningsmedel förblir adsorberade.

• Miljöpartiklar: Lab luftdamm och VOC -adsorb på öppna prover.
  

  

Lösning

1. Strikt rengöring av SOP: Acid Soak → Ultrasonic Pure -Water Skölj → Kväve Torka för glas. Dedikerat tvättmedel för plast.

2. Förfiltrering: Centrifug vid 3000 rpm under 10 minuter eller använd en 5 um förhandsfilter före den slutliga 0,22 um filtreringen.

3. Kontrollerad miljö: Utför prep i en laminär flödeshuva för att minimera luftburen förorening.
   
   

2. Filterstäppning från inkompatibla filter

Problem

• Autosampler -trycklarm och frekventa nålbyten.

• Minskad flödeshastighet, inkonsekventa toppområden.

• Förhöjd baktryck och kolonninloppsblockering.
  

  

Orsaka

• Membranmatchning: Nylon sväller i organiska lösningsmedel; PVDF kryper vid förhöjd temperatur.

• Felaktig porstorlek: 0,22 um filter fångar fina partiklar men minskar flödet; 0,45 um filter kan fortfarande täppa till mikrokristaller.

Lösning

1. Membran - lösningsmedel matris: Använd hydrofila PES \ / MCE för vattenhaltig (pH4–8), hydrofob PTFE \ / PVDF för organiska faser; Undvik cellulosaacetat i starka syror.

2. Välj rätt porstorlek: Använd 0,45 um för rutinmässig HPLC, 0,22 um för UHPLC eller spårarbete; Prefilter med högviskositetsprover genom 5 um.

3. Monitor ΔP: Spårtrycksökning; Byt ut filter när backtryck ökar> 15%.
   
   

   

3. Kemisk inkompatibilitet i lösningsmedel - membran

Problem

• Filtrerat prov verkar molnigt eller bär partiklar.

• Nytt baslinjebrus eller spöke toppar efter filtrering.

• Minskad analytåtervinning.
  

  

Orsaka

• Lösningsvullnad: THF sväller PTFE, förändrar porstorlek och flöde.

• Membranuttagningsbara ämnen: Nylon i myrsyra frigör oligomerer som absorberar vid 214Nm.

Lösning

1. Kompatibilitetstest: Blötläggningsfilter i avsett lösningsmedel under 24 timmar vid 25 ° C; Kontrollera för svullnad eller viktförändring.

2. Pilot LC -MS -test: Jämför totala jonkromatogram av filtrerat kontra ofiltrerat prov.

3. Använd filter med låg lak: Ultraljudsvetsad PTFE eller PES utan lim.
   
   

Kvalitetssystem: Försvars- och korrigering av försvar -

Försvar

Standardisera SOP: er för rengöring, filtrering och val av membran för att förhindra fel.

Övervakning

Registrera flödeshastighet, baktryck och tomma prov för att upptäcka drift.

Korrektion

Håll en felträdanalys för snabb identifiering av rot - orsak och korrigerande åtgärder.

"Analytisk precision börjar med att avlyssna den minsta partikeln."