Kasama sa halimbawang pagpapanggap ang lahat ng mga operasyon bago ang iniksyon. Bukod sa pagtimbang, pagtunaw, at pagbabanto, nagsasangkot din ito sa mga sumusunod na hakbang:

Pagsasala
Extraction
Derivatization (pre-haligi derivatization)
Likidong chromatography (mababang-presyur na kromatograpiya)

Ang Pretreatment ay maaaring maisagawa nang manu -mano o awtomatiko. Pamilyar ka ba sa sample pretreatment?

Derivatization

Ang ilang mga sample ay hindi pa rin maaaring direktang mai -injected pagkatapos ng pagpapanggap. Kinakailangan ang derivatization na gumawa ng mga compound nang walang pagsipsip ng UV o fluorescence na nakikita ng mga detektor ng UV o fluorescence.

Nagpapabuti ng pagiging sensitibo
Pinahusay ang paghihiwalay (pagbabago ng kalidad)

Kasama sa mga posibleng isyu ang sample loss, kontaminasyon, hindi kumpletong reaksyon, o maraming mga by-product, na maaaring makaapekto sa kawastuhan o ipakilala ang mga error.

Halimbawang pagsasala

Ang mga sample ng LC ay dapat na pantay at walang butil; Ang mga particle ay maaaring makapinsala sa injector o hadlangan ang haligi. Kasama sa mga hakbang:

Iling ang sample bago ang iniksyon at suriin para sa mga particle, kaguluhan, o emulsyon
Kung ang mga particle ay sinusunod, i -filter ang sample gamit ang isang lamad na maaaring mapanatili ang ≥0.15μm na mga particle

Mga potensyal na isyu: sample na kontaminasyon, adsorption pagbabawas ng konsentrasyon ng sangkap, at pag -agaw ng pagsingaw na nagdudulot ng mga pagkakamali.

Mga pamamaraan ng pagkuha

Ang pag-extraction ay naghihiwalay sa mga pag-aaral mula sa mga co-solvent o nag-aalis ng mga nakakasagabal na sangkap (hal., Protein). Ang mga organikong solvent ay dapat na mababa ang Toxicity, pabagu-bago ng isip, mababa sa mga impurities, at matunaw nang maayos ang sample.

Karaniwang solvent: diethyl eter, ethyl acetate, dichloromethane, chloroform, benzene, o mixtures.

Pagkatapos ng pagkuha, ang mga sample ay maaaring mai -injected nang direkta o puro upang madagdagan ang konsentrasyon ng analyte at pagiging sensitibo.

Ang paghuhugas ng sample ng tubig

Acidic na mga sangkap at asing -gamot: kunin ang mga impurities na may organikong solvent, ayusin sa acidic, pagkatapos ay kunin o mag -iniksyon; o tuyo sa ilalim ng N₂ at matunaw sa naaangkop na solvent bago ang iniksyon.
Mga pangunahing sangkap at asing -gamot: Extract impurities na may organikong solvent, ayusin sa pangunahing, pagkatapos ay kunin o mag -iniksyon; o tuyo sa ilalim ng N₂ at matunaw sa naaangkop na solvent bago ang iniksyon.
Mga Neutral na sangkap: I-extract ang mga impurities na may organikong solvent, pagkatapos ay pag-aralan nang direkta sa pamamagitan ng reversed-phase chromatography.

Ang pag-aalis ng sample na taba

Kunin ang organikong solvent o direktang mag -iniksyon; o tuyo sa ilalim ng N₂ at matunaw sa naaangkop na solvent bago ang iniksyon.

Mga mapagkukunan ng kontaminasyon

Mga potensyal na mapagkukunan ng kontaminasyon sa pagsusuri:

Uri ng kontaminasyon	Pinagmulan	Mga hakbang sa pag -iwas
Kapaligiran	Nakakapinsalang gas, alikabok, aerosol	Panatilihin ang silid ng instrumento na nakahiwalay, malinis; i -install ang AC; kontrolin ang kahalumigmigan <70%; maiwasan ang kahalumigmigan, kaagnasan, panginginig ng boses
Mga lalagyan	Glass, Ceramic, Quartz, Plastic Labware	Pumili ng naaangkop na mga lalagyan bawat uri ng sample; malinis nang lubusan
Reagents	Ang mga non-chromatography-grade reagents	Gumamit ng chromatography-grade, mataas na kadalisayan, o analytical-grade reagents

Pamantayang paghahanda ng solusyon

Maghanda muna ng panloob na pamantayang solusyon; Gumamit ng parehong batch sa mga pamantayan at mga sample upang mabawasan ang mga error
Ang mga sangkap ay dapat na chromatography-grade at matatag
Mag -imbak ng mga karaniwang solusyon sa brown bote sa mababang temperatura
Para sa mga bitamina, gumamit ng brown volumetric flasks o protektahan mula sa ilaw

Karaniwang mga problema sa halimbawang pagpapanggap at solusyon

Problema	Cause	Solusyon
Hindi nauugnay na mga taluktok sa chromatogram	Kontaminasyon ng filter	Ibabad ang filter sa sample solvent at test injection Baguhin ang uri ng filter Gumamit ng mga kahaliling pamamaraan sa paglilinis
Mababang tugon ng rurok (lalo na ang mga sample na mababang-konsentrasyon)	Adsorption sa filter na ibabaw	Baguhin ang uri ng filter Iproseso ang lahat ng mga sample sa ilalim ng parehong mga kondisyon Gumamit ng mga kahaliling pamamaraan sa paglilinis
Mababang paggaling	Hindi kumpletong pagkuha	Dagdagan ang oras ng pagkuha, gumamit ng mainit na solvent Ayusin ang paraan ng paglilinis
Pinalawak na mga taluktok, pinaikling haligi habang buhay	Halimbawang panghihimasok at kontaminasyon	Pagbutihin ang paraan ng paglilinis
Mahinang katumpakan	Hindi kumpletong paggaling	I -optimize o palitan ang derivatization, paghihiwalay, pagkuha, o iba pang mga kondisyon Gumamit ng awtomatikong paghawak upang mapabuti ang katumpakan

Nakaraan:

Lubhang mataas na \ / mababang temperatura at light exposure effects sa halimbawang katatagan: teorya at pamamaraan

Susunod:

Bumalik sa listahan