Örnek hazırlama ve filtrasyon: Kromatografide kalitenin sağlanması

Uygun numune hazırlığı - temizlik kapları, partikülleri çıkarın, analitleri zenginleştirin ve gerekirse türevselleştirin - temel gürültü ve basınç anomalilerinin% 90'ından fazlasını verir, keskin zirveler ve stabil taban çizgileri sağlar. Burada başarısızlık, tepe kuyruklama, sürüklenen taban çizgileri veya sütun tıkanıklığı ile sonuçlanır.

1. Kontaminasyon ve matris paraziti

Sorun

• Temel sürüklenme ve yükselen gürültü küçük zirveleri gizler.

• Beklenmedik zirveler süzülmüş safsızlıklardan ortaya çıkar.

• Enjeksiyonlar arasında zayıf tekrarlanabilirlik.
  

  

Neden

• Cam eşyalardaki kalıntılar: eksik asit yıkama, silikatlar; Plastik eşyalar plastikleştiricileri sızdırabilir.

• Temizlik Ajanları: Durdurma çözücülerdeki izleme organikleri adsorbe edilmeye devam ediyor.

• Çevresel partiküller: laboratuvar hava tozu ve VOC'ler açık numunelere adsorbe.
  

  

Çözüm

1. Sıkı Temizlik SOP: Asit ıslatma → ultrasonik saf su durulama → cam eşyalar için Azot kuru; Plastikler için özel deterjan.

2. Filtreleme: 10 dakika boyunca 3000rpm'de santrifüj yapın veya son 0.22 um filtrasyondan önce 5 um'lik bir prefilter kullanın.

3. Kontrollü ortam: Havadaki kontaminasyonu en aza indirmek için laminer akış kaputunda hazırlık yapın.
   
   

2. Uyumsuz filtrelerden filtre tıkanması

Sorun

• Otomatik örnekleme basınç alarmları ve sık iğne replasmanları.

• Azalan akış hızı, tutarsız tepe alanları.

• Yüksek geri basınç ve kolon giriş tıkanıklığı.
  

  

Neden

• Membran uyumsuzluğu: Naylon organik çözücülerde şişer; PVDF yüksek sıcaklıkta sürünür.

• Yanlış gözenek boyutu: 0.22 um filtreler ince partikülleri yakalar, ancak akışı azaltır; 0.45 um filtreler yine de mikrokristallerle tıkanabilir.

Çözüm

1. Membran -olvent matrisi: Sulu (pH4-8) için hidrofilik pes \ / mCE, hidrofobik ptfe \ / pvdf kullanın; Güçlü asitlerde selüloz asetattan kaçının.

2. Uygun gözenek boyutunu seçin: Rutin HPLC için 0.45 um, UHPLC veya iz çalışması için 0.22 um kullanın; 5 um ile yüksek viskoziteli örnekler.

3. Monitör ΔP: Baskı artışını izleyin; Backpresür>%15 arttığında filtreyi değiştirin.
   
   

   

3. Solvent - Membran kimyasal uyumsuzluğu

Sorun

• Filtrelenmiş numune bulutlu görünür veya parçacıklar taşır.

• Filtrasyon sonrası yeni temel gürültü veya hayalet zirveleri.

• Azaltılmış analit geri kazanımı.
  

  

Neden

• Solvent şişmesi: THF, gözenek boyutunu ve akışını değiştirerek PTFE'yi şişirir.

• Membran Sızıntıları: Formik asitte naylon, 214nm'de emilen oligomerleri serbest bırakır.

Çözüm

1. Uyumluluk testi: 25 ° C'de 24 saat boyunca amaçlanan çözücü içinde filtreyi ıslatın; Şişlik veya kilo değişimi için denetleyin.

2. Pilot LC - MS Testi: Filtrelenmiş ve filtrelenmemiş numunenin toplam iyon kromatogramlarını karşılaştırın.

3. Düşük Leach filtreleri kullanın: ULTRASONIC - WELLED PTFE veya yapıştırıcılar olmayan PE'ler.
   
   

Kalite Sistemi: Savunma - İzelleme - düzeltme

Savunma

Hataları önlemek için SOP'ları temizleme, filtrasyon ve membran seçimi için standartlaştırın.

İzleme

Kaymayı tespit etmek için akış hızı, geri basınç ve boş örnek taban çizgileri kaydolun.

Düzeltme

Hızlı kök -cüzdan tanımlama ve düzeltici eylem için bir arıza ağacı analizini sürdürün.

“Analitik hassasiyet en küçük parçacığı ele geçirmekle başlar.”