Дар лабораторияи муосири аналитикӣ хроматография аз протоколи муқаррарӣ хеле бештар аст; ин рақси мураккаби таъсири мутақобилаи молекулавӣ мебошад. Новобаста аз он ки шумо миқдори ифлосҳои фармасевтиро муайян мекунед ё ифлоскунандаҳои муҳити зистро дар сатҳи микроэлементҳо муайян мекунед, фаҳмидани физикаи асосии ҷудошавии шумо он чизест, ки техникро аз хроматографи усто фарқ мекунад.
Муваффақият дар лаборатория на танҳо аз танзимоти асбобҳои олӣ ба даст меояд. Он дар синергетика байни химияи усули шумо ва масолеҳи баландсифат, ки якпорчагии намунаи шуморо муҳофизат мекунанд, зиндагӣ мекунад. Барои онҳое, ки мураккабии худро паймоиш мекунанд
HPLC против LC-MS: Кадомро интихоб кардан лозим аст
, ё мубориза бо нишондиҳандаҳои ноустувор, ин дастур сирри паҳлӯи курсиро барои ба даст овардани маълумоти сатҳи ҷаҳонӣ ва ҳадди аксар расонидани вақти кори асбобҳо мубодила мекунад.
Фаҳмидани дастфишори гидрофобӣ: Хроматографияи марҳилаи баръакс чист?
Барои ҷавоб додан ба саволи асосӣ - хроматографияи марҳилаи баръакс чист - бояд берун аз таърифи китоби дарсӣ назар кунад. Дар асл, он ҷудоӣ дар асоси "тарс аз об" (гидрофобия) аст. Дар марҳилаи баръакси хроматографияи моеъи фишори баланди фишор (RP-HPLC), мо як фазаи стационарии ғайриқутбӣ ва фазаи сайёри қутбӣ барои ҷудо кардани молекулаҳо аз рӯи хусусияти гидрофобиашон истифода мебарем.
Химияи занҷири C18 (Octadecyl).
Марҳилаи маъмултарини статсионарӣ зарраҳои кремнийро дар бар мегирад, ки бо занҷирҳои C18 (октадесил) пайваст карда шудаанд. Аз таҷрибаи ман, зичии ин занҷирҳои C18 ва сифати дастгирии кремний устувории усули шуморо муайян мекунанд. Бисёре аз таҳлилгарон ҳангоми таҳлили пайвастагиҳои асосӣ ба думҳои қулла дучор меоянд. Ин аксар вақт аз ҷониби гурӯҳҳои силанолҳои боқимонда дар сатҳи кремний ба амал меоянд, ки ҳамчун маконҳои номатлуби мубодилаи ионҳо амал мекунанд.
Барои ҳалли ин, мо сутуни сарпӯшро истифода мебарем, ки дар он силанҳои хурдтар ин сайтҳои фаъолро "ниқоб" мекунанд. Бо вуҷуди ин, ҳатто беҳтарин сутуни сӯзандоруи бадсифатро ислоҳ карда наметавонад. Агар қуллаи хроматографии шумо пеш аз он ки ба сутун барояд, таҳриф шуда бошад, шишаи худро тафтиш кунед. Истифодаи тозагии баланд
Шишаҳои риштаи кӯтоҳи 9мм бо универсалӣ
кафолат медиҳад, ки таҳлилгари шумо то он даме, ки сӯзан онро гирифтан ба деворҳои шиша адсорбсия нашавад.
Санъати тағирдиҳандаи органикӣ дар таҳияи усули HPLC
Вақти нигоҳдории таҳлилгарони шумо аз ҷониби консентратсияи тағирдиҳандаи органикии HPLC танзим карда мешавад. Бо танзими таносуби ацетонитрил ё метанол ба буфери обии худ, шумо "қувваи элюзия" -и марҳилаи мобилиро танзим мекунед.
