Ang mga solusyon sa paghahanda ng hplc sample para sa pinakamahusay na mga resulta

Apat na mga hakbang para sa paghahanda ng sample ng HPLC

Hakbang 1. Pagtatasa ng mga may tubig na solusyon

Hakbang 2. Paghahanda ng Mga Pamantayan

Ang paghahanda ng mga pamantayan para sa pagkakakilanlan ng tambalan at dami ay maaaring maging isang nakakapagod at proseso ng oras. Ang tumpak na pagtimbang ng isang solid upang ang isang paunang natukoy na dami ng solvent ay maaaring magamit ay mahirap, at ang basura dahil sa pagkakamali ay maaaring magastos - lalo na kapag nagtatrabaho sa mga parmasyutiko. Ang iba pang mga kadahilanan tulad ng temperatura ay karagdagang kumplikado ang pamantayang paghahanda. Ang mga pagbabagu -bago ng temperatura ay nagbabago sa density ng solvent at nag -aambag sa mga dramatikong pagkakaiba sa konsentrasyon.



Ang paggamit ng isang balanse na nagbibigay -daan sa isang katumpakan ng pagtimbang hanggang sa maraming mga desimal na lugar at pag -automate ng proseso sa pamamagitan ng pag -link ng balanse sa isang solvent dispenser ay ginagarantiyahan ang pinakamataas na katumpakan. Ang paggamit ng software tulad ng YAPP16 dosing Q-APP ay nagbibigay-daan sa awtomatikong mga kalkulasyon at pagsubaybay sa gravimetric ng mga sinusukat na halaga. Ang pagdodokumento ng temperatura at density ng solvent ay nagsisiguro din ng lubos na tumpak na konsentrasyon, lalo na kung naghahanda ng mga pamantayan sa mga susunod na araw. Ang direktang paglipat ng data mula sa application ng YAPP16 na tumitimbang sa Thermo Scientific ™ Chromeleon ™ 7.2 Chromatography Data System (CDS) software ay isang pagpipilian para sa paghawak ng data na walang papel na may buong integridad ng data.

Hakbang 3. Bumalik sa mga pangunahing kaalaman na may mahusay na pipetting

Ang kahalagahan ng tumpak at tumpak na pipetting ay madalas na hindi napapansin at ipinagkaloob. Ang antas ng kasanayan at karanasan ng gumagamit ay maaaring magkaroon ng makabuluhang mga implikasyon para sa mga sensitibong pagsusuri tulad ng HPLC. Ang pagpili ng tamang pipette ay maaaring mabawasan ang pagkakamali ng tao at ang mga nauugnay na gastos ng nasayang na mga solvent.



Ang mga mekanikal na pipette na may isang lock ng dami ay nag -aalok ng isang simpleng solusyon para maiwasan ang hindi sinasadyang mga pagbabago sa dami, habang ang mas sopistikadong mga electronic pipette ay nag -aalis ng pagkakaiba -iba ng gumagamit upang patuloy na maghatid ng tumpak na dami. Ang tip ng pipette ay isang mahalagang detalye din upang isaalang -alang para sa mga pagsusuri sa HPLC. Ang mga mababang tip sa pagpapanatili ay pinakamahusay kapag nagtatrabaho sa mga solvent ng iba't ibang mga viscosities, dahil pinalaki nila ang pagbawi ng sample. Ang halimbawang kontaminasyon ay maaari ring maganap bilang isang resulta ng pag -leaching mula sa tip ng pipette. Tulad nito, ang mga tip na may mataas na paglaban sa kemikal ay nagpapanatili ng sample na integridad.

Hakbang 4. Filter para sa kawastuhan at kahabaan ng buhay

Ang pagkuha ng karagdagang pag -aalaga sa mga sample ng pag -filter bago ang pagsusuri ay nagpapabuti ng pagiging maaasahan at maaaring pahabain ang buhay ng haligi ng HPLC sa pamamagitan ng pagpigil sa mga epekto ng clogging. Ang mga filter ng syringe ay isang simple, mabilis na solusyon para sa pag -filter ng mga sample bago ang chromatography ng haligi. Tulad ng mga tip sa pipette, ang mga solvent na ginamit sa HPLC ay nangangailangan ng mga tiyak na filter upang maiwasan ang leaching at sample na kontaminasyon.

Ang mga lamad ng cellulose ay lumalaban sa dimethyl sulfoxide (DMSO), amides, ketones, ester, at eter compound. Para sa lalo na malupit na mga solvent, ang mga uncoated polyethersulfone (PTFO) membranes ay pumipigil sa leaching at sample na kontaminasyon. Ang halimbawang pagsasala ay nagiging napaka-oras-oras kapag tumataas ang sample number. Ang mga yunit ng pagsasala ng multi-sample, tulad ng sistema ng pagsasala ng Claristep®, ay maaaring magproseso ng mga sample nang walang mga syringes at paghahanda ng sample na mabilis na hindi nagsasakripisyo.

Limang mga problema na kailangan mong bigyang pansin ang！

1. Ano ang pinakamalaking mga problema sa halimbawang prep na kinakaharap ng mga lab?

Ang mga laboratoryo ay nasa ilalim ng pagtaas ng presyon sa mga tuntunin ng oras at gastos, na madalas na nakikitungo hindi lamang sa mataas na bilang ng mga sample kundi pati na rin ang mga halimbawa ng iba't ibang mga natures. Ang halimbawang paghahanda ay isang lugar kung saan ang mga banayad na pagkakaiba sa pagitan ng mga uri ng sample o ang mga pamamaraan ng paghahanda ng sample at mga materyales na ginamit ay maaaring makaapekto sa mga resulta na nakuha. Ang pagtiyak ng pagiging tugma sa pagitan ng mga materyales sa aparato ng pagsasala at ang solvent ay maaaring mabawasan ang mga isyu; Halimbawa, ang mga antas ng maaaring makuha na mga compound na maaaring makagambala sa pagtuklas ng analyte.