Як доми маъмуле, ки ман дар интиқоли усул мебинам, ин каҷи градиенти нодуруст фаҳмидашуда мебошад. Агар шумо тағирдиҳандаи органикии худро хеле зуд афзоиш диҳед, шумо ҳалли худро аз даст медиҳед; хеле оҳиста, ва шумо аз паҳншавии авҷи баланд ва ҳалкунандаи исрофшуда азоб мекашед. Ҳангоми гузариш байни
Таҳлилӣ ва омодагии HPLC
, идоракунии нишебии градиент омили асосии бомуваффақияти васеъшавии миқёс мегардад. Дар хотир доред, ки ацетонитрил часпакии паст ва қувватнокии баландро пешниҳод мекунад, дар ҳоле ки метанол метавонад интихоби гуногунро барои пайвастагиҳои қутбӣ, ки ACN аз даст дода метавонад, таъмин кунад.
Тартиби дешифронии GC Elution: Пешгӯии ҷудошавии таркиб
Пешгӯии тартиби елюцияи gc яке аз душвориҳои муфид барои хроматографи газ мебошад. Баръакси HPLC, ки дар он химияи ҳалкунанда фишанги ибтидоӣ аст, ҷудокунии GC бо "Сегонаи ҷудошавӣ" дикта карда мешавад: нуқтаи ҷӯшон, қутбияти молекулавӣ ва барномасозии ҳарорати сутун.
Термодинамика ва таъсири мутақобилаи диполҳо
Дар марҳилаи стационарии ғайриқутбӣ, тартиби элюсияи gc ба таври қатъӣ нуқтаи ҷӯшонро риоя мекунад. Дар аввал пайвастагиҳои идоранашаванда берун мебароянд. Аммо, вақте ки шумо сутуни қутбӣ ба монанди PEG\/Waxро истифода мебаред, бозӣ тағир меёбад. Ба наздикӣ ман як лоиҳаро бо изомерҳо иҷро кардам, ки дар он нуқтаҳои ҷӯшон тақрибан якхела буданд. Бо гузаштан ба марҳилаи қутбӣ, таъсири мутақобилаи дипол-дипол ба мо имкон дод, ки ин пайвастагиҳоро аз рӯи сохтори электронии онҳо ҷудо кунем, на андозаи онҳо.
Барои кори ҳассосияти баланд ба монанди таҳлили микроэлементҳои экологӣ, якпорчагии контейнери намунавии шумо муҳим аст. Истифодаи
20мм Crimp Top Headspace шиша
аз даст додани таҳлилгарони идоранашаванда пешгирӣ мекунад ва кафолат медиҳад, ки деконволютсияи спектрии оммавии шумо на ба фраксияи фошшуда, на ба тасвири воқеии намунаи шумо асос ёфтааст.
HPLC против LC-MS: Гузариш ба тағирёбии ҳассосият
Саволи зуд-зуд дар лабораторияи мо ин аст: "Мо кай бояд аз HPLC против LC-MS гузарем?" Ҷавоб дар ҳассосияти зарурии шумост. Гарчанде ки HPLC бо ташхиси ултрабунафш барои QC муқаррарӣ дар сатҳи микрограмм аъло аст, LC-MS вақте лозим аст, ки сатҳи пикограммаро муайян кунед ё дар матритсаҳои мураккабро муайян кунед.
Агар шумо ба LC-MS гузаред, интихоби шишаҳои шумо боз ҳам муҳимтар мешавад. Сарпӯшҳои стандартӣ метавонанд пластификаторҳоро ба марҳилаи мобилии шумо шуста, "Қуллаҳои Ghost" -ро эҷод кунанд, ки хроматограммаи шуморо таъқиб мекунанд. Ин аст, ки Айҷирен
Сарпӯшҳои винтбандишуда
дар лабораторияҳои сертификатсияшудаи MS як чизи асосӣ мебошанд - онҳо хатари ба шиша афтодани септа ё шусташавии ифлоскунандаҳоро ба детектор бартараф мекунанд.
Анатомияи қуллаи хроматографии комил
Ҳар як қуллаи хроматографӣ воситаи ташхис аст. Қуллаи якбора ва симметрии Гаусс ба шумо мегӯяд, ки системаи шумо оптимизатсия шудааст. "Китф" ё "дум" ба шумо мегӯяд, ки чизе нодуруст аст, аксар вақт ба сахтафзор ё ҳаҷми мурда алоқаманд аст.