2. Ano ang mangyayari kapag nagkamali ang sample prep?

Bago ang mga analytical high-performance liquid chromatography (HPLC) na mga aplikasyon, ang mga sample ay inihanda ng iba't ibang mga pamamaraan, na ang lahat ay may potensyal na maimpluwensyahan ang mga resulta ng pagsusuri sa pamamagitan ng nakakaapekto sa sample na na-injected sa system. Ang hindi epektibo na paghahanda ng sample ay maaaring humantong sa isang pagbawas sa buhay ng haligi, nadagdagan ang mga kinakailangan sa serbisyo para sa mga sangkap, potensyal na downtime ng instrumento, pagbawas sa kahusayan ng paghihiwalay ng chromatographic at muling paggawa, at maraming iba pang mga problema.

3. Sa unang sulyap, ang pagsasala ay parang isang simpleng proseso ...

Bagaman ang pagsasala ay isang tila maliit na bahagi ng isang malaking daloy ng trabaho, ang epekto ng pagpili ng tamang filter para sa isang naibigay na aplikasyon ay maaaring maging malaki. Halimbawa, ang mga pamamaraan na hindi nag -aalis ng sapat na bagay na particulate ay maaaring magresulta sa pagharang ng haligi. Ang hindi naaangkop na pagpili ng mga aparato ng paghahanda ng sample ay maaaring, sa ilalim ng ilang mga pangyayari, ilabas ang mga maaaring makuha na mga compound sa sample, magbigkis ng mga pagsusuri ng interes o ipakilala ang mga pagkakamali sa pamamagitan ng pagkawala ng sample - lahat ay nakakaimpluwensya sa kalidad at muling paggawa ng mga resulta na sinusunod. Kung tiwala ka na ang iyong mga filtration consumable ay hindi nag-aambag sa mga pagkakamali na nangangailangan ng muling pagsisiyasat o pag-iimbestiga sa ugat, makatipid ka ng pera at bibigyan ka ng iyong sarili ng kapayapaan ng isip.

4. Ano ang mga pinaka -karaniwang sample prep 'nabigo'?

Ang hindi tamang pagpili ng lamad ng filter ay isang problema na nakikita natin. Ang mga isyu ay maaaring lumitaw bilang mga extraneous peak mula sa mga extractable, na maaaring makagambala sa pagtuklas ng mga analyt ng interes. Ang hindi pagkakatugma ng filter media na may isang sample o solvent sa mga tuntunin ng paglaban ng kemikal ay hindi lamang limitado sa mga epekto ng paglusaw sa filter media. Ang mga solvent ay maaaring maging sanhi ng bahagyang pamamaga ng mga materyales na polymeric lamad kung hindi ganap na magkatugma, na kung saan ay maaaring makaapekto sa pagganap ng pagsasala, na humahantong sa hindi epektibo na paglilinis ng mga sample. Ang isang paraan upang matugunan ang isyung ito ay sa pamamagitan ng pagpili ng isang lamad na malawak na katugma sa parehong may tubig at organikong solvent. Para sa tipikal na paghahanda ng sample ng HPLC, ang syringe at walang syring na mga filter na naglalaman ng mga regenerated cellulose membranes ay isang mahusay na pagpipilian dahil sa kanilang malawak na pagkakatugma sa solvent.

Ang paggamit ng isang aparato ng filter na mas malaki kaysa sa kinakailangan para sa dami na inihanda ay isa pang karaniwang pitfall. Ang paggamit ng masyadong maraming mga aparato ng filter ay nangangahulugan na ang maliit na halaga ng sample ay mananatili sa filter, kahit na matapos ang pag-iingat ay gagawa upang paalisin hangga't maaari.

5. Ano ang mga bentahe ng pagkuha ng hakbang sa pagsasala?

Ang isang pangunahing layunin ng karamihan sa mga laboratoryo na nakikibahagi sa pagsusuri sa pagsusuri ay ang pagbuo ng mga pare -pareho na proseso na sumusuporta sa pare -pareho na mga resulta - at nangangailangan ng pare -pareho na pag -filter. Ang pagpili ng isang aparato ng pagsasala na may tamang laki ng butas at mga katangian ng pagpapanatili ay nakakatulong na matiyak ang epektibong pag -alis ng particulate, habang ang pagpili ng naaangkop na laki at disenyo ng yunit ng filter ay makakatulong na mabawasan ang pagkawala ng sample. Ang mahusay na pagsasala ay tumutulong din upang maprotektahan ang haligi at potensyal na mapalawak ang buhay ng parehong injector at ang haligi.

Konklusyon

Ang HPLC ay isang mahalagang pamamaraan para sa agham sa buhay at pananaliksik ng biopharmaceutical dahil naghahatid ito ng tumpak, maaaring mabuo na mga resulta. Ang katumpakan na ito ay nakasalalay sa integridad ng sample ng HPLC, at ang pinakamahusay na paraan upang matiyak ang mga de-kalidad na mga sample ay upang magsimula sa pinakamahusay na mga tool. Sa mga solusyon para sa tubig ng ultrapure, karaniwang paghahanda, pipette, mga tip, at mga filter, ang mga hplc sample na linya ng paghahanda para sa bawat detalye. Ang mga awtomatikong solusyon at software ay makakatulong din upang i -streamline ang paghahanda ng sample upang maihatid ang malinis na mga sample para sa malinis na mga resulta.

Higit pang mga talakayan tungkol sa mga solusyon sa paghahanda ng sample ng HPLC ay tinatanggap!