Бартараф кардани ҳаҷми мурда ва ҳаҷми иловагии сутун
Яке аз қотилони хомӯшонаи қатънома ҳаҷми мурда аст. Агар байни сӯзани шумо ва поёни шиша ягон фосила мавҷуд бошад, намуна пароканда мешавад. Барои микро-намунагирӣ, ман ҳамеша тавсия медиҳам, ки Conical Inserts -ро истифода барем. Ин замимаҳо намунаро ба роҳи танг ва амудӣ маҷбур мекунанд, ки тазриқи "шими тез" -ро таъмин мекунанд. Ин мустақиман ба қуллаи тезтар ва таносуби беҳтари сигнал ба садо оварда мерасонад, махсусан дар системаҳои фишори баланд, ки парокандагӣ душман аст.
Бартараф кардани мушкилот ба монанди Pro: Аз садои ибтидоӣ то Septa Coring
Дар солҳои ҳалли мушкилот ман фаҳмидам, ки 70% мушкилоти асбобҳо воқеан масъалаҳои истеъмолӣ мебошанд.
-
Садои ибтидоӣ ва қуллаҳои арвоҳ: Агар шумо қуллаҳоеро бинед, ки дар он ҷо набояд вуҷуд дошта бошад, филтрҳои шумо метавонанд гунаҳкор бошанд. Ҳамеша муроҷиат кунед
Дастури мукаммал барои филтрҳои 0,22 микрон
пеш аз интихоби филтрҳои сӯзандоруҳо.
-
Septa Coring: Агар шумо дар шишаи худ пораҳои силиконро бинед, сӯзани шумо септаро "кор мекунад". Ин бо сарпӯшҳои пастсифат рӯй медиҳад. Сарпӯшҳои ND11 Crimp ва 10-425 Сарпӯшҳои винтӣ бо дақиқ тарҳрезӣ шудаанд, ки ба сӯрохиҳои сершумор бидуни пора тоб оваранд.
-
Устуворӣ дар нигаҳдорӣ: Барои усулҳои EPA ё нигоҳдории дарозмуддат, истифода
24-400 шишаҳои EPA
ки аз шишаи боросиликат сохта шудааст, талафоти халкунанда ва ифлосшавии сифрро таъмин мекунад.
Чаро якпорчагии маълумот аз маводи истеъмолӣ оғоз мешавад
Мо аксар вақт 50,000 доллари ИМА-ро барои системаи баландсифат сарф мекунем, пас кӯшиш мекунем, ки дар шиша динор сарфа кунем. Дар таҷрибаи ман, як флакони зерпардохт чизи гаронбаҳотарин дар лабораторияи шумост, зеро он ба "аз нав кор кардан" ва "тафтишҳои ноком" оварда мерасонад.
Новобаста аз он ки ба шумо барои хроматографияи оддӣ 1 мл Shell Flakon лозим аст ё барои GC автоматикунонидашудаи 18 мм Screw Thread Headspace Flakon, Aijiren мувофиқатеро, ки коршиносон талаб мекунанд, таъмин мекунад. Мо кафолат медиҳем, ки тартиби елюцияи gc-и шумо рӯз то рӯз такроршаванда аст ва қуллаи хроматографии шумо мисли рӯзе, ки шумо методро таҳия кардаед, тез боқӣ мемонад.
Дастгирии коршиносон ва дархостҳо: Оё шумо бо натиҷаҳои номувофиқ рӯ ба рӯ мешавед ё бо таҳияи усул мубориза мебаред? Биёед ҷараёни кори шуморо якҷоя оптимизатсия кунем. Барои машварати техникӣ бо ман тамос гиред:
Хулоса Азхуд кардани марҳилаи баръакс ва азхуд кардани нозукиҳои асбоби худ як сафари пайвастаи омӯзиши пайваста аст. Бо интихоби тағирдиҳандаи органикии дурусти HPLC ва маводҳои беҳтарини дарс, шумо ба ҳақиқати маълумоти худ сармоягузорӣ мекунед. Нагузоред, ки флакони зерпарвоз усули олиҷанобееро, ки ҳафтаҳо барои таҳия карда будед, вайрон кунад.
англисӣ
чинӣ
